WikiDer > Французский пресс для камер под давлением
В Французский пресс для камер под давлением, или же Французская пресса, это аппарат, используемый в биологических экспериментах для нарушить то плазматическая мембрана из клетки пропуская их через узкий клапан под высоким давлением.[1] French Press также можно использовать для дезинтеграции хлоропластов, гомогенатов тканей животных и других биологических частиц. Он способен разрушать клеточные стенки, оставляя ядро клетки нетронутым. Французская пресса была изобретена Чарльз Стейси Френч из Институт Карнеги Вашингтона.[2]В прессе используется внешний гидравлический насос для привода поршень внутри большего цилиндра, содержащего жидкую пробу. Затем образец под высоким давлением проталкивается через игольчатый вентиль. Когда образец проходит через клапан, жидкость испытывает напряжение сдвига и декомпрессия, вызывая разрушение клеток. Основные компоненты френч-пресса сделаны из нержавеющая сталь для предотвращения загрязнения образца.
Френч-пресс обычно используется для разрыва эластичной плазматической мембраны и клеточные стенки из бактерии и других микроорганизмов для изоляции белки и другие клеточные компоненты.[3] Разрушение клеток во френч-прессе приводит к образованию мембранных везикул, которые необходимы для многих in vitro биохимические анализы. Перед использованием клетку обычно охлаждают в течение ночи для сохранения ферментативной активности.
К недостаткам пресса можно отнести то, что он не очень хорошо подходит для обработки больших объемов образцов и его несколько сложно эксплуатировать из-за большого веса узла (около 14 кг). Другой недостаток состоит в том, что входной объем ячейки не должен содержать больших скоплений ячеек, что требует предварительной обработки (обычно ультразвуковой). Если скопления клеток не удалить перед обработкой, происходит засорение клапана, и перед продолжением обработки устройство необходимо тщательно очистить. В результате многие лаборатории по очистке белков считают, что использования лизоцима и обработки ультразвуком достаточно для повседневной экспрессии бактериального белка.
Другие технологии, такие как обработка ультразвуком и шаровые мельницы, доступны для многих из тех же целей и имеют свои преимущества и недостатки. Например, обработка ультразвуком может генерировать высокие силы сдвига, которые разбивают клеточную ДНК на мелкие фрагменты. С помощью французского пресса усилие сдвига можно точно регулировать, регулируя давление поршня. Пресс обеспечивает однократный проход через точку максимальной силы сдвига, ограничивая повреждение хрупких биологических структур из-за повторяющегося сдвига, как при других методах разрушения.[4]
Смотрите также
Рекомендации
- ^ Vanderheiden GJ, Fairchild AC, Jago GR (май 1970 г.). «Конструирование лабораторного пресса для использования с французской ячейкой давления». Appl Microbiol. 19 (5): 875–7. Дои:10.1128 / AEM.19.5.875-877.1970. ЧВК 376809. PMID 5422315.
- ^ Форк, Говинджи; С, Дэвид (2006). Чарльз Стейси Френч. 88. Биографические воспоминания Национальной академии наук. С. 62–89.
- ^ Фанелли, Алекс (2016). «Разработка проб». Получено 8 декабря 2017.
- ^ «Важные примечания по использованию французской ячейки давления». Лаборатория птиц. Архивировано из оригинал в 2010-07-30. Получено 2009-11-13.