WikiDer > Тесты на обнаружение антигена малярии

Malaria antigen detection tests
Тесты на обнаружение антигена малярии
Диагностический Медицинский Щуп.png
Принципиальная схема щупа
Цельдиагностика малярии ...

Тесты на обнаружение антигена малярии представляют собой группу коммерчески доступных экспресс-тесты из экспресс-тест на антиген тип, позволяющий быстро диагноз из малярия людьми, не имеющими иных навыков в традиционных лабораторных методах диагностики малярии или в ситуациях, когда такое оборудование недоступно. В настоящее время коммерчески доступно более 20 таких тестов (тестирование продуктов ВОЗ, 2008 г.). Первая малярия антиген подходящим в качестве мишени для такого теста был растворимый гликолитический фермент Глутаматдегидрогеназа.[1][2][3]Ни один из быстрых тестов в настоящее время не так чувствителен, как толстый мазок крови, ни как дешево. Главный недостаток использования всех текущих щуп методов заключается в том, что результат по сути качественный. Во многих эндемичных районах тропическая африкатем не менее, количественная оценка паразитемии важна, так как большой процент населения даст положительный результат при любом качественном анализе.

Экспресс-тесты для диагностики малярии на основе антигенов

Малярия излечима болезнь если пациенты имеют доступ к ранней диагностике и оперативному лечение. На основе антигена экспресс-тесты (RDT) играют важную роль на периферии возможностей служб здравоохранения, поскольку многие сельские клиники не имеют возможности диагностировать малярию на месте из-за отсутствия микроскопов и обученных техники для оценки мазков крови. Кроме того, в регионах, где болезнь не эндемичный, лабораторные технологи имеют очень ограниченный опыт в обнаружении и идентификации паразитов малярии. Ежегодно все большее число путешественников из регионов с умеренным климатом посещают тропические страны и многие из них возвращаются с малярией. Тесты RDT по-прежнему считаются дополнением к традиционным микроскопия но с некоторыми улучшениями он вполне может заменить микроскоп. Тесты просты, и процедуру можно проводить на месте в полевых условиях. Эти тесты используют палку из пальца или венозную кровь, полный тест занимает 15–20 минут, и лаборатория не нужна. Порог обнаружения с помощью этих экспресс-диагностических тестов находится в диапазоне 100 паразитов / мкл крови по сравнению с 5 при толстопленочной микроскопии.[4][5][6]

pGluDH

Плазмодий Глутаматдегидрогеназа (pGluDH) осаждается антителами хозяина[1]

Точный диагноз становится все более и более важным ввиду растущей сопротивляемости Плазмодий falciparum и высокая цена альтернатив хлорохин. Фермент pGluDH не встречается в организме хозяина. эритроцит и был рекомендован в качестве фермента-маркера для Плазмодий виды по Picard-Maureau et al. в 1975 г.[7] Ферментный тест на маркер малярии подходит для повседневной работы и в настоящее время является стандартным тестом в большинстве департаментов, занимающихся малярией. Известно, что присутствие pGluDH отражает жизнеспособность паразита.[2] и быстрый диагностический тест с использованием pGluDH в качестве антигена будет обладать способностью отличать живые организмы от мертвых. Полный RDT с pGluDH в качестве антигена был разработан в Китай и сейчас проходит клинические испытания.[3] GluDH - это вездесущие ферменты, которые занимают важную точку разветвления между углеродным и азотным метаболизмом. Обе никотинамид аденин динуклеотид (НАД) [EC 1.4.1.2] и никотинамидадениндинуклеотидфосфат (НАДФ) зависимые ферменты GluDH [EC 1.4.1.4] присутствуют в Плазмодия; НАД-зависимый GluDH относительно нестабилен и бесполезен для диагностических целей. Глутаматдегидрогеназа представляет собой окисляемый источник углерода, используемый для производства энергии, а также восстановленный переносчик электронов, НАДН. Глутамат является основным донором аминокислот для других аминокислоты в последующих реакциях переаминирования. Многочисленные роли глутамата в балансе азота делают его воротами между свободным аммиаком и аминогруппами большинства аминокислот. Его Кристальная структура опубликовано.[8] Активность GluDH в P.vivax, P.ovale и P. malariae никогда не тестировался, но, учитывая важность GluDH как фермента точки ветвления, каждая клетка должна иметь высокую концентрацию GluDH. Хорошо известно, что ферменты с высокой молекулярной массой (например, GluDH) имеют много изоферменты, что позволяет дифференцировать деформации (при правильном моноклональное антитело). Хозяин продуцирует антитела против паразитарного фермента, что указывает на низкую идентичность последовательности.[1]

Богатый гистидином белок II

Богатый гистидином белок II (HRP II) представляет собой гистидин- и аланин- богатый водорастворимый белок, локализованный в нескольких компартментах клетки, включая цитоплазму паразита. Антиген экспрессируется только P. falciparum трофозоиты.[9][10] HRP II от P. falciparum был замешан в биокристаллизация из гемозоин, инертная кристаллическая форма феррипротопорфирина IX (Fe (3 +) - PPIX), продуцируемая паразитом. Значительное количество HRP II секретируется паразитом в кровоток хозяина, и антиген может быть обнаружен в эритроциты, сыворотка, плазма, спинномозговая жидкость и даже моча как секретируемый водорастворимый белок.[11] Эти антигены сохраняются в циркулирующей крови после того, как паразитемия исчезла или значительно уменьшилась. Обычно для того, чтобы результаты тестов на HRP2 становились отрицательными, после успешного лечения требуется около двух недель, но может пройти и один месяц, что снижает их ценность для выявления активной инфекции.[12] Сообщалось о ложноположительных результатах тест-полосок у пациентов с положительным ревматоидным фактором. ревматоидный артрит.[9] Поскольку HRP-2 выражается только P. falciparum, эти тесты дадут отрицательные результаты с образцами, содержащими только P. vivax, P. ovale, или же P. malariae; поэтому многие случаи малярии, не связанной с falciparum, могут быть ошибочно диагностированы как малярийно-отрицательные (некоторые P.falciparum у штаммов также отсутствует HRP II). Вариабельность результатов ДЭТ на основе pHRP2 связана с вариабельностью целевого антигена.[13]

pLDH

Сравнение антител к малярии лактатдегидрогеназы плазмодия (PLDH)

P. falciparum лактатдегидрогеназа (PfLDH) - 33 кДа оксидоредуктаза [EC 1.1.1.27].[14] Это последний фермент гликолитического пути, необходимый для АТФ поколения и один из самых распространенных ферментов, экспрессируемых P. falciparum.[15] Плазмодий ЛДГ (pLDH) из P. vivax, P. malariae, и P. ovale) проявляют 90-92% идентичности PfLDH от P. falciparum.[16] Было замечено, что уровни pLDH в крови снижаются раньше после лечения, чем HRP2.[17] В этом отношении pLDH похожа на pGluDH. Тем не менее, кинетические свойства и чувствительность к ингибиторам, нацеленным на сайт связывания кофактора, значительно различаются и могут быть идентифицированы путем измерения констант диссоциации для ингибиторов, которые различаются до 21 раза.[18]

pAldo

Фруктозо-бисфосфатальдолаза [EC 4.1.2.13] катализирует ключевую реакцию в гликолиз и производство энергии и производится всеми четырьмя видами.[19] В P.falciparum альдолаза представляет собой белок 41 кДа и имеет 61-68% сходства последовательности с известными эукариотический альдолазы.[20] Его кристаллическая структура опубликована.[21] Присутствие антител против p41 в сыворотке взрослых людей, частично невосприимчивых к малярии, предполагает, что p41 участвует в защитном иммунном ответе против паразита.[22]

Смотрите также

Рекомендации

  1. ^ а б c Ling IT .; Cooksley S .; Bates PA .; Hempelmann E .; Wilson RJM. (1986). «Антитела к глутаматдегидрогеназе Plasmodium falciparum» (PDF). Паразитология. 92 (2): 313–324. Дои:10.1017 / S0031182000064088. PMID 3086819.
  2. ^ а б Родригес-Акоста А., Домингес Н.Г., Агилар I, Хирон М.Э. (1998). «Характеристика антигена, растворимого в глутаматдегидрогеназе Plasmodium falciparum». Braz J Med Biol Res. 31 (9): 1149–1155. Дои:10.1590 / S0100-879X1998000900008. PMID 9876282.
  3. ^ а б Ли И, Нин Ю.С., Ли Л., Пэн Д.Д., Донг В.К., Ли М. (2005). «Приготовление моноклональных антител против глутаматдегидрогеназы Plasmodium falciparum и создание иммунохроматографического анализа коллоидного золота». Ди И Цзюнь И да Сюэ Сюэ Бао = Академический журнал Первого медицинского колледжа НОАК. 25 (4): 435–438. PMID 15837649.
  4. ^ Уорхерст, округ Колумбия, Уильямс Дж. Э. (1996). "Проспект ACP № 148. Июль 1996 г. Лабораторная диагностика малярии". Дж. Клин Патол. 49 (7): 533–38. Дои:10.1136 / jcp.49.7.533. ЧВК 500564. PMID 8813948.
  5. ^ Муди А. (2002). «Экспресс-тесты для диагностики малярийных паразитов». Clin Microbiol Rev. 15 (1): 66–78. Дои:10.1128 / CMR.15.1.66-78.2002. ЧВК 118060. PMID 11781267.
  6. ^ Мюррей CK, Беннетт JW (2008). «Экспресс-диагностика малярии». Междисциплинарная перспектива Infect Dis. 2009: 1–7. Дои:10.1155/2009/415953. ЧВК 2696022. PMID 19547702.
  7. ^ Пикар-Мауро А, Хемпельманн Э, Краммер Г, Джекиш Р., Юнг А (1975). «Glutathionstatus in Plasmodium vinckei parasitierten Erythrozyten в Abhängigkeit vom intraerythrozytären Entwicklungsstadium des Parasiten». Тропенмед Паразитол. 26 (4): 405–416. PMID 1216329.
  8. ^ Вернер С., Стаббс М.Т., Краут-Зигель Р.Л., Клебе Г. (2005). «Кристаллическая структура глутаматдегидрогеназы Plasmodium falciparum, предполагаемая цель для новых противомалярийных препаратов». Дж Мол Биол. 349 (3): 597–607. Дои:10.1016 / j.jmb.2005.03.077. PMID 15878595.
  9. ^ а б Икбал Дж., Шер А., Раб А. (2000). «Диагностический анализ иммунозахвата Plasmodium falciparum на основе гистидина-белка 2 для диагностики малярии: перекрестная реактивность с ревматоидными факторами». J Clin Microbiol. 38 (3): 1184–1186. Дои:10.1128 / JCM.38.3.1184-1186.2000. ЧВК 86370. PMID 10699018.
  10. ^ Бидл С., Лонг Г.В., Вайс В.Р., МакЭлрой П.Д., Марет С.М., Олоо А.Дж., Хоффман С.Л. (1994). «Диагностика малярии с помощью обнаружения антигена HRP-2 Plasmodium falciparum с помощью экспресс-теста с полосками для захвата антигена». Ланцет. 343 (8897): 564–568. Дои:10.1016 / S0140-6736 (94) 91520-2. PMID 7906328. S2CID 25450213.
  11. ^ Rock EP, Marsh K, Saul AJ, Wellems TE, Taylor DW, Maloy WL, Howard RJ (1987). «Сравнительный анализ белков, богатых гистидином Plasmodium falciparum HRP-I, HRP-II и HRP-III у малярийных паразитов различного происхождения». Паразитология. 95 (2): 209–227. Дои:10.1017 / S0031182000057681. PMID 3320887.
  12. ^ Хумар А., Орт С., Харрингтон М.А., Пиллай Д., Кейн К.С. (1997). «Тест Parasight F в сравнении с полимеразной цепной реакцией и микроскопией для диагностики малярии Plasmodium falciparum у путешественников». Am J Trop Med Hyg. 56 (1): 44–48. Дои:10.4269 / ajtmh.1997.56.44. PMID 9063360.
  13. ^ Бейкер Дж., Маккарти Дж., Гаттон М., Кайл Д.Э., Белизарио В., Лучавес Дж., Белл Д., Ченг К. (2005). «Генетическое разнообразие богатого гистидином протеина 2 (PfHRP2) Plasmodium falciparum и его влияние на эффективность диагностических тестов на основе PfHRP2». J Infect Dis. 192 (5): 870–877. Дои:10.1086/432010. PMID 16088837.
  14. ^ Бзик DJ, Фокс Б.А., Гоньер К. (1993). «Экспрессия лактатдегидрогеназы Plasmodium falciparum в Escherichia coli». Мол Биохим Паразитол. 59 (1): 155–166. Дои:10.1016 / 0166-6851 (93) 90016-Q. PMID 8515777.
  15. ^ Vander Jagt DL, Hunsaker LA, Heidrich JE (1981). «Частичная очистка и характеристика лактатдегидрогеназы из Plasmodium falciparum». Молекулярная и биохимическая паразитология. 4 (5–6): 255–264. Дои:10.1016 / 0166-6851 (81) 90058-Х. PMID 7038478.
  16. ^ Penna-Coutinho J, Cortopassi WA, Oliveira AA, França TC, Krettli AU (2011). «Противомалярийная активность потенциальных ингибиторов фермента лактатдегидрогеназы Plasmodium falciparum, отобранных путем стыковочных исследований». PLOS ONE. 6 (7): e21237. Bibcode:2011PLoSO ... 621237P. Дои:10.1371 / journal.pone.0021237. ЧВК 3136448. PMID 21779323.
  17. ^ Икбал Дж., Сиддик А., Джамиль М., Хира PR (2004). «Стойкий гистидин-богатый протеин 2, паразитарная лактатдегидрогеназа и реактивность панмалярийного антигена после устранения моноинфекции Plasmodium falciparum». J Clin Microbiol. 42 (9): 4237–4241. Дои:10.1128 / JCM.42.9.4237-4241.2004. ЧВК 516301. PMID 15365017.
  18. ^ Браун WM, Yowell CA, Hoard A, Vander Jagt TA, Hunsaker LA, Deck LM, Royer RE, Piper RC, Dame JB, Makler MT, Vander Jagt DL (2004). «Сравнительный структурный анализ и кинетические свойства лактатдегидрогеназ четырех видов малярийных паразитов человека». Биохимия. 43 (20): 6219–6229. Дои:10.1021 / bi049892w. PMID 15147206.
  19. ^ Мейер Б, Дёбели Х, Certa U (1992). «Стадия-специфическая экспрессия изоферментов альдолазы в паразите малярии грызунов Plasmodium berghei». Мол Биохим Паразитол. 52 (1): 15–27. Дои:10.1016 / 0166-6851 (92) 90032-Ф. PMID 1625704.
  20. ^ Кнапп Б, Хундт Э, Кюппер HA (1990). «Альдолаза Plasmodium falciparum: структура и локализация гена». Мол Биохим Паразитол. 40 (1): 1–12. Дои:10.1016 / 0166-6851 (90) 90074-В. PMID 2190085.
  21. ^ Ким Х, Черта Ю., Дёбели Х, Якоб П., Хол В. Г. (1998). «Кристаллическая структура фруктозо-1,6-бисфосфатальдолазы от малярийного паразита человека Plasmodium falciparum». Биохимия. 37 (13): 4388–96. Дои:10.1021 / bi972233h. PMID 9521758.
  22. ^ Шривастава И.К., Шмидт М., Черта У., Дёбели Х., Перрин Л.Х. (1990). «Специфичность и ингибирующая активность антител к альдолазе Plasmodium falciparum». J Immunol. 144 (4): 1497–503. PMID 2406342.

внешняя ссылка