WikiDer > Рибофлавинсинтаза

Riboflavin synthase
Рибофлавинсинтаза
Crystal structure.jpg
Кристаллографическая структура Кишечная палочка
рибофлавинсинтаза.[1]
Идентификаторы
Номер ЕС2.5.1.9
Количество CAS9075-82-5
Базы данных
IntEnzПросмотр IntEnz
БРЕНДАBRENDA запись
ExPASyПросмотр NiceZyme
КЕГГЗапись в KEGG
MetaCycметаболический путь
ПРИАМпрофиль
PDB структурыRCSB PDB PDBe PDBsum
Генная онтологияAmiGO / QuickGO
6,7-диметил-8-рибитиллумазинсинтаза
Мономер с лигандами.jpg
Рибофлавинсинтаза из С. Помбе связан с карбоксиэтиллумазином.[2]
Идентификаторы
СимволDMRL_synthase
PfamPF00885
ИнтерПроIPR002180
SCOP21rvv / Объем / СУПФАМ

Рибофлавинсинтаза является фермент который катализирует финальная реакция рибофлавина биосинтез:

(2) 6,7-диметил-8-рибитиллумазин → рибофлавин + 5-амино-6-рибитиламино-2,4 (1ЧАС,3ЧАС) -пиримидиндион

Структура

Мономер рибофлавинсинтазы составляет 23 кДа. Каждый мономер содержит два бета-ствола и один α-спираль на C-конец (остатки 186-206.) Мономер складывается в псевдодвухстороннюю симметрию, что предсказывается сходством последовательностей между N-конец бочки (остатки 4-86) и цилиндр С-конца (остатки 101-184).[1] Фермент разных видов принимает разные четвертичные структуры, от мономера до 60 субъединиц[3]

Активный сайт

Два 6,7-диметил-8-рибитиллумазина (Люмазинсинтаза) молекулы водорода связаны с каждым мономером, как два домены топологически подобны.[4] В активный сайт находится в интерфейсе субстраты между парами мономеров и смоделированными структурами активного центра димер были созданы.[2] Только один из активных сайтов фермент катализируют образование рибофлавина в то время, когда два других сайта обращены наружу и подвергаются воздействию растворитель.[1] В аминокислота остатки, участвующие в водородной связи с лиганд изображены, участвующие остатки могут включать Thr148, Met160, Ile162, Thr165, Val6, Tyr164, Ser146 и Gly96 в C-концевом домене и Ser41, Thr50, Gly 62, Ala64, Ser64, Val103, Cys48, His102 в N- терминальный домен.[5]

  • Водородная связь между субстратом и ферментом на C-терминал домен.[2]

  • Водородная связь между субстратом и ферментом на N-концевой домен.[2]

Механизм

Нет кофакторы необходимы для катализа. Кроме того, образование рибофлавина из 6,7-диметил-8-рибитиллумазина может происходить при кипячении. водный раствор в отсутствие рибофлавинсинтазы.[6]

На границе раздела субстрата между парами мономеров фермент удерживает две молекулы 6,7-диметил-8-рибитиллумазина в положении посредством водородной связи, чтобы катализировать дисмутация реакция.[6] Кроме того, был предложен кислотно-щелочной катализ аминокислотными остатками. Конкретные остатки могут включать диаду His102 / Thr148 в качестве основы для депротонирования C7a. метильная группа. В диаде His102 происходит из N-цилиндра, а Thr148 из C-цилиндра, что подчеркивает важность близости двух субъединиц фермента на ранних стадиях реакции.[7] Также было высказано предположение, что личность нуклеофил представляет собой один из следующих консервативных остатков: Ser146, Ser41, Cys48 или Thr148, или вода в некаталитической реакции.[1] В исследованиях роли Cys48 как возможного нуклеофила не было установлено, нуклеофильное смещение происходит через SN1 или же SN2 реакция.[7]

Механизм 1.jpgМеханизм 2.jpgМеханизм 3.jpgМеханизм 4.jpg

Производство лекарств

Ученые выдвинули гипотезу, что ферменты, участвующие в пути биосинтеза рибофлавина, включая рибофлавинсинтазу, могут быть использованы для разработки антибактериальный лекарства для лечения инфекции вызванный Грамотрицательные бактерии и дрожжи. Эта гипотеза основана на неспособности грамотрицательных бактерий, таких как Кишечная палочка и S. typhimurium для поглощения рибофлавина из внешней среды.[5][8] Поскольку грамотрицательные бактерии должны продуцировать собственный рибофлавин, ингибирование рибофлавинсинтазы или других ферментов, участвующих в этом пути, может быть полезным инструментом при разработке антибактериальных препаратов.

Самая мощная рибофлавинсинтаза ингибитор представляет собой 9-D-рибитил-1,3,7-тригидропурин-2,6,8-трион со значением Ki 0,61 мкМ. Считается, что 9-D-рибитил-1,3,7-тригидропурин-2,6,8-трион действует через конкурентное торможение с 6,7-диметил-8-рибитиллумазином.[8]

Смотрите также

Рекомендации

  1. ^ а б c d PDB: 1i8d​; Liao DI, Wawrzak Z, Calabrese JC, Viitanen PV, Jordan DB (май 2001 г.). «Кристаллическая структура рибофлавинсинтазы». Структура. 9 (5): 399–408. Дои:10.1016 / S0969-2126 (01) 00600-1. PMID 11377200.
  2. ^ а б c d PDB: 1кзл​; Герхардт С., Шотт А.К., Кайриес Н., Кушман М., Илларионов Б., Эйзенрайх В., Бахер А., Хубер Р., Штайнбахер С., Фишер М. (октябрь 2002 г.). «Исследования механизма реакции рибофлавинсинтазы: рентгеновская кристаллическая структура комплекса с 6-карбоксиэтил-7-оксо-8-рибитиллумазином». Структура. 10 (10): 1371–81. Дои:10.1016 / S0969-2126 (02) 00864-X. PMID 12377123.
  3. ^ http://www.ebi.ac.uk/pdbe-srv/PDBeXplore/enzyme/?ec=2.5.1.9&tab=assemblies
  4. ^ Фишер М., Шотт А.К., Кемтер К., Фейхт Р., Рихтер Г., Илларионов Б., Эйзенрайх В., Герхардт С., Кушман М., Штейнбахер С., Хубер Р., Бахер А. (декабрь 2003 г.). «Рибофлавинсинтаза Schizosaccharomyces pombe. Динамика белков, выявленная в экспериментах по пертурбации белков ЯМР 19F». BMC Biochem. 4: 18. Дои:10.1186/1471-2091-4-18. ЧВК 337094. PMID 14690539.
  5. ^ а б Фишер М., Бахер А. (июнь 2008 г.). «Биосинтез витамина В2: структура и механизм рибофлавинсинтазы». Arch. Biochem. Биофизы. 474 (2): 252–65. Дои:10.1016 / j.abb.2008.02.008. PMID 18298940.
  6. ^ а б Бахер А., Эберхард С., Фишер М., Кис К., Рихтер Г. (2000). «Биосинтез витамина В2 (рибофлавин)». Анну. Преподобный Нутр. 20: 153–67. Дои:10.1146 / annurev.nutr.20.1.153. PMID 10940330.
  7. ^ а б Чжэн Ю.Дж., Джордан Д.Б., Ляо Д.И. (август 2003 г.). «Исследование промежуточного продукта реакции в активном центре рибофлавинсинтазы». Биоорг. Chem. 31 (4): 278–87. Дои:10.1016 / S0045-2068 (03) 00029-4. PMID 12877878.
  8. ^ а б Кушман М., Ян Д., Кис К., Бачер А. (декабрь 2001 г.). «Дизайн, синтез и оценка 9-D-рибитил-1,3,7-тригидро-2,6,8-пуринетриона, мощного ингибитора рибофлавинсинтазы и люмазинсинтазы». J. Org. Chem. 66 (25): 8320–7. Дои:10.1021 / jo010706r. PMID 11735509.

внешняя ссылка