WikiDer > Электрофоретический цветной маркер

Electrophoretic color marker

An электрофоретический маркер цвета используется для отслеживания прогресса электрофорез в агарозном геле и электрофорез в полиакриламидном геле (PAGE), поскольку ДНК, РНК и большинство белков бесцветны. Их также называют отслеживанием красители, и часто присутствуют в загрузочных красителях, а также в ступенях молекулярной массы.[1]

Примеры

Обычно используемые цветные маркеры включают Бромфеноловый синий, Крезол Красный, Оранжевый G и Ксилол цианол. Вообще говоря, Orange G мигрирует быстрее, чем бромфеноловый синий, который мигрирует быстрее, чем ксилолцианол, но видимые «размеры» этих красителей (по сравнению с молекулами ДНК) варьируются в зависимости от концентрации агарозы и буфер система используется. Например, в 1% агароза гель, изготовленный в буфере TAE (Трис-ацетат-EDTA), ксилолцианол мигрирует со скоростью 3000 пар оснований (пар оснований) молекулы ДНК, а бромфеноловый синий мигрирует со скоростью 400 пар оснований. Однако в 1% геле, приготовленном в буфере TBE (Tris-борат-EDTA), они мигрируют на 2000 и 250 пар оснований соответственно.

Приложения

Цветные маркеры иногда добавляют в загрузочные красители для гель-электрофореза при разделении фрагментов ДНК. Нанесение красок удерживает образцы ДНК под поверхностью агарозного геля, а цветные маркеры внутри помогают отслеживать фронт миграции ДНК, когда она движется по гелю.[2]

Для PAGE некоторые коммерчески доступные маркеры молекулярной массы (также называемые «лестницами», потому что они выглядят как ступеньки лестницы после разделения) содержат предварительно окрашенные белки разных цветов, поэтому можно более точно определить, где интересующие белки находятся образцы могут быть.

использованная литература

  1. ^ Кепплер-Росс, Сабина; Ноффз, Кристина; Дин, Нета (2008). «Новый фиолетовый флуоресцентный цветной маркер для генетических исследований Saccharomyces cerevisiae и Candida albicans». Генетика. 179 (1): 705–10. Дои:10.1534 / генетика.108.087080. ЧВК 2390648. PMID 18493083.
  2. ^ Ли, Пей Юнь; Костумбрадо, Джон; Сюй, Чжи-Юань; Ким, Ён Хун (2012). «Электрофорез в агарозном геле для разделения фрагментов ДНК». Журнал визуализированных экспериментов. 62. Дои:10.3791/3923. ЧВК 4846332. PMID 22546956.