WikiDer > Сигнал рибосомного сдвига рамки считывания ВИЧ - Википедия
| Сигнал сдвига рамки считывания рибосом ВИЧ-1 | |
|---|---|
 Предсказанный вторичная структура и сохранение последовательности HIV_FE | |
| Идентификаторы | |
| Символ | HIV_FE |
| Рфам | RF00480 |
| Прочие данные | |
| РНК тип | Снг; framehift_element |
| Домен (ы) | Вирусы |
| ТАК | ТАК: 0000233 |
| PDB структуры | PDBe |
Сигнал сдвига рамки рибосомы ВИЧ это рибосомальный сдвиг рамки (PRF), что Вирус иммунодефицита человека (ВИЧ) использует для перевода нескольких разных белков из одного и того же последовательность.
Неповрежденный и последовательный биосинтез белка полагается на способность рибосома оставаться в правильном открытая рамка чтения (ORF) во время перевод.[1] Когда рибосома не поддерживает правильную открытую рамку считывания, трансляция обычно приводит либо к неправильному синтезу белка, либо к раннему прекращению в результате введения преждевременного стоп-кодон.[2] Однако изменение ORF не всегда вредно, так как многие вирусы извлечь выгоду из этого явления, используя запрограммированный рибосомальный сдвиг рамки (PRF) для перевода нескольких белков из одного и того же последовательность, тем самым максимально увеличивая емкость их геном.[2] Таким образом, многие вирусы (в том числе ВИЧ-1) классифицируются как имеющие полицистронный геном, то есть они используют несколько активных ORF в одном ген.[2]
Вирусу ВИЧ-1 требуется запрограммированный сигнал сдвига рамки рибосомы -1 (сигнал сдвига рамки рибосомы ВИЧ-1) для экспрессии Pol ген, который является примером цис-действующий элемент из генная регуляция. В ВИЧ-1 кляп ORF, который кодирует 55 кДа Gag-белок, основной структурный белок, расположен на 5'-конце полноразмерного вирусного мРНК.[3] Трансляция полипротеина Gag-Pol 160 кДа зависит от события сдвига рамки считывания -1 рибосомы, выявляющего pol ORF.[4] В pol ORF расположена 3 'от ORF gag и кодирует полипротеин Pol, который в конечном итоге расщепляется на ферментативные белки вируса (протеаза, обратная транскриптаза, и интегрировать).
В результате сигнал рибосомного сдвига рамки ВИЧ-1 сильно регулируется, поскольку он модулирует уровни экспрессии белка Gag по сравнению с полипротеином Gag-Pol. Эффективность сигнала сдвига рамки считывания рибосом ВИЧ-1 определяет соотношение синтезированных белков Gag и Gag-Pol, при этом событие сдвига рамки считывания происходит примерно в 5% от общего числа событий трансляции, что приводит к примерно 20: 1 Gag / Gag-Pol соотношение.[1] Было показано, что сохранение этого соотношения является важным для инфекционности и структуры ВИЧ-1, поскольку даже небольшие изменения в эффективности сдвига рамки считывания приводят к ингибированию распространения вируса.[3] Зависимость вируса ВИЧ-1 от этого сигнала сдвига рамки считывания рибосом вызвала интерес к сдвигу рамки считывания как мишени для новых исследований. противовирусное средство терапия.[4][5]
Устройство и механизм
Сигнал сдвига рамки считывания рибосомы ВИЧ-1 требует наличия двух цис-действующих элементов: гептамерный "скользкий участок" и вниз по течению вторичная структура РНК разделены 8-нуклеотид распорка.[3][4] «Скользкий сайт» в ВИЧ-1 - это гептамер 5'-U UUU UUA-3 '(закрытая ORF, обозначенная пробелами), где происходит сдвиг рамки.[3][4] Этот гептамер по своей природе «скользкий», поскольку данные показали, что даже в отсутствие структуры вторичной РНК, расположенной ниже по течению, сдвиг рамки считывания все еще происходит при примерно 0,0001% - 0,1% на кодон.[2] Принято считать, что вторичная структура РНК ниже по течению существует как стебель-петля структура, как показано ниже. Однако есть также свидетельства того, что сигнал сдвига кадра может существовать как псевдоузел структура или как внутримолекулярная РНК триплекс.[2][4] Независимо от точной конформации вторичной структуры РНК, расположенной ниже по течению, считается, что эта структура приводит к задержке транслокационной рибосомы на скользком участке, увеличивая вероятность сдвига рамки -1 рибосомы для выявления pol ORF (5'-UUU UUU A -3 '), минуя нижний стоп-кодон, присутствующий в ORF gag, и позволяя транслировать полипротеин Gag-Pol.[3][5] Данные показали, что 8-нуклеотидный спейсер также важен для запрограммированного сдвига рамки считывания рибосом, поскольку делеции в области спейсера снижают стабильность расположенной ниже вторичной структуры РНК, тем самым влияя на способность сигнала сдвига рамки считывания рибосомы ВИЧ-1 индуцировать -1 кадровая сдвиг.[2]
Модуляторы
Эндогенные клеточные факторы также могут модулировать сигнал сдвига рамки считывания рибосом ВИЧ-1, поскольку сообщалось, что фактор высвобождения эукариот eRF1 играет роль в запрограммированном сдвиге рамки считывания рибосом у ВИЧ-1, поскольку снижение уровней eRF1 приводит к увеличению запрограммированного сдвига рамки считывания рибосом у ВИЧ-1.[1] Однако, поскольку известно, что eRF1 образует комплекс по меньшей мере с 32 клеточными партнерами по связыванию, остается неясным, действует ли eRF1 независимо, модулируя PRF в ВИЧ-1, или он является частью более крупного регуляторного белкового комплекса.[1]
Как потенциальная терапевтическая цель
Сигнал рибосомного сдвига рамки ВИЧ-1 стал потенциальной терапевтической мишенью для вируса ВИЧ-1 из-за необходимости запрограммированного сдвига рамки считывания рибосом для регуляции соотношения белков Gag / Gag-Pol и относительно консервативной структуры.[4] Кроме того, поскольку сигнал сдвига рамки считывания рибосомы ВИЧ-1 основан на взаимодействиях между вирусной мРНК и трансляционным аппаратом хозяина, он, вероятно, является более стабильной терапевтической мишенью, поскольку любой селективное давление вызванная терапевтическим соединением, должна происходить в эволюционной шкале времени хозяина, а не быстро эволюционирующего вируса ВИЧ-1.[4] В результате это также может снизить риск появления мутантов, устойчивых к лекарственным препаратам, с которыми сталкиваются другие антиретровирусные препараты против ВИЧ-1.[4]
Недавно (январь 2014 г.) о первом терапевтическом соединении, направленном на сигнал сдвига рамки считывания рибосомы ВИЧ-1, сообщили Ofori et al.[5] Ведущее соединение было разработано из "хитового" соединения, обнаруженного на экране динамической комбинаторной библиотеки, связанной со смолой, и структура показана справа.[5] В EC50 сообщалось, что значения составляют 3,9 мкМ для конформации Z и 25,6 мкМ для конформации E. Ведущее соединение является симметричным, тогда как вторичная структура целевой вторичной РНК несимметрична, что позволяет предположить, что оба предполагают интеркаляторы необходимы для связывания с высоким сродством.[5] Использование двойноголюцифераза исследования, они пришли к выводу, что соединение функционирует за счет повышения эффективности сдвига рамки считывания сигнала сдвига рамки считывания рибосом ВИЧ-1, что приводит к снижению соотношения белков Gag / Gag-Pol и тем самым предотвращает надлежащее созревание вирусной частицы и, в конечном итоге, ингибирует инфекцию.[5] Двигаясь вперед, структурные исследования взаимодействий между ведущим соединением и структурой вторичной РНК нижестоящего сигнала сдвига рамки считывания рибосомы ВИЧ-1 будут иметь жизненно важное значение для понимания причины высокого сродства и метода действия.[5]
Смотрите также
Рекомендации
- ^ а б c d Кобаяши Ю., Чжуан Дж., Пельц С., Догерти Дж. (Июнь 2010 г.). «Идентификация клеточного фактора, который модулирует запрограммированный сдвиг рамки рибосомы ВИЧ-1». Журнал биологической химии. 285 (26): 19776–19784. Дои:10.1074 / jbc.M109.085621. ЧВК 2888388. PMID 20418372.
- ^ а б c d е ж Музакис К.Д., Ланг А.Л., Вандер Меулен К.А., Easterday PD, Butcher SE (февраль 2013 г.). «Эффективность сдвига рамки считывания ВИЧ-1 в первую очередь определяется стабильностью пар оснований, расположенных во входном канале мРНК рибосомы». Исследования нуклеиновых кислот. 41 (3): 1901–1913. Дои:10.1093 / нар / гкс1254. ЧВК 3561942. PMID 23248007.
- ^ а б c d е Динман Дж. Д., Рихтер С., Плант Е. П., Тейлор Р. К., Хаммелл А. Б., Рана TM (апрель 2002 г.). «Сигнал сдвига рамки считывания ВИЧ-1 включает потенциальную внутримолекулярную структуру триплексной РНК». Труды Национальной академии наук Соединенных Штатов Америки. 99 (8): 5331–5336. Дои:10.1073 / pnas.082102199. ЧВК 122769. PMID 11959986.
- ^ а б c d е ж грамм час Бисвас П., Цзян X, Паккиа А.Л., Догерти Дж. П., Пельц ЮЗ (февраль 2004 г.). «Сайт рибосомного сдвига рамки считывания вируса иммунодефицита человека типа 1 является детерминантой инвариантной последовательности и важной мишенью для противовирусной терапии». Журнал вирусологии. 78 (4): 2082–2087. Дои:10.1128 / jvi.78.4.2082-2087.2004. ЧВК 369415. PMID 14747573.
- ^ а б c d е ж грамм Офори Л.О., Хилимир Т.А., Беннетт Р.П., Браун Н.В., Смит ХК, Миллер Б.Л. (февраль 2014 г.). «Высокоаффинное распознавание РНК ВИЧ-1, стимулирующей сдвиг рамки считывания, изменяет сдвиг рамки считывания in vitro и препятствует инфицированию ВИЧ-1». Журнал медицинской химии. 57 (3): 723–732. Дои:10,1021 / jm401438g. ЧВК 3954503. PMID 24387306.