WikiDer > Анализ локальных лимфатических узлов

В мышиный анализ локальных лимфатических узлов (LLNA) - это in vivo тест на сенсибилизация кожи.

LLNA в значительной степени вытеснила Максимальный тест на морских свинках и Тест Бюлера. Он считается более научным и менее жестоким (меньшее количество животных; меньше страданий) и нашел широкое научное и нормативное признание.

Принцип, лежащий в основе LLNA, заключается в том, что сенсибилизаторы кожи вызывают рост лимфоциты в лимфатический узел слив с сайта приложения. Лимфоцит распространение можно измерить радиоактивная маркировка (количественное определение тритиадных тимидин), биолюминесценция (количественная оценка АТФ содержание в лимфоцитах) или иммуноанализ (ELISA используя антитело специфический для Брду).^[1]

Тестовый материал наносят на уши мышей. Необязательно, индикаторное вещество, такое как 3H-метил-тимидин или же Брду вводится внутрибрюшинно для включения лимфоцитов. Животных умерщвляют, удаляют и анализируют их лимфатические узлы. Коэффициент включения индикатора в лимфатические узлы животных, которым вводили дозу, сравнивают с контрольными животными, получая индекс стимуляции (SI). Когда индекс стимуляции превышает 3 (SI> 3), предполагается соответствующий сенсибилизирующий потенциал. В отличие от классических тестов на морских свинках, LLNA обеспечивает количественное измерение сенсибилизирующей активности тестируемого химического вещества.^[2]

LLNA может не подходить для некоторых металлических соединений, поверхностно-активных веществ, высокомолекулярных белков, сильных раздражителей кожи и материалов, которые недостаточно прилипают к уху в течение приемлемого периода времени во время лечения. Абсолютного соответствия сенсибилизирующему потенциалу вещества у мыши, морской свинки и человека нет.

Нормативный

В Руководящие принципы ОЭСР по тестированию химических веществ директива № 429 от 23 июля 2010 г.^[3]

В Регламент REACHВ параграфе 8.3 Приложения VII говорится: «Анализ локальных лимфатических узлов мышей (LLNA) является методом первого выбора для in vivo тестирование. Только в исключительных случаях можно использовать другой тест. Должно быть предоставлено обоснование для использования другого теста ".

Согласно европейскому руководству OECD 406 Skin Sensitization, LLNA или MEST (Тест на опухоль уха мыши) может использоваться в качестве первого этапа оценки потенциала сенсибилизации кожи. Если в любом из анализов наблюдается положительный результат, тестируемое вещество может быть обозначено как потенциальный сенсибилизатор, и может не потребоваться проведение дополнительного теста на морской свинке. Однако, если в LLNA или MEST наблюдается отрицательный результат, необходимо провести тест на морской свинке (предпочтительно GPMT или BT).

Рекомендации