WikiDer > Адсорбция в расширенном слое

Expanded bed adsorption

Адсорбция в расширенном слое (EBA) является препаративным хроматографический техника, которая делает возможной переработку вязких жидкостей и жидкостей с твердыми частицами.

Принцип

В белок принципы связывания в EBA такие же, как и в классических колоночная хроматография и общие ионный обмен, гидрофобное взаимодействие и аффинная хроматография лиганды могут быть использованы.[1] После завершения стадии адсорбции псевдоожиженный слой промывают, чтобы вымыть любые оставшиеся частицы. Элюция адсорбированных белков обычно выполняли с элюент течь в обратном направлении; то есть, как обычный уплотненный слой, чтобы восстановить адсорбированный растворенные вещества в меньшем объеме элюента. Однако было разработано новое поколение колонок EBA, которые поддерживают слой в расширенном состоянии во время этой фазы, обеспечивая высокую чистоту, высокий выход, например, МАт [моноклональные антитела] в еще меньших объемах элюента. Продолжительность производственного процесса также была значительно сокращена (в некоторых случаях до 7 часов).

EBA может рассматриваться как объединение этапов «Удаление нерастворимых материалов» и «Изоляция» из 4 этапов. последующая обработка эвристический. Основными ограничениями, связанными с технологией EBA, являются взаимодействия биомассы и агрегация на адсорбенте во время обработки.[2]

Где классическая колонна хроматография использует твердую фазу, образованную уплотненным слоем, EBA использует частицы в псевдоожиженный состояние, идеально расширенное в 2 раза. Адсорбция в расширенном слое, однако, отличается от хроматографии в псевдоожиженном слое по существу двумя способами: во-первых, смола EBA содержит частицы различного размера и плотности, что приводит к градиенту размера частиц при расширении; и во-вторых, когда кровать находится в расширенном состоянии, образуются локальные петли. Частицы, такие как целые клетки или клеточный мусор, которые забивают колонку с насадочным слоем, легко проходят через псевдоожиженный слой.[3] Таким образом, EBA можно использовать с неочищенными культуральными бульонами или суспензиями разрушенных клеток, минуя начальные этапы очистки, такие как центрифугирование и фильтрация, что является обязательным при использовании уплотненных кроватей. В старых конструкциях колонок EBA скорость потока сырья поддерживается на достаточно низком уровне, чтобы твердая насадка оставалась расслоенной и не псевдоожижалась полностью. Следовательно, EBA можно смоделировать как фронтальную. адсорбция в насадочном слое, а не в качестве хорошо перемешанного адсорбера с непрерывным потоком.

Рекомендации

  1. ^ Vennapusa, R. R .; Биннер, S .; Cabrera, R .; Фернандес-Лахор, М. (2008). «Поверхностная энергия для оценки микробной адгезии на адсорбентах для флюидизированной хроматографии». Инженерия в науках о жизни. 8 (5): 530. Дои:10.1002 / elsc.200800027. S2CID 84105652.
  2. ^ Vennapusa, R .; Hunegnaw, S .; Cabrera, R .; Фернандес-Лахор, М. (2008). «Оценка взаимодействий адсорбент-биомасса во время адсорбции в расширенном слое на ионообменниках с использованием поверхностной энергетики». Журнал хроматографии А. 1181 (1–2): 9–20. Дои:10.1016 / j.chroma.2007.11.078. PMID 18199439.
  3. ^ Хьорт, Р. (1997). «Адсорбция в расширенном слое в промышленной биотехнологии: последние разработки». Тенденции в биотехнологии. 15 (6): 230–235. Дои:10.1016 / S0167-7799 (97) 01045-7. PMID 9183866.

внешняя ссылка