WikiDer > Разведение агара

Agar dilution

Разведение агара является одним из двух методов (наряду с разбавлением бульона), используемых исследователями для определения минимальной ингибирующей концентрации (МИК) антибиотиков. Это метод разведения, который наиболее часто используется для проверки эффективности новых антибиотиков, когда несколько антибиотиков проверяются на большом количестве различных бактерий.[1]:149[2]

Процесс

Тестируемый антибиотик разбавляют водой для получения ряда концентраций. Затем соответствующий объем объединяют с расплавленным агаром для получения чашек, в которых конечные концентрации антибиотика представляют собой серию 2-кратных разведений. После этого бактерии, приготовленные до стандартной концентрации, добавляются в виде пятна на каждую чашку по 10 штук.4 колониеобразующих единиц (КОЕ) на пятно. Этот метод позволяет тестировать реплики пятен одного типа бактерий. [3] или пятна различных бактерий, чтобы можно было проверить МПК антибиотика против нескольких типов бактерий. Необходимые средства контроля включают контрольную чашку, в которую не вводят никаких антибиотиков, и чашки для распределения бактерий, демонстрирующие, что бактериальный посевной материал находится в правильном диапазоне концентраций. Затем планшеты для разведения инкубируют при температуре 37 градусов. Цельсия.[4] Затем планшеты инкубируют в течение шестнадцати-восемнадцати часов, хотя время инкубации может быть меньше для популяций бактерий, которые быстро делятся.[1]:374 После инкубации чашки исследуют, чтобы определить, произошел ли рост бактерий в засеянных пятнах. Самая низкая концентрация антибиотиков, которая предотвращает рост бактерий, считается минимальной ингибирующей концентрацией этого антибиотика против этой бактерии.[4]

Преимущества

Разбавление агара считается Золотой стандарт тестов на чувствительность, или наиболее точный способ измерения устойчивости бактерий к антибиотикам. Результаты разбавления агара легко воспроизводятся, и их можно отслеживать при гораздо меньших затратах, чем то, что требуется от других методов разбавления. Кроме того, можно протестировать до тридцати образцов патогенов (плюс два контроля) одновременно, поэтому разведение в агаровой среде полезно для серийных тестов.[1]:149

Недостатки

Каждую чашку для разведения при тестировании с агаром необходимо вручную инокулировать исследуемым патогеном, поэтому тестирование разведения в агаре является трудоемким и дорогостоящим.[1]:149 В отличие от микроразбавление бульона анализы, разведение в агаре нельзя использовать для одновременного тестирования более одного антибиотика.[5]

Рекомендации

  1. ^ а б c d Лориан, Виктор (2005). Антибиотики в лабораторной медицине. Липпинкотт Уильямс и Уилкинс.
  2. ^ Виганд, Ирит; Хильперт, Кай; Хэнкок, Роберт Э. У. (17 января 2008 г.). «Методы разбавления агара и бульона для определения минимальной ингибирующей концентрации (МПК) антимикробных веществ». Протоколы природы. 3: 163–75. Дои:10.1038 / nprot.2007.521. PMID 18274517.
  3. ^ Европейский комитет по тестированию чувствительности к противомикробным препаратам Европейского общества клинической микробиологии и инфекционных заболеваний (сентябрь 2000 г.). «Определение минимальных ингибирующих концентраций (МПК) антибактериальных агентов путем разведения в агаре». Клиническая микробиология и инфекции. 6 (9): 509–515. Дои:10.1046 / j.1469-0691.2000.00142.x.
  4. ^ а б Парижа (2009). Учебник микробиологии и иммунологии. Эльзевир Индия. п. 73.
  5. ^ Ли, Мэри (2013). Базовые навыки интерпретации лабораторных данных (5-е изд.). АШП. п. 723. Получено 16 ноября 2014.