WikiDer > Леггемоглобин редуктаза

В энзимология, а леггемоглобин редуктаза (EC 1.6.2.6) является фермент который катализирует в химическая реакция

НАД (P) H + H⁺ + 2 феррилеггемоглобина ${ displaystyle rightleftharpoons}$ НАД (Ф) + + 2 ферролегемоглобин

Другими словами, леггемоглобин (или же фитоглобин в общем) с Fe³⁺ восстанавливается до единицы с ионом двухвалентного железа, Fe²⁺.

Этот фермент принадлежит к семейству оксидоредуктазыособенно те, которые действуют на НАДН или НАДФН с гемовым белком в качестве акцептора. В систематическое название этого класса ферментов НАД (Ф) Н: феррилеггемоглобин оксидоредуктаза. Этот фермент еще называют железо леггемоглобин редуктаза.

Роль в клубеньках бобовых

Леггемоглобин (Lb) - это гем-содержащий белок, который обратимо связывает и транспортирует O₂ в N₂-фиксирование клубеньков бобовых растений.^[1] Чтобы функционировать как O₂-носитель Lb должен быть в степени окисления железа (Lb²⁺). Кислородный фунт²⁺ (Фунт²⁺О₂) легко самоокисляется до трехвалентного железа Lb (Lb³⁺) генерирующий О₂⁻ в присутствии следовых количеств переходные металлы, хелаторы и токсичные метаболиты (такие как нитрит, супероксид радикальный и перекиси),^[2] однако Lb²⁺ является преобладающей формой в узелках.^[3][4] Следовательно, механизмы существуют in vivo для поддержания Lb в функциональных черных положение дел.^[5]

История

Беррис и Хасс^[6] были первыми, кто предположил, что восстановленные пиридиновые нуклеотиды могут функционировать как восстановители Lb³⁺ в клубеньках бобовых корней и в 1969 Appleby^[7] сообщил, что Lb³⁺ был уменьшен до фунта²⁺ суспензией бактероидов. В 1982 г. Кретович с сотрудниками^[8] очистил фермент от люпин конкреции, катализирующие восстановление Lb³⁺ в фунт²⁺ с помощью НАДН как восстановитель. Этот фермент (названный этими авторами как Легоглобин Редуктаза -LR) похож на НАДН:цитохром б₅ редуктаза (EC 1.6.2.2) из эритроцитов и мышц крупного рогатого скота. Люпин LR - это флавопротеин с молекулярной массой 60 кДа и его активность специфична для НАДН. В 1984 году Клакас и сотрудники^[9] очищенный белок с активностью Lb редуктазы железа (FLbR) из соя узелки. Активность FLbR сои составляла 90% в цитозоле клубеньков и 10% в бактероидах. НАДН был лучшим восстановителем для FLbR соевых бобов, хотя НАДФН также функционировал в три раза меньше, чем НАДН. Эти исследования Клукаса и сотрудников^[9] также показали, что окисление НАДН и восстановление Lb³⁺ не было обнаружено, когда O₂ был удален из реакционной системы, но все было восстановлено при повторном добавлении O₂, что свидетельствует о том, что активность FLbR равна O₂-зависимый.

В бобовых

FLbR сои представляет собой флавопротеин с флавинаденин динуклеотид (FAD) как протезная группа и состоит из двух идентичных субъединиц, каждая из которых имеет молекулярную массу 54 кДа. В K_м и K_Кот значения FLbR сои для Lb сои³⁺ уменьшение составляют 9,2 мкМ и 6,2 с⁻¹, соответственно (K_Кот/K_м = 674 млн⁻¹ s⁻¹). Аминокислотная последовательность FLbR сои очень близка к последовательности дисульфида флавин-нуклеотида. оксидоредуктазы, особенно дигидролипоамиддегидрогеназа (DLDH) (EC 1.8.1.4) из пируватдегидрогеназный комплекс. Аминокислотная последовательность FLbR сои содержит 30 остатков сигнальный пептид для транслокации в митохондрии, а также в консервативные области для сайта связывания FAD, сайта связывания NAD (P) H и дисульфидного активного сайта, характерных для горох DLDH и другие ферменты из семейства пиридинуклеотид-дисульфид оксидоредуктаз.^[10]

Геном сои содержит не менее двух копий (названных flbr1 и flbr2) из flbr ген.^[11] Аминокислотная последовательность FLbR2 сои имеет значительную гомологию с FLbR1 сои и DLDH митохондрий листьев гороха и содержит митохондриальную группу из 30 остатков. транзитный пептид.^[12] Последовательности FLbR также были обнаружены и проанализированы в бобовых культурах, кроме сои. Например, нуклеотидная последовательность вигна КДНК FLbR имеет 88 и 85% сходства с FLbR сои и DLDH гороха соответственно. В K_м и K_Кот значения FLbR вигны для Lb³⁺ уменьшение составляют 10,4 мкМ и 3,1 с⁻¹, соответственно (K_Кот/K_м = 298 млн⁻¹ s⁻¹).^[13]

На других заводах

FLbR2 сои снижает рис Фитоглобин1.1 (Phytogb1.1³⁺).^[14] По-видимому, соевый FLbR2-рис Фитоглобин1.1³⁺ взаимодействие слабое. An in silico анализ показал, что соя FLbR2 и рис Phytogb1.1³⁺ взаимодействовать на FAD-привязке домен FLbR2 сои и CD-петли и спирали F риса Phytogb1.1³⁺. Следовательно, FLbR могут быть обобщенным in vivo механизм ферментативного восстановления Phytogbs³⁺.

Рекомендации

• Саари Л.Л., Клукас Р.В. (1984). «Железо леггемоглобинредуктаза из клубеньков корня сои». Arch. Biochem. Биофизы. 231 (1): 102–13. Дои:10.1016/0003-9861(84)90367-9. PMID 6539095.

Смотрите также

• Цитохром b5 редуктаза