WikiDer > Синдром ZTTK - Википедия

ZTTK syndrome - Wikipedia
ZTTK синдром
Другие именаZху-Токита-ТакенушиKим синдром

Синдром ZTTK (синдром Чжу-Токита-Такенучи-Кима) это редкое заболевание, вызываемое у человека генетической мутацией СЫН ген. Общие симптомы включают от средней до тяжелой. Интеллектуальная недееспособность и отставание в развитии.[1][2]

Характерные аномалии включают пороки развития коры головного мозга, проблемы со зрением, скелетно-мышечные аномалии и врожденные дефекты.[1] Не все люди с мутацией в гене SON могут обладать этими характеристиками. Однако варианты с потерей функции SON (LoF), по-видимому, вызывают клинически различимый фенотип.[1]

Признаки и симптомы

Ключевые признаки и симптомы, связанные с синдромом ZTTK, включают глазные, лицевые и системные особенности.[нужна цитата]

Глазные особенности

Отличительными особенностями зрения при синдроме ZTTK являются глубоко посаженные глаза, наклонные глазные щели и горизонтальные брови.[1] Дети с синдромом ZTTK могут иметь проблемы со зрением, включая атрофию зрительного нерва и церебральное нарушение зрения, что приводит к плохим зрительным реакциям.[1] Косоглазие; перекос или перекрещивание глаз при просмотре объекта, прямая гиперметропия; дальнозоркость и нистагм; часто присутствуют глаза, делающие повторяющиеся и неконтролируемые движения.[3]

Черты лица

Люди с синдромом ZTTK имеют характерный дисморфизм лица от незначительного до умеренного. Отличительные черты лица включают асимметрию лица, низко посаженные уши, втягивание средней зоны лица, выпуклость во лбу,[4] вдавленная и / или широкая переносица и гладкий или короткий желобок.[1]

Системные особенности

При синдроме ZTTK часто встречаются мультисистемные аномалии. Большинство людей с диагнозом ZTTK-синдром демонстрируют врожденные пороки развития, такие как урогенитальные и пороки развития, пороки сердца, а также высокое или расщелины неба.[1]

Врожденные дефекты, такие как истончение межпредсердной перегородки, дефекты межжелудочковой перегородки, открытый артериальный протоктакже отмечалась диспластическая почка и агенезия легких и желчного пузыря.[4] опорно-двигательный аппарат аномалия всего тела наблюдались у ZTTK синдром больных, в том числе полупозвонка, сколиоз или же кифоз, контрактуры, слабость суставов,[4] гипермобильность суставов и гипотония.[1] В неонатальном периоде постоянные трудности с кормлением связаны с задержкой роста и низким ростом у большинства людей с синдромом ZTTK.[4]

Центральная нервная система

Задержка развития часто встречается у пациентов с синдромом ZTTK и, по-видимому, прогрессивно увеличивает тяжесть умственной отсталости с возрастом.[1] Показано, что развитие крупной и мелкой моторики, а также навыков беглой и восприимчивой речи задерживается в возрастном возрасте. Также наблюдались макроцефалия и аномалии белого вещества мозга.[5] Судороги часто развиваются в возрасте от 1 до 6 лет.[3]

Физиологический

Мутации гена SON могут влиять на метаболизм и функцию митохондрий у новорожденных с синдромом ZTTK. Метаболический скрининг подтвердил митохондриальную дисфункцию и О-гликозилирование дефекты у лиц с синдромом ZTTK.[1] Снижение уровней иммуноглобулина A и / или иммуноглобулина G, выявленное у пациентов с синдромом ZTTK, привело к нарушениям свертывания крови.[2]

Генетика

Синдром ZTTK вызывается гетерозиготными мутациями в гене SON.[5] Как аутосомно-доминантный болезнь, дети, родители которых являются носителями мутации SON, имеют 50% риск унаследовать мутацию. Тем не менее, у большинства больных есть мутации de novo в гене SON, и синдром ZTTK не передается их детям.[3]

Аллельные варианты SON Gene

Многие люди с синдромом ZTTK определили гетерозиготность для делеции 4-пар оснований de novo[5][6], мутация de novo в экзоне 3 гена SON[1] и de novo вставка 2-базовой точки в экзон,[1] в результате чего гаплонедостаточность или сдвиг рамки считывания и преждевременное завершение в домене аргинин / серин (RS). Клетки периферической крови отобранных пациентов подтвердили снижение уровней транскрипта мутантной РНК, что соответствует гаплонедостаточности.[1] Другие наблюдаемые мутации включают бессмысленную мутацию, делецию аминокислот в рамке считывания и делецию целого гена.[1] Гетерозиготная дупликация de novo на 1 базовую точку в экзоне 3 и делеция на 1 базовую точку в экзоне 4 гена SON приводила к сдвигу рамки считывания и преждевременной терминации.[4] Родительская ДНК подтвердила, что мутации de novo часто встречаются у пациентов с синдромом ZTTK.[1] Мутации de novo LoF и гаплонедостаточность гена SON вызывают серьезные пороки развития во время эмбриональное развитие как видно из фенотипических проявлений синдрома ZTTK.[4]

Структура гена SON

SON - это большой белок, состоящий из 2426 аминокислот и повторяющихся последовательностей.[7] SON расположен в хромосомной области 21q22.11 человека в ядерных спеклах и состоит из 12 экзонов.[8] Экзон 3 гена SON особенно велик, составляя 82% всей кодирующей области.[1] Большинство вариантов SON, обнаруженных у людей с синдромом ZTTK, локализованы в экзоне 3.[4]

Механизм

Роль гена, ассоциированного со сплайсосомами, SON в регулировании сплайсинга РНК посредством удержания интронов и пропуска экзонов для поддержания плюрипотентности эмбриональных стволовых клеток человека (hESC) и развития клеточного цикла.

Роль SON в сплайсинге РНК

В СЫН ген кодирует белок SON, который способен связываться с ДНК и РНК.[9] Белок SON в основном локализован в ядерных спеклах и участвует во множестве клеточных процессов, таких как транскрипция, регуляция клеточного цикла и субъядерная организация сплайсинга пре-мессенджера РНК (мРНК).[9][10]

SON содержит различные домены, такие как RS-богатый домен, домен G-patch и двухцепочечный РНК-связывающий мотив.[7][11] Наличие этих доменов необходимо для SON, чтобы опосредовать конститутивный и альтернативный сплайсинг.[1] RS-богатый домен служит для локализации SON в ядерных спеклах с факторами процессинга пре-мРНК.[9] Функциональные домены и специфическая локализация SON в ядерных спеклах указывают на его роль в сплайсинге пре-мРНК.[9]

Сын также играет ключевую роль в альтернативное сращивание экзонов. SON необходим для стабильности генома за счет обеспечения эффективности сплайсинга РНК слабых конститутивных и альтернативных сайтов сплайсинга. Зависимые от SON гены клеточного цикла обладают слабым 5 ’или 3’ сайтом сплайсинга и зависят от SON для обеспечения эффективного сплайсинга и распознавания сплайсосом.[7]

Роль SON в эмбриональном развитии

Ген SON также играет важную роль во время развития. SON экспрессируется преимущественно в недифференцированных стволовых клетках.[9] Истощение SON приводит к дифференцировке стволовых клеток.[9]

Эмбриональные стволовые клетки человека (чЭСК) способны претерпевать специфическую дифференцировку в определенные типы клеток, известные как плюрипотентность.[12] Плюрипотентные стволовые клетки, такие как чЭСК, могут подвергаться гаструляция чтобы дать начало трем зародышевым листкам.[9]

Значительный уровень экспрессии SON в тканях плода предполагает регулирующую роль SON в клеточной пролиферации и / или дифференцировке во время эмбрионального развития, влияя на сплайсинг генов поддержания плюрипотентности.[13] Выражение факторы транскрипции такие как фактор SON и эпигенетические модификаторы регулируют плюрипотентность hESC, гарантируя, что гены подвергаются сплайсингу РНК для создания зрелого транскрипта РНК.[14]

Ген SON необходим для РНК-сплайсинга транскриптов, кодирующих белок клеточного цикла TUBG1 и генов, поддерживающих плюрипотентность hESC; PRDM14, OCTA, E4F1 и MED24 в hESC.[12] Поскольку OCT4 участвует в основных схемах транскрипции в hESCs, неправильная регуляция OCT4 вызывает дифференцировку клеток. PRDM14 - регулятор плюрипотентности, а MED24 - комплекс посредников, необходимый для поддержания плюрипотентности.[12] В ESC дикого типа связывание SON с РНК-транскриптами генов, регулирующих плюрипотентность, таких как PRDM14 и OCT4, приводит к правильному сплайсингу и поддержанию плюрипотентности.[14]

Влияние гаплонедостаточности SON на сплайсинг РНК и эмбриональное развитие

Подавление SON может влиять на регуляцию транскриптов митотических регуляторов и вызывать дефекты выживания клеток и процесса развития.[9] Истощение SON вызывает снижение роста клеток,[7][15][16] нарушение процессов микротрубочек и беспорядочное разделение полюсов веретена, вызывающее остановку митоза в метафаза и серьезное нарушение целостности генома.[7][15][16] Митотические клетки без функционального SON имеют повышенные разрывы двухцепочечной ДНК и образование микроядер.[15] Следовательно, стабильность генома и регуляция клеточного цикла нарушены, что способствует развитию полиорганных дефектов у пациентов с синдромом ZTTK.[7]

Аберрантный сплайсинг и гетерозиготные мутации de novo LoF в гене SON нарушают процесс экспрессии гена и могут привести к гаплонедостаточности SON.[17][5] Люди с синдромом ZTTK с гаплонедостаточностью SON демонстрируют сниженную экспрессию мРНК и аномальные продукты сплайсинга РНК многочисленных генов, которые необходимы для миграции нейрональных клеток, метаболических процессов и развития нервной системы мозга.[5]

Анализ РНК от пораженных людей с синдромом ZTTK подтвердил подавление генов, необходимых для миграции нейронов и организации коры головного мозга (TUBG1, FLNA, ПНКП, WDR62, PSMD3, HDAC6) и метаболизм (PCK2, ПФКЛ, IDH2, ACY1, и ADA).[1] Аберрантный SON-опосредованный сплайсинг РНК возникает в результате накопления неправильно сплайсированных транскриптов.[1] Неправильно сплайсированные продукты РНК вызваны значительным удержанием интронов (TUBG1, FLNA, PNKP, WDR62, PSMD3, PCK2, PFKL, IDH2 и ACY1) и пропуском экзонов (HDAC6 и ADA).[1] Напротив, у родителей людей с синдромом ZTTK обнаруживается отсутствие неправильно сплайсированных продуктов РНК.[1]

Истощение SON подавляет и вызывает аберрантное сращивание факторов плюрипотентности, 4 октября, PRDM14, MED24 и E4F1, вызывая спонтанную дифференцировку чЭСК с последующей массовой гибелью клеток.[12][14] Поскольку СЫН действует как сплайсинг интронов активатор, истощение SON приводит к увеличению удержания интронов и пропуск экзона в hESCs в регуляторных генах клеточного цикла и идентичности hESC.[18] Мутации в гене SON и / или гаплонедостаточность SON нарушают опосредованное SON сплайсинг РНК и вносят вклад в сложные дефекты развития, наблюдаемые у людей с синдромом ZTTK.[1] Ошибочная функция SON вызывает недостаточную продукцию нижестоящих мишеней, нестабильность генома и нарушение клеточного цикла, которые являются фундаментальными для дефектов развития и аномалий органов у людей с синдромом ZTTK. Например, гаплонедостаточность FLNA, наблюдаемая у людей с синдромом ZTTK, является основной причиной редкого заболевания головного мозга, перивентрикулярная узловая гетеротопия. Мутации De novo LoF в TUBG1 могут приводить к микроцефалия и корковые пороки развития из-за нарушения сплайсинга РНК, опосредованного SON, у лиц с синдромом ZTTK.[19]

Последствия гаплонедостаточности SON на эмбриональное развитие также изучались на животных моделях рыбок данио (Данио рерио). Наблюдался ряд пороков развития, включая изогнутые, укороченные или узловатые хвосты, массивные искривления тела с деформированными осями тела, пороки развития глаз и микроцефалию.[1] Эмбрионы, которые выжили в течение более длительного периода времени, имеют более тяжелые фенотипы, такие как пороки развития позвоночника с отеком мозга, имитирующие особенности, наблюдаемые у лиц с синдромом ZTTK.[1]

Диагностика

Визуализация мозга

Ранний диагноз синдрома ZTTK может быть определен с помощью изображений головного мозга. Магнитно-резонансная томография (МРТ) головного мозга пациентов с синдромом ZTTK выявила значительные отклонения.[1]

Были замечены аномальные паттерны вращения, в том числе полимикрогирия; множество необычно мелких складок в мозгу, упрощенные извилины; уменьшение количества и неглубокие извилины и перивентрикулярная узловая гетеротопия; неспособность нейронов правильно мигрировать во время раннего развития мозга плода.[3][20]

Вентрикуломегалия также можно наблюдать на МРТ, где боковые желудочки становятся расширенными у плода и могут способствовать задержке развития у человека с синдромом ZTTK.[3] Еще одна общая черта, наблюдаемая у пациентов с синдромом ZTTK: Пороки развития Арнольда-Киари которые представляют собой структурные дефекты мозжечка, которые проявляются во время развития плода и могут привести к проблемам со зрением, сколиозу или кифозу у пациентов с синдромом ZTTK.[21]

Другие патологические признаки, наблюдаемые на МРТ у людей с синдромом ZTTK, включают: арахноидальные кисты, гипоплазия мозолистого тела полушария мозжечка и потеря перивентрикулярного белого вещества.[1]

Большинство людей с синдромом ZTTK выявляются в раннем детстве из-за задержки в развитии и умственной отсталости.[22] Однако формальный диагноз умственной отсталости может быть поставлен только при выполнении теста IQ ниже 70.[21]

Секвенирование всего экзома

Секвенирование всего экзома (WES) может использоваться в качестве непредвзятого инструмента при диагностической оценке лиц с подозрением на генетические нарушения, такие как синдром ZTTK.[1] С помощью WES были идентифицированы люди с усеченными вариантами SON и перекрывающимися клиническими признаками.[нужна цитата]

Синдром ZTTK был идентифицирован как расстройство нервного развития, связанное с мутацией de novo в гене SON с использованием WES. Известно, что ген SON является основной причиной тяжелой умственной отсталости и, как следствие, нарушений развития.[22] Первый вариант усечения de novo в SON был обнаружен в группе лиц с тяжелыми интеллектуальными нарушениями.[5] Секвенирование по Сэнгеру или использование WES исходных образцов подтвердили статус de novo усекающих и миссенс мутаций гена SON у отобранных индивидуумов с синдромом ZTTK.[1] Идентифицированные варианты включали вариант преждевременной остановки в экзоне 3, варианты со сдвигом рамки считывания в экзоне 3 и вариант со сдвигом рамки считывания в экзоне 4.[1]

Уход

В настоящее время не существует лечения синдрома ZTTK. Тем не менее, физиотерапия и решение конкретных проблем полиорганных заболеваний могут быть полезны.[3] Основное внимание следует уделять диагностике и лечению лиц с синдромом ZTTK.[нужна цитата]

Рекомендации

  1. ^ а б c d е ж грамм час я j k л м п о п q р s т ты v ш Икс у z аа ab ac Ким, Чон-Хён; Шинде, Дипали Н; Рейндерс, Марго Р.Ф .; Хаузер, Натали С; Бельмонте, Ребекка Л.; Уилсон, Грегори Р.; Bosch, Daniëlle G.M; Бубуля, Паула А; Шаши, Вандана; Петровский, Славе; Стоун, Джошуа К.; Пак, Ын Ён; Велтман, Йорис А; Sinnema, Margje; Штумпель, Конни Т.Р.М.; Draaisma, Jos M; Николай, Йост; Yntema, Helger G; Линдстрем, Кристин; Де Врис, Берт Б.А.; Джеветт, Тамисон; Санторо, Стефани Л.; Фогт, Джули; Бахман, Кристина К; Сили, Андреа Х; Крокоски, Элисон; Тернер, Клессон; Рохена, Луис; Хемпель, Майя; Кортум, Фанни; и другие. (2016). «Мутации De Novo в SON нарушают сплайсинг РНК генов, необходимых для развития мозга и метаболизма, вызывая синдром умственной отсталости». Американский журнал генетики человека. 99 (3): 711–719. Дои:10.1016 / j.ajhg.2016.06.029. ЧВК 5011044. PMID 27545680.
  2. ^ а б «Запись OMIM № 617140 - СИНДРОМ ЗТТК; ЗТТКС». Онлайн-менделевское наследование в человеке. Университет Джона Хопкинса. Получено 27 октября 2017.
  3. ^ а б c d е ж «Синдром ЗТТК».
  4. ^ а б c d е ж грамм Tokita, Mari J .; Braxton, Alicia A .; Шао, Юнру; Льюис, Андреа М .; Винсент, Мари; Кюри, Себастьен; Беснард, Томас; Исидор, Бертран; Латыпова, Ксения (сентябрь 2016 г.). «Варианты усечения De Novo в SON вызывают умственную отсталость, врожденные пороки развития и неспособность к развитию». Американский журнал генетики человека. 99 (3): 720–727. Дои:10.1016 / j.ajhg.2016.06.035. ISSN 0002-9297. ЧВК 5011061. PMID 27545676.
  5. ^ а б c d е ж Чжу, Сяолинь; Петровский, Славе; Се, Пинсин; Руццо, Элизабет К .; Лу, И-Фань; Максуини, К. Мелоди; Бен-Зеев, Брурия; Ниссенкорн, Андреа; Аникстер, Яир (15.01.2015). «Секвенирование всего экзома при недиагностированных генетических заболеваниях: интерпретация 119 трио». Генетика в медицине. 17 (10): 774–781. Дои:10.1038 / гим.2014.191. ISSN 1098-3600. ЧВК 4791490. PMID 25590979.
  6. ^ Такенучи, Тошики; Миура, Киёкуни; Уэхара, Томоко; Мизуно, Сейджи; Косаки, Кэндзиро (2016-06-03). «Установление SONin 21q22.11 как причины новой синдромальной формы умственной отсталости: возможный вклад в фенотип синдрома Брэддока-Кэри». Американский журнал медицинской генетики, часть A. 170 (10): 2587–2590. Дои:10.1002 / ajmg.a.37761. ISSN 1552-4825. PMID 27256762.
  7. ^ а б c d е ж Ан, Ын-Янг; DeKelver, Russell C .; Ло, Мяо-Чиа; Нгуен, Тайет Энн; Мацуура, Синобу; Бояпати, Анита; Пандит, Шатакши; Фу, Сян-Донг; Чжан, Донг-Эр (апрель 2011 г.). «SON контролирует развитие клеточного цикла с помощью скоординированной регуляции сплайсинга РНК». Молекулярная клетка. 42 (2): 185–198. Дои:10.1016 / j.molcel.2011.03.014. ISSN 1097-2765. ЧВК 3137374. PMID 21504830.
  8. ^ Хан, И. М .; Фишер, Р. А .; Джонсон, К. Дж .; Bailey, M. E. S .; Siciliano, M. J .; Кесслинг, А. М .; Фаррер, М .; Carritt, B .; Камалати, Т. (январь 1994 г.). «Ген SON кодирует консервативное отображение ДНК-связывающего белка на хромосоме 21 человека». Анналы генетики человека. 58 (1): 25–34. Дои:10.1111 / j.1469-1809.1994.tb00723.x. ISSN 0003-4800. PMID 8031013. S2CID 31519119.
  9. ^ а б c d е ж грамм час Лу, Синьи; Нг, Хак-Хуэй; Бубуля, Паула А. (30.04.2014). «Роль SON в сращивании, развитии и болезни». Междисциплинарные обзоры Wiley: РНК. 5 (5): 637–646. Дои:10.1002 / wrna.1235. ISSN 1757-7004. ЧВК 4138235. PMID 24789761.
  10. ^ Spector, D. L .; Ламонд, А. И. (2010-10-06). «Ядерные крапинки». Перспективы Колд-Спринг-Харбор в биологии. 3 (2): a000646. Дои:10.1101 / cshperspect.a000646. ISSN 1943-0264. ЧВК 3039535. PMID 20926517.
  11. ^ Хики, Кристофер Дж .; Ким, Чон-Хен; Ан, Ын-Ён Эрин (13 декабря 2013). «Новые открытия старого сына: связь между сплайсингом РНК и раком». Журнал клеточной биохимии. 115 (2): 224–231. Дои:10.1002 / jcb.24672. ISSN 0730-2312. PMID 24030980. S2CID 23130360.
  12. ^ а б c d Лу, Синьи; Гёке, Джонатан; Закс, Фридрих; Жак, Пьер-Этьен; Лян, Хунцин; Фэн, Бо; Бурк, Гийом; Бубуля, Паула А .; Нг, Хак-Хуэй (08.09.2013). «SON связывает регуляторную сеть сплайсинга с плюрипотентностью в человеческих эмбриональных стволовых клетках». Природа клеточной биологии. 15 (10): 1141–1152. Дои:10.1038 / ncb2839. ISSN 1465-7392. ЧВК 4097007. PMID 24013217.
  13. ^ Ченг, Сюзанна; Лутфалла, Жорж; Узе, Жиль; Чумаков, Илья М .; Гардинер, Кателин (1993). «Кластер генов GART, SON, IFNAR и CRF2-4 на хромосоме 21 человека и хромосоме 16 мыши». Геном млекопитающих. 4 (6): 338–342. Дои:10.1007 / bf00357094. ISSN 0938-8990. PMID 8318737. S2CID 19770065.
  14. ^ а б c Ливятан, Илана; Мешорер, Эран (октябрь 2013 г.). «SON проливает свет на сплайсинг и плюрипотентность РНК». Природа клеточной биологии. 15 (10): 1139–1140. Дои:10.1038 / ncb2851. ISSN 1465-7392. PMID 24084863. S2CID 12137904.
  15. ^ а б c Huen, Michael S.Y .; Sy, Shirley M.H .; Люнг, Ка Ман; Чинг, Ик-Пан; Типо, Джордж Л .; Парень, Корнелия; Дун, Шуо; Чен, Цзюньцзе (июль 2010 г.). «SON - это фактор, связанный со сплайсосомами, необходимый для митотической прогрессии». Клеточный цикл. 9 (13): 2679–2685. Дои:10.4161 / cc.9.13.12151. ISSN 1538-4101. ЧВК 3040851. PMID 20581448.
  16. ^ а б Шарма, Алок; Таката, Хидеаки; Шибахара, Кей-ичи; Бубуля, Афанасий; Бубуля, Паула А. (15.02.2010). «Сын необходим для организации ядерных спеклов и развития клеточного цикла». Молекулярная биология клетки. 21 (4): 650–663. Дои:10.1091 / mbc.e09-02-0126. ISSN 1059-1524. ЧВК 2820428. PMID 20053686.
  17. ^ Купер, Томас А .; Ван, Лили; Дрейфус, Гидеон (февраль 2009 г.). «РНК и болезнь». Клетка. 136 (4): 777–793. Дои:10.1016 / j.cell.2009.02.011. ISSN 0092-8674. ЧВК 2866189. PMID 19239895.
  18. ^ Хуан-Матеу, Йонас; Виллате, Олатц; Эйзирик, Десио Л. (май 2016 г.). «МЕХАНИЗМЫ В ЭНДОКРИНОЛОГИИ: Альтернативный сплайсинг: новый рубеж в исследованиях диабета». Европейский журнал эндокринологии. 174 (5): R225 – R238. Дои:10.1530 / eje-15-0916. ISSN 0804-4643. ЧВК 5331159. PMID 26628584.
  19. ^ Пуарье, Карин; Лебрен, Николя; Бруа, Лоик; Тиан, Гуолин; Сайлор, Йоанн; Бошерон, Сесиль; Паррини, Елена; Валенсия, Стефани; Пьер, Бенджамин Сен (2013-04-21). «Мутации в TUBG1, DYNC1H1, KIF5C и KIF2A вызывают пороки развития коры и микроцефалию». Природа Генетика. 45 (6): 639–647. Дои:10.1038 / ng.2613. ISSN 1061-4036. ЧВК 3826256. PMID 23603762.
  20. ^ «Перивентрикулярная гетеротопия | Информационный центр по генетическим и редким заболеваниям (GARD) - программа NCATS». rarediseases.info.nih.gov. Получено 2019-04-28.
  21. ^ а б «Мальформация Арнольда Киари: симптомы, типы и лечение». WebMD. Получено 2019-04-28.
  22. ^ а б Vissers, Lisenka E. L. M .; Гилиссен, Кристиан; Велтман, Йорис А. (27.10.2015). «Генетические исследования умственной отсталости и связанных с ней расстройств». Природа Обзоры Генетика. 17 (1): 9–18. Дои:10.1038 / nrg3999. ISSN 1471-0056. PMID 26503795. S2CID 16723395.