WikiDer > Снятие кровли

Cell unroofing
Наиболее распространенные процессы отсоединения клеток. (слева) Сэндвич из двух ячеек между двумя покровными стеклами. (справа) Боковой поток среды позволяет разрушать клетки.

Снятие кровли любой из различных методов изолировать и обнажить клеточная мембрана из клетки. В отличие от более распространенной мембраны протоколы извлечения выполняется с несколькими этапами центрифугирования (цель которого - отделить мембранную фракцию от клеточный лизат), в снятие кровли цель состоит в том, чтобы оторвать и сохранить участки плазматической мембраны для выполнения на месте эксперименты с использованием (микроскопии и биомедицинская спектроскопия).

История

Первое наблюдение за двухслойной клеточной мембраной было сделано в 1959 году.[1] на срезе клетки с помощью электронного микроскопа, но первая микрофотография внутренней стороны клетки датируется 1977 годом.[2] М.В. Нермут. Профессор Джон Хьюзер внесли существенный вклад в эту область, визуализируя детальную внутреннюю структуру мембраны и цитоскелет связаны с ним с широким использованием электронного микроскопа.

Это было только после разработки атомно-силовой микроскоп работал в жидкости, чтобы можно было визуализировать клеточные мембраны в почти-физиологические условия[3] и проверить его механические свойства.[4]

Методы

Смотрите также

Рекомендации

  1. ^ Робертсон, Дж. Д. (1959). «Ультраструктура клеточных мембран и их производных». Biochem. Soc. Symp.
  2. ^ Nermut, M. V .; Уильямс, Линн Д. (1977). «Замораживание монослоев (капиллярных слоев) клеток, мембран и вирусов: некоторые технические соображения». Журнал микроскопии. 110 (2): 121–132. Дои:10.1111 / j.1365-2818.1977.tb00023.x. ISSN 1365-2818. PMID 335072.
  3. ^ Чо, Сан Джун; Ан, Чонхун; Юн, Дэхван; Минаката, Шихо; Ёсимура, Азуми; Усукура, Дзиро (01.10.2012). «Использование техники снятия крышек для атомно-силовой микроскопии внутриклеточного цитоскелета в водных условиях». Журнал электронной микроскопии. 61 (5): 321–326. Дои:10.1093 / jmicro / dfs055. ISSN 0022-0744. PMID 22872282.
  4. ^ а б Гальванетто, Никола (01.12.2018). «Одноклеточное снятие кровли: исследование топологии и наномеханики нативных мембран». Biochimica et Biophysica Acta (BBA) - Биомембраны. 1860 (12): 2532–2538. arXiv:1810.01643. Дои:10.1016 / j.bbamem.2018.09.019. ISSN 0005-2736. PMID 30273580.
  5. ^ Nermut, M. V .; Уильямс, Линн Д. (1977). «Замораживание монослоев (капиллярных слоев) клеток, мембран и вирусов: некоторые технические соображения». Журнал микроскопии. 110 (2): 121–132. Дои:10.1111 / j.1365-2818.1977.tb00023.x. ISSN 1365-2818. PMID 335072.
  6. ^ Хойзер, Джон (2000). «Производство« клеточной коры »для световой и электронной микроскопии». Трафик. 1 (7): 545–552. Дои:10.1034 / j.1600-0854.2000.010704.x. ISSN 1600-0854. PMID 11208142.
  7. ^ Усукура, Дзиро; Ито, Шуичи; Яги, Акира; Нарита, Акихиро; Усукура, Эйдзи (07.06.2016). «Незащищенный метод наблюдения цитоскелета непосредственно при молекулярном разрешении с использованием атомно-силовой микроскопии». Научные отчеты. 6: 27472. Дои:10.1038 / srep27472. ISSN 2045-2322. ЧВК 4895337. PMID 27273367.