WikiDer > Нитроцефин
 | |
| Идентификаторы | |
|---|---|
| |
| Количество CAS | |
| PubChem CID | |
| ChemSpider | |
| UNII | |
| ЧЭМБЛ | |
| ECHA InfoCard | 100.164.734  |
| Химические и физические данные | |
| Формула | C21ЧАС16N4О8S2 |
| Молярная масса | 516.50 г · моль−1 |
| (проверять) | |
Нитроцефин это хромогенный цефалоспорин субстрат, обычно используемый для обнаружения присутствия бета-лактамаза ферменты, продуцируемые различными микробами. Бета-лактамаза опосредованное сопротивление бета-лактам антибиотики, такие как пенициллин является широко распространенным механизмом сопротивления целому ряду бактерии включая членов семьи Энтеробактерии, основная группа кишечных Грамотрицательные бактерии. Другие методы для бета-лактамаза обнаружение существует в том числе ПЦР; однако нитроцефин позволяет быстро бета-лактамаза обнаружение с использованием небольшого количества материалов и недорогого оборудования.[1][2]
Структура
Как цефалоспорин, нитроцефин содержит бета-лактам кольцо, которое восприимчиво к бета-лактамаза опосредованный гидролиз. После гидролиза разложившееся соединение нитроцефина быстро меняет цвет с желтого на красный. Хотя нитроцефин считается цефалоспорин, он не обладает противомикробными свойствами.[3]
Деградация и хромогенные свойства
Нетронутый бета-лактам антибиотики действуют путем связывания с связывающие пенициллин белки (PBPs) участвуют в пептидогликан синтез. Бета-лактамазы гидролизовать амид связь между карбонил углерод и азот в бета-лактам кольцо чувствительных бета-лактамов и членов бета-лактам подклассы (включая определенные цефалоспорины). После гидролиза амидной связи антибиотик теряет способность связывать бактериальные PBP и становится бесполезным. Визуальное обнаружение этого процесса практически невозможно с большинством цефалоспорины потому что сдвиг ультрафиолетовый абсорбция из неповрежденного продукта по сравнению с гидролизованным происходит за пределами видимый спектр. Однако гидролиз нитроцефина вызывает сдвиг ультрафиолетовый поглощение в видимом спектре света от интактного (желтого) нитроцефина (~ 380 нм) до деградированного (красного) нитроцефина (~ 500 нм), что позволяет визуально обнаруживать бета-лактамаза активность на макроскопическом уровне.[4]
Анализы обнаружения
Следующие ниже анализы описывают методы, в которых нитроцефин может использоваться для обнаружения бета-лактамаза ферменты с использованием недорогих материалов и оборудования.[5] Рабочие растворы нитроцефина лежат в пределах от 0,5 мг / мл до 1,0 мг / мл.
Анализ поверхности скольжения
- Добавьте одну каплю 0,5 мг / мл нитроцефина на поверхность чистого предметного стекла.
- Выберите колония с поверхности агара стерильной петлей и перемешать с каплей.
- Появление красного цвета через 20-30 мин. указывает бета-лактамаза Мероприятия.
Прямой контактный анализ
- Нанесите одну каплю 0,5 мг / мл нитроцефина непосредственно на поверхность изолированного колония.
- Появление красного цвета через 20-30 мин. указывает бета-лактамаза Мероприятия.
Анализ суспензии бульона
- Добавьте 3-5 капель 0,5 мг / мл нитроцефина в 1 мл бульонной суспензии.
- Появление красного цвета через 20-30 мин. указывает бета-лактамаза Мероприятия.
Анализ лизированных клеток
- Обработайте 1 мл суспензии клеток ультразвуком.
- Добавьте 3-5 капель 0,5 мг / мл нитроцефина к суспензии лизированных клеток.
- Появление красного цвета через 20-30 мин. указывает бета-лактамаза Мероприятия.
Анализ фильтровальной бумаги
- Поместите небольшой кусок фильтровальной бумаги (~ 3 x 3 см) в чистую чашку Петри или другую чистую изолированную поверхность и пропитайте (3-5 мл) нитроцефином 0,5 мг / мл.
- Выберите изолированный колония и размазываем по поверхности пропитанной фильтровальной бумаги.
- Появление красного цвета через 20-30 мин. указывает бета-лактамаза Мероприятия
Смотрите также
- Устойчивость к антибиотикам
- Противомикробный
- Бета-лактам
- β-лактамный антибиотик
- Бета-лактамаза
- Цефалоспорин
- Пептидогликан
Рекомендации
- ^ О'Каллаган, Синтия Х. и др. «Новый метод обнаружения B-лактамаз с использованием хромогенного цефалоспоринового субстрата». Противомикробные агенты и химиотерапия 1.4 (1972): 283-88. Ncbi.gov. Интернет. 10 октября 2012 г.
- ^ Кудрон, П. Э., Э. С. Моланд и К. С. Сандерс. «Возникновение и обнаружение бета-лактамаз расширенного спектра у членов семейства Enterobacteriaceae в медицинском центре для ветеранов: ищите, и вы можете найти». Журнал клинической микробиологии 35.10 (1997): 2593-597. Jcm.asm.org. Интернет. 9 января 2013 г.
- ^ О'Каллаган, Синтия Х. и др. «Новый метод обнаружения B-лактамаз с использованием хромогенного цефалоспоринового субстрата». Противомикробные агенты и химиотерапия 1.4 (1972): 283-88. Ncbi.gov. Интернет. 10 октября 2012 г. 35.10 (1997): 2593-597. Jcm.asm.org. Интернет. 9 января 2013 г.
- ^ О'Каллаган, Синтия Х. и др. «Новый метод обнаружения B-лактамаз с использованием хромогенного цефалоспоринового субстрата». Противомикробные агенты и химиотерапия 1.4 (1972): 283-88. Ncbi.gov. Интернет. 10 октября 2012 г.
- ^ Парр, Т. Р., младший "Простой метод скрининга бета-лактамаз-положительных и -отрицательных ампициллин-резистентных изолятов Haemophilus Influenzae". Журнал клинической микробиологии 20.1 (1984): 131-32. Ncbi.gov. Интернет. 10 октября 2012 г.
- ^ http://www.toku-e.com/Assets/Protocols/Nitrocefin_Protocol.pdf