WikiDer > Микродиссекция хромосом
Микродиссекция хромосом это метод, который физически удаляет большую часть ДНК из полного хромосома. Наименьшая часть ДНК, которую можно выделить этим методом, составляет 10 миллионов пар оснований - сотни или тысячи отдельных гены.
Ученые, изучающие хромосомы, известны как цитогенетики. Они могут идентифицировать каждую хромосому на основе ее уникального рисунка из темных и светлых полос. Однако определенные аномалии приводят к тому, что хромосомы имеют необычный рисунок полос. Например, в одну хромосому может быть вставлен фрагмент другой хромосомы, что создает дополнительные полосы. Или часть хромосомы может повторяться снова и снова, в результате чего получается необычно широкая темная полоса (известная как однородно окрашивающая область). Некоторые хромосомные аберрации были связаны с рак и унаследованные генетические нарушения, а хромосомы многих опухолевых клеток обнаруживают нерегулярные полосы. Чтобы лучше понять, что вызывает эти состояния, ученые надеются определить, какие гены и последовательности ДНК расположены рядом с этими необычными полосами. Микродиссекция хромосом - это специализированный способ выделения этих областей путем удаления ДНК из полосы и предоставления этой ДНК для дальнейшего изучения.
Чтобы подготовить клетки к микродиссекции хромосом, ученый сначала обрабатывает их химическим веществом, которое заставляет их метафаза: фаза жизненного цикла клетки, когда хромосомы плотно свернуты и хорошо видны. Затем клетки сбрасываются на предметное стекло микроскопа так что ядро, которое скрепляет вместе весь генетический материал, распадается и высвобождает хромосомы на слайд. Затем под микроскопом ученый находит конкретную интересующую полосу и с помощью очень тонкой иглы отрывает эту полосу от остальной хромосомы. Затем исследователь создает несколько копий изолированной ДНК с помощью процедуры, называемой ПЦР (полимеразной цепной реакции). Ученый использует эти копии для изучения ДНК необычного участка хромосомы.
Рекомендации
- Scalenghe F, Turco E, Edstrom JE, Pirrotta V, Melli M .: Микродиссекция и клонирование ДНК из определенной области политенных хромосом Drosophila melanogaster. Хромосома. 1981; 82 (2): 205-16.