WikiDer > Дефосфорилирование - Википедия

Dephosphorylation - Wikipedia

Дефосфорилирование это удаление фосфат (PO43−) группа из органическое соединение к гидролиз. Это обратимый посттрансляционная модификация. Дефосфорилирование и его аналог, фосфорилирование, активировать и деактивировать ферменты путем отсоединения или присоединения фосфорного сложные эфиры и ангидриды. Заметным проявлением дефосфорилирования является превращение АТФ к ADP и неорганический фосфат.

При дефосфорилировании используется тип гидролитического фермента или гидролаза, которые расщепляют сложноэфирные связи. Выдающийся подкласс гидролаз, используемый при дефосфорилировании, - это фосфатаза. Фосфатаза удаляет фосфатные группы путем гидролиза фосфорная кислота моноэфиры в фосфат-ион и молекула со свободным гидроксил (-ОН) группа.

Обратимая реакция фосфорилирования-дефосфорилирования происходит в каждом физиологическом процессе, делая правильную функцию протеинфосфатаз необходимой для жизнеспособности организма. Поскольку дефосфорилирование белка является ключевым процессом, участвующим в передаче сигналов в клетке.[нужна цитата], протеинфосфатазы участвуют в таких состояниях, как сердечные заболевания, диабет и болезнь Альцгеймера.[нужна цитата]

История

Открытие дефосфорилирования произошло в результате серии экспериментов по изучению фермента фосфорилазы, выделенного из скелетных мышц кролика. В 1955 г. Эдвин Кребс и Эдмонд Фишер использовали радиоактивно меченый АТФ, чтобы определить, что фосфат добавлен к сериновому остатку фосфорилазы, чтобы преобразовать его из б к а образуются через фосфорилирование.[1] Впоследствии Кребс и Фишер показали, что это фосфорилирование является частью киназного каскада. Наконец, после очистки фосфорилированной формы фермента фосфорилаза аИонообменную хроматографию из печени кролика использовали для идентификации фосфопротеинфосфатаз I и II.[2]

С момента открытия этих дефосфорилирующих белков обратимая природа фосфорилирования и дефосфорилирования была связана с широким спектром функциональных белков, в первую очередь ферментативных, но также включая неферментативные белки.[3] Эдвин Кребс и Эдмонд Фишер выиграл 1992 Нобелевская премия по физиологии и медицине за открытие обратимого фосфорилирования белков.[4]

Функция

PTEN, фосфатаза.
Кристаллографическая структура человеческая фосфатаза и гомолог тензина (PTEN). В активный сайт синего N-концевой фосфатазный домен показан желтым. В C-терминал Домен C2 показан красным.[5]

Фосфорилирование и дефосфорилирование гидроксильных групп, принадлежащих к нейтральным, но полярным аминокислоты такие как серин, треонин и тирозин в составе определенных белков-мишеней, являются фундаментальной частью регуляции каждого физиологического процесса. Фосфорилирование включает ковалентную модификацию гидроксила фосфатной группой через нуклеофильную атаку альфа-фосфата в АТФ кислородом гидроксила. Дефосфорилирование включает удаление фосфатной группы посредством реакции гидратации путем добавления молекулы воды и высвобождения исходной фосфатной группы, регенерируя гидроксил. Оба процесса обратимы, и любой механизм можно использовать для активации или деактивации белка. Фосфорилирование белка вызывает множество биохимических эффектов, таких как изменение его конформации, чтобы изменить его связывание с конкретным лигандом, чтобы увеличить или уменьшить его активность. Фосфорилирование и дефосфорилирование можно использовать на всех типах субстратов, таких как структурные белки, ферменты, мембранные каналы, сигнальные молекулы и другие. киназы и фосфатазы. Сумма этих процессов называется фосфорегуляцией.[6] Нарушение регуляции фосфорилирования может привести к заболеванию.[7]

Посттрансляционная модификация

Во время синтеза белков полипептидные цепи, которые создаются рибосомами, транслирующими мРНК, должны быть обработаны, прежде чем они примут зрелую конформацию. Дефосфорилирование белков - это механизм изменения поведения белка, часто путем активации или инактивации фермент. Компоненты аппарата для синтеза белка также подвергаются фосфорилированию и дефосфорилированию и, таким образом, регулируют скорость синтеза белка.[8]

В рамках посттрансляционных модификаций фосфатные группы могут быть удалены из серина, треонина или тирозина. Таким образом, пути передачи внутриклеточного сигнала зависят от последовательного фосфорилирования и дефосфорилирования широкого спектра белков.

АТФ

Основная статья: аденозинтрифосфат
Смотрите также: Роль дефосфорилирования в заболевании
АТФ4− + H2O ⟶ ADP3− + HPO42− + H+

Аденозинтрифосфат, или АТФ, действует как «валюта» свободной энергии во всех живых организмах. В реакции спонтанного дефосфорилирования высвобождается 30,5 кДж / моль, которые используются для запуска клеточных реакций. В целом, неспонтанные реакции, связанные с дефосфорилированием АТФ, являются спонтанными из-за отрицательного изменения свободной энергии связанной реакции. Это важно для окислительного фосфорилирования. АТФ дефосфорилируется до АДФ и неорганического фосфата.[9]

На клеточном уровне дефосфорилирование АТФаз определяет поток ионов в клетку и из нее. Ингибиторы протонной помпы - это класс лекарств, которые действуют непосредственно на АТФазы желудочно-кишечного тракта.

Дефосфорилирование в других реакциях

Другие молекулы, помимо АТФ, подвергаются дефосфорилированию как часть других биологических систем. Различные соединения вызывают разные изменения свободной энергии в результате дефосфорилирования.[10]

МолекулаИзменение свободной энергии
Ацетилфосфат47,3 кДж / моль
Глюкозо-6-фосфат13,8 кДж / моль
Фосфоенолпируват (PEP)-61,9 кДж / мес
Фосфокреатин43,1 кДж / мес

Псилоцибин также зависит от дефосфорилирования, который метаболизируется в псилоцин и далее выводится. Информация о влиянии псилоцибина на изменение свободной энергии в настоящее время отсутствует.

Важность дефосфорилирования в Фотосистеме II

Первый белковый комплекс фотосинтез компонент светозависимые реакции упоминается как фотосистема II. В этом комплексе используется фермент для захвата фотонов света, обеспечивая лучший процесс фотосинтеза со всеми электронами, необходимыми для производства АТФ. Фотосистема II особенно чувствительна к температуре,[11] и десфосфорилирование было вовлечено как движущая сила пластичности в ответ на изменяющуюся температуру. Ускоренное дефосфорилирование белков в фотосинтетических тилакоидных мембранах происходит при повышенных температурах, непосредственно влияя на десфосфорилирование ключевых белков в комплексе фотосистемы II.[12]

Роль дефосфорилирования в заболевании

Патология

Чрезмерное дефосфорилирование мембранных АТФаз и протонных насосов в желудочно-кишечном тракте приводит к более высокой секреторной скорости едких пептических кислот. Это приводит к изжоге и эзофагиту. В комбинации с Helicobacter pylori инфекция, язвенная болезнь вызвана дефосфорилированием повышенного pH.[13]

Белок, связанный с микротрубочками тау аномально гиперфосфорилируется при выделении из мозга пациентов, страдающих Болезнь Альцгеймера. Это связано с дисфункцией механизмов дефосфорилирования определенных аминокислот тау-белка. Дефосфорилирование тау-белка катализируется протеинфосфатазой-2A и фосфатазой-2B. Дефицит или модификация одного или обоих белков могут быть вовлечены в аномальное фосфорилирование тау при болезни Альцгеймера.[14]

Дефосфорилирование также связано с сердечная болезнь, в частности, изменение актин-миозиновых взаимодействий, которые являются ключевыми для обеспечения основной силы сердцебиения. Дефосфорилирование - ключевая часть кинетики цикла миозина, которая непосредственно контролирует взаимодействия актин-миозин. Когда процесс дефосфорилирования прерывается, сердечное сокращение, зависимое от кальция, нарушается или полностью прекращается.[15]

Исследования также показали, что модификации дефосфорилирования влияют на физиологические процессы, участвующие в Сахарный диабет. Показано, что кинетика дефосфорилирования инсулинового рецептора субстрата-1/2, Akt и ERK1 / 2, фосфопротеины участвуют в передаче сигналов рецептора инсулина, и in vitro модели демонстрируют, что изменения кинетики дефосфорилирования влияют на стимуляцию инсулином выше и ниже по течению.[16]

Лечение

Подавление протонных насосов[13] значительно снижает кислотность желудочно-кишечного тракта, уменьшая симптомы кислотных заболеваний. В результате изменение pH снижает выживаемость бактерий. H.pylori, основная причина язвенной болезни. Как только ингибитор протонной помпы уничтожает эти бактерии в кишечнике, обращая вспять эрозивный рефлюкс, лечение сердечных заболеваний улучшается с использованием лекарств, которые подавляют AMPK через дефосфорилирование.[17] При лечении диабета сульфонилмочевина препараты способны стимулировать дефосфорилирование переносчика глюкозы GLUT4, снижение инсулинорезистентности и увеличение использования глюкозы.[18]

Приложения для исследований

Дефосфорилирование может играть ключевую роль в молекулярной биологии, особенно в клонирование с помощью рестрикционные ферменты. Обрезанные концы вектор может повторно лигировать во время стадии лигирования из-за фосфорилирования. Используя десфосфорилирующую фосфатазу, можно избежать повторного лигирования.[19] Эти щелочные фосфатазы часто получают естественным путем, чаще всего из кишечника теленка, и сокращенно обозначаются как CIP.[20]

Смотрите также

Рекомендации

  1. ^ ФИШЕР, ЭН; КРЕБС, EG (сентябрь 1955 г.). «Превращение фосфорилазы b в фосфорилазу a в мышечных экстрактах». Журнал биологической химии. 216 (1): 121–32. PMID 13252012.
  2. ^ Ханделвал, Р.Л .; Vandenheede, JR; Кребс, EG (25 августа 1976 г.). «Очистка, свойства и специфичность субстрата фосфопротеинфосфатазы (ов) из печени кролика». Журнал биологической химии. 251 (16): 4850–8. PMID 8449.
  3. ^ Кребс Э. Г., Биво Дж. А. (1979). «Фосфорилирование-дефосфорилирование ферментов». Анну. Преподобный Biochem. 48: 923–59. Дои:10.1146 / annurev.bi.48.070179.004423. PMID 38740.
  4. ^ Раджу TN (июнь 2000 г.). «Нобелевские хроники. 1992: Эдмон Х. Фишер (р. 1920) и Эдвин Г. Кребс (р. 1918)». Ланцет. 355 (9219): 2004. Дои:10.1016 / S0140-6736 (05) 72951-2. PMID 10859071.
  5. ^ PDB: 1d5r​; Ли Джо, Ян Х., Джорджеску М.М., Ди Кристофано А., Маэхама Т., Ши Й., Диксон Дж. Э., Пандольфи П., Павлетич Н. П. (октябрь 1999 г.). «Кристаллическая структура супрессора опухоли PTEN: последствия для его активности фосфоинозитид фосфатазы и мембранной ассоциации». Клетка. 99 (3): 323–34. Дои:10.1016 / S0092-8674 (00) 81663-3. PMID 10555148.
  6. ^ Бельтрао П., Тринидад Дж. К., Фидлер Д. и др. (Июнь 2009 г.). «Эволюция фосфорегуляции: сравнение паттернов фосфорилирования у разных видов дрожжей». PLoS Biol. 7 (6): e1000134. Дои:10.1371 / journal.pbio.1000134. ЧВК 2691599. PMID 19547744.
  7. ^ Бонони А., Аньолетто С., Де Марчи Е. и др. (2011). «Протеинкиназы и фосфатазы в контроле судьбы клеток». Энзим Res. 2011: 329098. Дои:10.4061/2011/329098. ЧВК 3166778. PMID 21904669.
  8. ^ Селис Дж. Э., Мадсен П., Рязанов А. Г. (июнь 1990 г.). «Повышенное фосфорилирование фактора элонгации 2 во время митоза в трансформированных клетках амниона человека коррелирует со сниженной скоростью синтеза белка». Proc. Natl. Акад. Sci. СОЕДИНЕННЫЕ ШТАТЫ АМЕРИКИ. 87 (11): 4231–5. Дои:10.1073 / pnas.87.11.4231. ЧВК 54082. PMID 2349232.
  9. ^ Касидей, Рэйчел. «Энергия для тела: окислительное фосфорилирование». Получено 5 апреля 2013.
  10. ^ Касидей, Рэйчел. «Эксперимент по окислительно-восстановительным реакциям». Энергия для тела: окислительное фосфорилирование. Департамент химии Вашингтонского университета. Получено 24 апреля 2013.
  11. ^ Ямаути, Ясуо (29 июля 2011 г.). «Растения переключают фотосистему на высокую температуру, чтобы защитить фотосистему II». Природа предшествует.
  12. ^ Рокка, А; Аро, EM; Herrmann, RG; Андерссон, Б. Венер, А.В. (август 2000 г.). «Дефосфорилирование белков реакционного центра фотосистемы II в фотосинтетических мембранах растений как немедленная реакция на резкое повышение температуры». Физиология растений. 123 (4): 1525–36. Дои:10.1104 / стр.123.4.1525. ЧВК 59108. PMID 10938368.
  13. ^ а б Робинсон, М. (июнь 2005 г.). «Ингибиторы протонной помпы: обновленная информация об их роли в желудочно-кишечных заболеваниях, связанных с кислотой». Международный журнал клинической практики. 59 (6): 709–15. Дои:10.1111 / j.1368-5031.2005.00517.x. PMID 15924600.
  14. ^ Гонг С.Х., Грундке-Икбал I, Икбал К. (август 1994 г.). «Дефосфорилирование тау-белка, вызванного болезнью Альцгеймера, с помощью протеинфосфатазы-2А». Неврология. 61 (4): 765–72. Дои:10.1016/0306-4522(94)90400-6. PMID 7838376.
  15. ^ Шейх Ф., Оуян К., Кэмпбелл С.Г. и др. (Апрель 2012 г.). «Мышиные и компьютерные модели связывают дефосфорилирование Mlc2v с измененной кинетикой миозина при ранних сердечных заболеваниях». J. Clin. Вкладывать деньги. 122 (4): 1209–21. Дои:10.1172 / JCI61134. ЧВК 3314469. PMID 22426213.
  16. ^ Zhande R, Zhang W, Zheng Y и др. (Декабрь 2006 г.). «Дефосфорилирование по умолчанию, потенциальный механизм регуляции субстрата-1/2 рецептора инсулина, Akt и ERK1 / 2». J. Biol. Chem. 281 (51): 39071–80. Дои:10.1074 / jbc.M605251200. PMID 17068339.
  17. ^ Хатчинсон, Д.С. Саммерс, Р.Дж.; Бенгтссон, Т. (сентябрь 2008 г.). «Регулирование активности AMP-активированной протеинкиназы с помощью рецепторов, связанных с G-белком: потенциальное применение при лечении диабета и сердечных заболеваний». Фармакология и терапия. 119 (3): 291–310. Дои:10.1016 / j.pharmthera.2008.05.008. PMID 18606183.
  18. ^ Мюллер, G; Wied, S (декабрь 1993 г.). «Препарат на основе сульфонилмочевины, глимепирид, стимулирует транспорт глюкозы, транслокацию переносчика глюкозы и дефосфорилирование в инсулинорезистентных адипоцитах крыс in vitro» (PDF). Сахарный диабет. 42 (12): 1852–67. Дои:10.2337 / диабет.42.12.1852. PMID 8243832.
  19. ^ Sambrook, J; Fritsch, E.F .; Маниатис, Т. (1989). Молекулярное клонирование: лабораторное руководство (2-е изд.). Лабораторный пресс Колд-Спринг-Харбор.
  20. ^ Маковец С., Блэкберн Э. Х. (ноябрь 2009 г.). «Передача сигналов о повреждении ДНК предотвращает вредное добавление теломер в разрывы ДНК». Nat. Cell Biol. 11 (11): 1383–6. Дои:10.1038 / ncb1985. ЧВК 2806817. PMID 19838171.

внешняя ссылка