WikiDer > EHA101

EHA101

EHA101 был одним из первых и наиболее широко используемых Агробактерии вспомогательная плазмида для переноса генов растений. Создан в 1985 году в лаборатории Мэри-Делл Чилтон в Вашингтонский университет в Сент-Луисе, он был назван в честь аспирант кто его построил. EH означает "Элизабет Худ", а A означает "Агробактерии". Штамм-помощник EHA101 является производным от A281, гипервирулентного А. tumefaciens штамм, вызывающий большие, быстрорастущие опухоли на пасленовый растения.[1][2] Этот штамм используется для переноса интересующих генов во многие сотни видов растений по всему миру.

За непокорный такие культуры, как кукуруза, пшеница, и рис, вспомогательные штаммы EHA часто используются для переноса генов.[3][4][5] Эти штаммы эффективно способствуют передаче Т-ДНК из-за гипервирулентности гены vir[2] предполагая, что более высокий процент успеха может быть достигнут на этих «трудно трансформируемых» культурах или сорта.

Хромосомный фон EHA101 - C58C1, излеченный нопалин напряжение.[1] Штаммы-помощники произошли от A281, который представляет собой A136 (pTiBo542). A281 был генетически сконструирован посредством двойного кроссовера, сайт-направленной делеции с получением EHA101, штамма с делецией Т-ДНК, пригодного для переноса целевого гена в растения.[2] EHA101 устойчив к канамицин посредством гена npt I вместо Т-ДНК. Исходный штамм, A281, не показывает устойчивость к антибиотикам на более высоких уровнях, чем обычно А. tumefaciens штаммы. Более того, другие трансконъюгантные штаммы на фоне C58C1 не проявляют такой повышенной устойчивости к антибиотикам. Следовательно, эти характеристики являются не просто проявлением хромосомного фона, а, скорее всего, взаимодействием этой плазмиды Ti и хромосомного фона C58.

Ген npt I вместо Т-ДНК в EHA101 требует, чтобы бинарные плазмиды, помещаемые в штамм, кодировали лекарственную устойчивость, отличную от канамицина. Штаммы EHA105 были получены из EHA101 через удаление по направлению сайта гена устойчивости к канамицину из плазмиды Ti, в остальном штаммы идентичны.[6] Этот последний штамм был полезен биотехнологам растений, которые используют канамицин в качестве селектируемого маркера на своих бинарных плазмидах.

Рекомендации

  1. ^ а б Sciaky, D .; Монтойя, А.Л. и Чилтон, М.-Д. (1991). «Компетентная к трансформации ДНК геномная библиотека Arabidopsis в Agrobacterium». Природа Биотехнологии. 9: 963–967. Дои:10.1038 / nbt1091-963.
  2. ^ а б c Hood, E.E .; Helmer, G.L .; Фрейли, Р. И Чилтон, доктор медицины (1986). «Гипервирулентность Agrobacterium tumefaciens A281 кодируется в области pTiBo542 за пределами T = ДНК». Журнал бактериологии. 168: 1291–1301. ЧВК 213636. PMID 3782037.
  3. ^ Hiei, Y .; Ohta, S .; Комари Т. и Кумаширо Т. (1994). «Эффективная трансформация риса (Oryza sativa L.) с помощью Agrobacerium и анализ последовательности границ Т-ДНК». Журнал растений. 6 (2): 271–282. Дои:10.1046 / j.1365-313x.1994.6020271.x. PMID 7920717.
  4. ^ Ishida, Y .; Saito, H .; Ohta, S .; Hiei, Y .; Комари Т. и Кумаширо Т. (1996). «Высокоэффективная трансформация кукурузы (Zea mays L.) с помощью Agrobacterium tumefaciens». Природа Биотехнологии. 14: 745–750. Дои:10.1038 / nbt0696-745. PMID 9630983.
  5. ^ Рамка, Б.Р .; Shou, H .; Chikwamba, R.K .; Zhang, Z .; Xiang, C .; Fonger, T.M .; Pegg, S.E.K .; Li, B .; Нетлтон, Д.С. и Пей, Д. (2002). «Опосредованная Agrobacterium tumefaciens трансформация зародышей кукурузы с использованием стандартной бинарной векторной системы». Физиология растений. 129: 13–22. Дои:10.1104 / стр. 000653. ЧВК 1540222. PMID 12011333.
  6. ^ Hood, E.E .; Gelvin, S.B .; Мельчерс, Л. И Hoekema, A. (1993). «Новые плазмиды-помощники Agrobacterium для передачи генов растениям». Трансгенные исследования. 2: 208–218. Дои:10.1007 / BF01977351.