WikiDer > Альтернативная сварка

Alternative splicing
Альтернативный сплайсинг дает три белка изоформы.

Альтернативная сварка, или же альтернативный сплайсинг РНК, или же дифференциальная сварка, это регламентированный процесс во время экспрессия гена что приводит к единственному ген кодирование для нескольких белки. В этом процессе особенно экзоны гена может быть включен или исключен из окончательной обработанной информационная РНК (мРНК), полученная из этого гена.[1] Следовательно, белки переведено из альтернативы сплайсированные мРНК будут содержать различия в их аминокислотной последовательности и, часто, в их биологических функциях (см. рисунок). Примечательно, что альтернативная сварка позволяет человеческий геном направить синтез намного большего количества белков, чем можно было бы ожидать от его 20 000 генов, кодирующих белок.

Альтернативное сращивание - нормальное явление в эукариоты, где это значительно увеличивает биоразнообразие белков, которые могут кодироваться геномом;[1] у человека ~ 95% мультиэкзонных генов подвергаются альтернативному сплайсингу.[2] Наблюдаются многочисленные способы альтернативного сращивания, наиболее распространенным из которых является пропуск экзона. В этом режиме конкретный экзон может быть включен в мРНК в одних условиях или в определенных тканях и исключен из мРНК в других.[1]

Производство альтернативно сплайсированных мРНК регулируется системой трансакционный белки, которые связываются с цис-действующий сайты на первичная стенограмма сам. Такие белки включают активаторы сплайсинга, которые способствуют использованию определенного сайта сплайсинга, и репрессоры сплайсинга, которые сокращают использование определенного сайта. Механизмы альтернативного сращивания очень разнообразны, и постоянно находят новые примеры, особенно за счет использования высокопроизводительных методов. Исследователи надеются полностью выяснить регуляторные системы, участвующие в сплайсинге, чтобы альтернативные продукты сплайсинга из данного гена в определенных условиях («варианты сплайсинга») можно было предсказать с помощью «кода сплайсинга».[3][4]

Аномальные вариации сварки также причастен к болезни; большая часть людей генетические нарушения результат вариантов сращивания.[3] Также считается, что аномальные варианты сплайсинга способствуют развитию рака.[5][6][7][8] и гены факторов сплайсинга часто мутируют при различных типах рака.[8]

Открытие

Впервые альтернативное сращивание было обнаружено в 1977 году.[9][10] В Аденовирус производит пять первичных транскриптов в начале своего инфекционного цикла, до репликации вирусной ДНК, и еще один позже, после начала репликации ДНК. Первые первичные транскрипты продолжают продуцироваться после начала репликации ДНК. Дополнительный первичный транскрипт, продуцируемый на поздних этапах заражения, является большим и происходит из 5/6 генома аденовируса размером 32 КБ. Это намного больше, чем у любого человека аденовирус мРНК присутствуют в инфицированных клетках. Исследователи обнаружили, что первичный транскрипт РНК, продуцируемый аденовирусом типа 2 на поздней стадии, был сплайсирован множеством различных способов, в результате чего были получены мРНК, кодирующие различные вирусные белки. Кроме того, первичная стенограмма содержала несколько полиаденилирование сайты, дающие разные 3’-концы для процессированных мРНК.[11][12][13]

В 1981 году первый пример альтернативной сварки в стенограмма из нормального, эндогенный ген был охарактеризован.[11] Ген, кодирующий щитовидная железа гормон кальцитонин было обнаружено, что они альтернативно сплайсированы в клетках млекопитающих. Первичный транскрипт этого гена содержит 6 экзонов; то кальцитонин мРНК содержит экзоны 1–4 и оканчивается после полиаденилирование сайт в экзоне 4. Другая мРНК продуцируется из этой пре-мРНК путем пропуска экзона 4 и включает экзоны 1–3, 5 и 6. Она кодирует белок, известный как CGRP (пептид, родственный гену кальцитонина).[14][15] Примеры альтернативного сплайсинга транскриптов генов иммуноглобина у млекопитающих также наблюдались в начале 1980-х годов.[11][16]

С тех пор было обнаружено, что альтернативный сплайсинг у эукариот встречается повсеместно.[1] «Рекордсменом» по альтернативной сварке является D. melanogaster ген называется Dscam, который потенциально может иметь 38 016 вариантов сварки.[17]

Режимы

Традиционная классификация основных типов альтернативных событий сплайсинга РНК. Экзоны представлены синими и желтыми блоками, интроны - линиями между ними.
Относительные частоты типов альтернативных событий сплайсинга у людей и плодовых мух различаются.[18]

Общепризнанно пять основных режимов альтернативного сращивания.[1][2][3][18]

  • Пропуск экзона или же кассетный экзон: в этом случае экзон может быть сращен из первичного стенограмма или сохранен. Это наиболее распространенный способ у млекопитающих. пре-мРНК.[18]
  • Взаимоисключающие экзоны: Один из двух экзонов остается в мРНК после сплайсинга, но не оба.
  • Альтернативный донорский сайт: Используется альтернативный 5 'сплайсинговый переход (донорный сайт), изменяющий 3' границу вверх по течению экзон.
  • Альтернативный акцепторный сайт: Используется альтернативный 3'-сплайсинговый переход (акцепторный сайт), изменяющий 5'-границу расположенного ниже экзона.
  • Удержание интрона: Последовательность может быть разделена на интрон или просто сохранена. Это отличается от пропуска экзона, потому что сохраненная последовательность не фланкируется интроны. Если сохраненный интрон находится в кодирующей области, интрон должен кодировать аминокислоты в рамке с соседними экзонами, или стоп-кодон, или сдвиг в рамка чтения приведет к тому, что белок станет нефункциональным. Это самый редкий вид у млекопитающих.[18]

В дополнение к этим основным способам альтернативного сплайсинга существуют два других основных механизма, с помощью которых разные мРНК могут генерироваться из одного и того же гена; несколько промоутеры и несколько полиаденилирование места. Использование нескольких промоторов правильно описывается как транскрипционная регуляция механизм, а не альтернативное сращивание; Начав транскрипцию в разных точках, можно получить транскрипты с разными 5'-экзонами. С другой стороны, несколько сайтов полиаденилирования обеспечивают разные 3'-конечные точки для транскрипта. Оба этих механизма обнаруживаются в сочетании с альтернативным сплайсингом и обеспечивают дополнительное разнообразие мРНК, полученных из гена.[1][3]

Схематическое отключение от 3 структур сплайсинга у мыши гиалуронидаза ген. Направленность транскрипции от 5 'до 3' показана слева направо. Экзоны и интроны не масштабированы.


Эти режимы описывают основные механизмы сращивания, но могут быть неадекватными для описания сложных событий сращивания. Например, на рисунке справа показаны 3 формы сварки с помощью мыши. гиалуронидаза 3 ген. Сравнение экзонной структуры, показанной в первой строке (зеленая), со структурой во второй строке (желтая) показывает удерживание интронов, тогда как сравнение между второй и третьей формой сплайсинга (желтый против синего) показывает пропуск экзона. Недавно была предложена модельная номенклатура для однозначного обозначения всех возможных схем сращивания.[18]

Механизмы

Общий механизм сращивания

Основная статья: Сплайсинг РНК
Сплайсосомный комплекс A определяет 5 'и 3' концы интрона перед удалением[3]

Когда пре-мРНК была транскрибирована с ДНК, он включает несколько интроны и экзоны. (В нематоды, в среднем 4–5 экзонов и интронов; в плодовой мушке Дрозофила в одной транскрибируемой пре-мРНК может быть более 100 интронов и экзонов.) Экзоны должны сохраняться в мРНК определяются в процессе сварки. Регулирование и выбор сайтов сплайсинга осуществляются транс-действующим активатором сплайсинга и белками-репрессорами сплайсинга, а также цис-действующими элементами внутри самой пре-мРНК, такими как энхансеры экзонного сплайсинга и сайленсеры экзонного сплайсинга.

Типичный ядерный интрон эукариот имеет согласованные последовательности, определяющие важные области. Каждый интрон имеет последовательность GU на 5'-конце. Рядом с 3-м концом есть филиал. Нуклеотид в точке ветвления всегда представляет собой A; консенсус относительно этой последовательности несколько различается. У человека консенсусной последовательностью сайта ветвления является yUnAy.[19] За сайтом филиала следует серия пиримидины - в полипиримидиновый тракт - затем AG в конце 3 '.[3]

Сплайсинг мРНК осуществляется комплексом РНК и белка, известным как сплайсосома, содержащий snRNPs обозначенный U1, U2, U4, U5 и U6 (U3 не участвует в сплайсинге мРНК).[20] U1 связывается с 5 'GU и U2 с помощью U2AF белковые факторы связываются с точкой разветвления A внутри сайта разветвления. Комплекс на этой стадии известен как комплекс сплайсосомы А. Формирование комплекса A обычно является ключевым этапом в определении концов интрона, подлежащего сплайсингу, и определении концов экзона, которые необходимо сохранить.[3] (Номенклатура U основана на высоком содержании уридина).

Связывается комплекс U4, U5, U6, а U6 замещает позицию U1. U1 и U4 уходят. Оставшийся комплекс затем выполняет два переэтерификация реакции. При первой переэтерификации 5'-конец интрона отщепляется от вышележащего экзона и присоединяется к сайту разветвления A 2 ', 5'-фосфодиэфир связь. При второй переэтерификации 3'-конец интрона отщепляется от расположенного ниже экзона, и два экзона соединяются фосфодиэфирной связью. Затем интрон высвобождается в форме лариата и разрушается.[1]

Регуляторные элементы и белки

Сращивание репрессий

Сварка регулируется трансакционный белки (репрессоры и активаторы) и соответствующие цис-действующий регуляторные сайты (сайленсеры и энхансеры) на пре-мРНК. Однако, как часть сложности альтернативного сращивания, следует отметить, что эффекты фактора сращивания часто зависят от положения. То есть фактор сплайсинга, который служит активатором сплайсинга, когда он связан с интронным энхансерным элементом, может служить репрессором, когда он связан с его элементом сплайсинга в контексте экзона, и наоборот.[21] Вторичная структура транскрипта пре-мРНК также играет роль в регуляции сплайсинга, например, путем объединения элементов сплайсинга или путем маскировки последовательности, которая в противном случае служила бы элементом связывания для фактора сплайсинга.[22][23] Вместе эти элементы образуют «код сращивания», который определяет, как сращивание будет происходить в различных клеточных условиях.[24][25]

Есть два основных типа цис-действующий Элементы последовательности РНК присутствуют в пре-мРНК и имеют соответствующие трансакционный РНК-связывающие белки. Сращивание глушители представляют собой сайты, с которыми связываются белки-репрессоры сплайсинга, что снижает вероятность того, что соседний сайт будет использоваться в качестве соединения сплайсинга. Они могут быть расположены в самом интроне (сайленсеры интронного сплайсинга, ISS) или в соседнем экзоне (глушители для экзонной сварки, ESS). Они различаются по последовательности, а также по типам белков, которые с ними связываются. Большинство репрессоров сплайсинга гетерогенные ядерные рибонуклеопротеиды (hnRNP), такие как hnRNPA1 и белок, связывающий полипиримидиновый тракт (PTB).[3][24] Сращивание усилители являются сайтами, с которыми связываются белки-активаторы сплайсинга, увеличивая вероятность того, что соседний сайт будет использоваться в качестве соединения сплайсинга. Они также могут возникать в интроне (интронные усилители сплайсинга, ISE) или экзоне (энхансеры экзонного сплайсинга, ESE). Большинство белков-активаторов, которые связываются с ISE и ESE, являются членами Протеин SR семья. Такие белки содержат мотивы распознавания РНК и домены, богатые аргинином и серином (RS).[3][24]

Активация сварки

В общем, детерминанты сращивания работают взаимозависимым образом, который зависит от контекста, так что правила, управляющие тем, как сращивание, регулируются из кода сращивания.[25] Наличие особого цис-действующий Элемент последовательности РНК может увеличить вероятность того, что соседний сайт будет сплайсирован в некоторых случаях, но уменьшить вероятность в других случаях, в зависимости от контекста. Контекст, в котором действуют регулирующие элементы, включает: цис-действующий контекст, который устанавливается наличием других особенностей последовательности РНК, и трансакционный контекст, который устанавливается клеточными условиями. Например, некоторые цис-действующий Элементы последовательности РНК влияют на сплайсинг, только если несколько элементов присутствуют в одной и той же области, чтобы установить контекст. Другой пример: цис-действующий Элемент может иметь противоположные эффекты на сплайсинг, в зависимости от того, какие белки экспрессируются в клетке (например, нейрональный PTB по сравнению с ненейрональным). Адаптивное значение сайленсеров и энхансеров при сплайсинге подтверждается исследованиями, показывающими, что в генах человека существует сильный отбор против мутаций, которые производят новые сайленсеры или разрушают существующие энхансеры.[26][27]

Метилирование ДНК и альтернативный сплайсинг у социальных насекомых

Метилирование ДНК CpG показало свою роль в регулировании альтернативного сплайсинга у социальных насекомых.[28][29] У медоносных пчел (Apis mellifera), Метилирование ДНК CpG, по-видимому, регулирует пропуск экзонов, на основании первых нескольких геномных исследований.[30][31] после того, как был доступен геном медоносной пчелы.[32] Метилирование ДНК CpG более широко регулирует альтернативный сплайсинг, не только влияет на пропуск экзонов, но также на удержание интронов и другие события сплайсинга.[33]

Примеры

Пропуск экзонов: Дрозофила dsx

Альтернативное сращивание dsx пре-мРНК

Пре-мРНК из D. melanogaster ген dsx содержат 6 экзонов. У мужчин экзоны 1, 2, 3, 5 и 6 соединены с образованием мРНК, которая кодирует белок, регулирующий транскрипцию, необходимый для развития мужчин. У самок экзоны 1,2,3 и 4 соединены, и полиаденилирование сигнал в экзоне 4 вызывает расщепление мРНК в этой точке. Полученная мРНК представляет собой белок, регулирующий транскрипцию, необходимый для развития самок.[34]

Это пример пропуска экзона. Интрон, расположенный выше экзона 4, имеет полипиримидиновый тракт это не соответствует консенсусная последовательность хорошо, так что белки U2AF плохо связываются с ним без помощи активаторов сплайсинга. Таким образом, этот 3'-акцепторный сайт сплайсинга не используется у мужчин. Самки же производят активатор сращивания Transformer (Tra) (см. Ниже). SR-белок Tra2 продуцируется у обоих полов и связывается с ESE в экзоне 4; если Tra присутствует, он связывается с Tra2 и вместе с другим белком SR образует комплекс, который помогает белкам U2AF связываться со слабым полипиримидиновым трактом. U2 рекрутируется в ассоциированную точку ветвления, и это приводит к включению экзона 4 в мРНК.[34][35]

Альтернативные акцепторные сайты: Дрозофила Трансформатор

Альтернативное сращивание Дрозофила Трансформатор генный продукт.

Пре-мРНК Трансформатор (Tra) ген Drosophila melanogaster пройти альтернативный сплайсинг в режиме альтернативного акцепторного сайта. Ген Tra кодирует белок, который экспрессируется только у женщин. Первичный транскрипт этого гена содержит интрон с двумя возможными акцепторными сайтами. У самцов используется восходящий акцепторный сайт. Это приводит к включению более длинной версии экзона 2 в обработанный транскрипт, включая ранний стоп-кодон. Полученная мРНК кодирует усеченный белковый продукт, который неактивен. Самки производят основной белок для определения пола Секс смертельный (Sxl). Белок Sxl представляет собой репрессор сплайсинга, который связывается с ISS в РНК транскрипта Tra рядом с восходящим акцепторным сайтом, предотвращая U2AF белок от связывания с полипиримидиновым трактом. Это предотвращает использование этого соединения, сдвигая связывание сплайсосомы на расположенный ниже акцепторный сайт. Сплайсинг в этот момент обходит стоп-кодон, который вырезается как часть интрона. Полученная мРНК кодирует активный белок Tra, который сам по себе является регулятором альтернативного сплайсинга других генов, связанных с полом (см. dsx над).[1]

Определение экзона: рецептор Fas

Альтернативный сплайсинг пре-мРНК рецептора Fas

Множественные изоформы Fas рецептор белки производятся альтернативным сплайсингом. Две обычно встречающиеся у человека изоформы продуцируются механизмом пропуска экзонов. МРНК, включающая экзон 6, кодирует мембраносвязанную форму рецептора Fas, которая способствует апоптоз, или запрограммированная гибель клеток. Повышенная экспрессия рецептора Fas в клетках кожи, хронически подвергающихся воздействию солнца, и отсутствие экспрессии в раковых клетках кожи предполагает, что этот механизм может иметь важное значение для устранения предраковых клеток у людей.[36] Если экзон 6 пропущен, полученная мРНК кодирует растворимый белок Fas, который не способствует апоптозу. Включение или пропуск экзона зависит от двух антагонистических белков, ТИА-1 и белок, связывающий полипиримидиновый тракт (PTB).

  • 5'-донорный сайт в интроне ниже экзона 6 в пре-мРНК имеет слабое согласие с консенсусной последовательностью и обычно не связывается с snRNP U1. Если U1 не связывается, экзон пропускается (см. «А» на сопроводительном рисунке).
  • Связывание белка TIA-1 с интронным сайтом энхансера сплайсинга стабилизирует связывание U1 snRNP.[3] Образовавшийся комплекс 5'-донорного сайта способствует связыванию фактора сплайсинга U2AF с 3'-сайтом сплайсинга перед экзоном посредством механизма, который еще не известен (см. B).[37]
  • Экзон 6 содержит богатый пиримидином экзонный глушитель сплайсинга, ure6, где можно привязать ПТБ. Если PTB связывается, он подавляет эффект 5'-донорного комплекса на связывание U2AF с акцепторным сайтом, что приводит к пропуску экзона (см. C).

Этот механизм является примером определения экзона при сплайсинге. Сплайсосома собирается на интроне, и субъединицы мяРНП сворачивают РНК, так что 5 'и 3' концы интрона соединяются. Однако недавно изученные примеры, подобные этому, показывают, что также существуют взаимодействия между концами экзона. В этом конкретном случае эти взаимодействия по определению экзона необходимы, чтобы позволить связывание ядерных факторов сплайсинга до сборки сплайсосом на двух фланкирующих интронах.[37]

Конкуренция репрессор-активатор: ВИЧ-1 тат экзон 2

Альтернативный сплайсинг tat экзона 2 ВИЧ-1

ВИЧ, то ретровирус что вызывает СПИД у человека продуцирует единственный первичный транскрипт РНК, который альтернативно сплайсируется множеством способов с образованием более 40 различных мРНК.[38] Равновесие между дифференцированно сплайсированными транскриптами обеспечивает множественные мРНК, кодирующие различные продукты, необходимые для размножения вирусов.[39] Один из дифференциально сплайсированных транскриптов содержит тат ген, в котором экзон 2 представляет собой экзон кассеты, который может быть пропущен или включен. Включение экзона 2 tat в РНК регулируется конкуренцией между репрессором сплайсинга hnRNP A1 и SR-белком SC35. Внутри экзона 2 последовательность сайленсера экзонного сплайсинга (ESS) и последовательность энхансера экзонного сплайсинга (ESE) перекрываются. Если белок-репрессор A1 связывается с ESS, он инициирует кооперативное связывание множества молекул A1, распространяясь в 5’-донорский сайт перед экзоном 2 и предотвращая связывание основного фактора сплайсинга U2AF35 с полипиримидиновым трактом. Если SC35 связывается с ESE, он предотвращает связывание A1 и поддерживает 5’-донорный сайт в доступном состоянии для сборки сплайсосомы. Конкуренция между активатором и репрессором обеспечивает производство обоих типов мРНК (с экзоном 2 и без него).[38]

Адаптивное значение

Альтернативный сплайсинг - одно из нескольких исключений из первоначальной идеи, что одна последовательность ДНК кодирует одну. полипептид (в Гипотеза один ген - один фермент). Правильнее было бы сейчас сказать: «Один ген - много полипептидов».[40] Внешняя информация необходима для того, чтобы решить, какой полипептид продуцируется с учетом последовательности ДНК и пре-мРНК. Поскольку методы регуляции наследуются, это обеспечивает новые способы воздействия мутаций на экспрессию генов.[7]

Было предложено, чтобы эукариоты Альтернативное сращивание было очень важным шагом на пути к повышению эффективности, потому что информацию можно хранить гораздо экономичнее. Несколько белков могут кодироваться одним геном, вместо того, чтобы требовать для каждого отдельного гена, что позволяет более разнообразно протеом из геном ограниченного размера.[1] Это также обеспечивает эволюционную гибкость. Единичная точечная мутация может привести к тому, что данный экзон будет иногда исключаться или включаться в транскрипт во время сплайсинга, что позволяет получить новый экзон. изоформа белка без потери исходного белка.[1] Исследования выявили внутренне неупорядоченные области (см. Внутренне неструктурированные белки) как обогащенные неконституционными экзонами[41] предполагая, что изоформы белка могут проявлять функциональное разнообразие из-за изменения функциональных модулей в этих областях. Такое функциональное разнообразие, достигаемое с помощью изоформ, отражается в паттернах их экспрессии и может быть предсказано подходами машинного обучения.[42][43] Сравнительные исследования показывают, что альтернативный сплайсинг предшествовал многоклеточности в эволюции, и предполагают, что этот механизм, возможно, использовался для помощи в развитии многоклеточных организмов.[44]

Исследования на основе Проект "Геном человека" и другое секвенирование генома показало, что у людей только на 30% больше генов, чем у круглых червей. Caenorhabditis elegans, и всего в два раза больше, чем муха Drosophila melanogaster. Это открытие привело к предположению, что предполагаемая большая сложность человека или позвоночных в целом может быть связана с более высокими показателями альтернативного сплайсинга у людей, чем у беспозвоночных.[45][46]Однако исследование на выборках из 100 000 EST каждый от человека, мыши, крысы, коровы, мухи (D. melanogaster), червь (C. elegans), а растение Arabidopsis thaliana не обнаружили больших различий в частоте альтернативно сплайсированных генов среди людей и других протестированных животных.[47] Другое исследование, однако, предположило, что эти результаты были артефактом различного количества EST, доступных для различных организмов. Когда они сравнили альтернативные частоты сплайсинга в случайных подмножествах генов от каждого организма, авторы пришли к выводу, что у позвоночных действительно более высокий уровень альтернативного сплайсинга, чем у беспозвоночных.[48]

Болезнь

Изменения в аппарате процессинга РНК могут привести к неправильному сплайсингу нескольких транскриптов, в то время как однонуклеотидные изменения в сайтах сплайсинга или цис-действующих регуляторных сайтах сплайсинга могут привести к различиям в сплайсинге одного гена и, следовательно, в мРНК, полученной из транскрипты мутантного гена. Исследование 2005 г., включающее вероятностный анализ, показало, что более 60% заболеваний человека, вызывающих мутации влияют на сплайсинг, а не напрямую влияют на кодирующие последовательности.[49] Более недавнее исследование показывает, что одна треть всех наследственных заболеваний, вероятно, связана со сплайсингом.[21] Независимо от точного процента, существует ряд заболеваний, связанных со сплайсингом.[50] Как описано ниже, ярким примером заболеваний, связанных со сплайсингом, является рак.

Аномально сплайсированные мРНК также обнаруживаются в большом количестве раковых клеток.[5][6][8] Комбинированный РНК-Seq и протеомный анализ выявил поразительную дифференциальную экспрессию изоформ сплайсинга ключевых белков в важных путях развития рака.[51] Не всегда ясно, вносят ли такие аберрантные паттерны сплайсинга вклад в злокачественный рост или являются просто следствием клеточных аномалий, связанных с раком. Было показано, что для определенных типов рака, таких как колоректальный рак и рак простаты, количество ошибок сплайсинга на рак сильно различается между отдельными видами рака, явление, называемое нестабильность транскриптома.[52][53] Кроме того, было показано, что нестабильность транскриптома коррелирует со сниженным уровнем экспрессии генов факторов сплайсинга. Мутация DNMT3A продемонстрировал свой вклад в гематологические злокачественные новообразования, и это DNMT3A-мутированные клеточные линии проявляют нестабильность транскриптома по сравнению с их изогенными аналогами дикого типа.[54]

Фактически, в раковых клетках количество альтернативных вариантов сплайсинга сокращается по сравнению с нормальными, и типы сплайсинга различаются; например, раковые клетки показывают более высокие уровни удержания интронов, чем нормальные клетки, но более низкие уровни пропуска экзонов.[55] Некоторые различия в сплайсинге раковых клеток могут быть связаны с высокой частотой соматических мутаций в генах факторов сплайсинга,[8] а некоторые могут возникнуть в результате изменений в фосфорилирование транс-действующих факторов сплайсинга.[7] Другие могут быть вызваны изменением относительного количества произведенных факторов сплайсинга; например, было показано, что клетки рака груди имеют повышенный уровень фактора сплайсинга. SF2 / ASF.[56] Одно исследование показало, что относительно небольшой процент (383 из более чем 26000) альтернативных вариантов сплайсинга был значительно выше по частоте в опухолевых клетках, чем в нормальных клетках, что позволяет предположить, что существует ограниченный набор генов, которые при неправильном сплайсинге вносят вклад в опухоль. разработка.[57] Однако считается, что пагубные эффекты неправильно сплайсированных транскриптов обычно защищены и устраняются с помощью механизма клеточного посттранскрипционного контроля качества, называемого Нонсенс-опосредованный распад мРНК [NMD].[58]

Одним из примеров конкретного варианта сплайсинга, связанного с раком, является один из человеческих DNMT гены. Три гена DNMT кодируют ферменты, которые добавляют метил группы ДНК, модификация, которая часто имеет регулирующие эффекты. Несколько аномально сплайсированных мРНК DNMT3B обнаружены в опухолях и линиях раковых клеток. В двух отдельных исследованиях экспрессия двух из этих аномально сплайсированных мРНК в клетках млекопитающих вызвала изменения в паттернах метилирования ДНК в этих клетках. Клетки с одной из аномальных мРНК также росли в два раза быстрее, чем контрольные клетки, что указывает на прямой вклад этого продукта в развитие опухоли.[7]

Другой пример - Рон (MST1R) протоонкоген. Важным свойством раковых клеток является их способность перемещаться и проникать в нормальные ткани. Производство аномально склеенной расшифровки Рон было обнаружено, что он связан с повышенным уровнем SF2 / ASF в клетках рака груди. Аномальная изоформа белка Ron, кодируемая этой мРНК, приводит к подвижность клеток.[56]

Сверхэкспрессия усеченного варианта сплайсинга FOSB ген - ΔFosB - в определенной популяции нейронов в прилежащее ядро был идентифицирован как причинный механизм, участвующий в индукции и поддержании зависимость к наркотикам и естественные награды.[59][60][61][62]

Недавние провокационные исследования указывают на ключевую функцию модификаций структуры хроматина и гистонов в альтернативной регуляции сплайсинга. Эти идеи предполагают, что эпигенетическая регуляция определяет не только то, какие части генома экспрессируются, но и то, как они сплайсируются.[63]

Полногеномный анализ

Полногеномный анализ альтернативного сплайсинга - сложная задача. Обычно альтернативно сплайсированные транскрипты находят путем сравнения стандартное восточное время последовательности, но для этого требуется секвенирование очень большого количества EST. Большинство библиотек EST происходят из очень ограниченного числа тканей, поэтому тканеспецифичные варианты сплайсинга, вероятно, будут упущены в любом случае. Однако были разработаны высокопроизводительные подходы к исследованию сварки, такие как: Микрочип ДНКанализы, анализы связывания РНК и глубокое секвенирование. Эти методы можно использовать для скрининга полиморфизмов или мутаций в элементах сплайсинга или вокруг них, которые влияют на связывание с белками. В сочетании с анализами сплайсинга, включая in vivo репортерный ген Затем можно проанализировать функциональные эффекты полиморфизмов или мутаций на сплайсинг пре-мРНК транскриптов.[21][24][64]

При микроматричном анализе массивы фрагментов ДНК, представляющие отдельные экзоны (например Affymetrix микромассив экзонов) или границы экзон / экзон (например массивы из ExonHit или же Дживан) был использован. Затем массив исследуется с помеченным кДНК из интересующих тканей. КДНК зонда связываются с ДНК из экзонов, которые включены в мРНК в ткани их происхождения, или с ДНК из границы, где были соединены два экзона. Это может выявить присутствие конкретных мРНК, подвергнутых альтернативному сплайсингу.[65]

ЗАЖИМ (Сшивание и иммунопреципитация) использует ультрафиолетовое излучение для связывания белков с молекулами РНК в ткани во время сплайсинга. Затем представляющий интерес транс-действующий регуляторный белок сплайсинга осаждают с использованием специфических антител. Когда РНК, прикрепленная к этому белку, выделяется и клонируется, она выявляет целевые последовательности для этого белка.[4] Другим методом идентификации РНК-связывающих белков и картирования их связывания с транскриптами пре-мРНК является «Оценка геномных аптамеров с помощью микроматрицы по сдвигу (MEGAshift)». Net[66] Этот метод включает в себя адаптацию метода «Систематическая эволюция лигандов путем экспоненциального обогащения (SELEX)».[67] вместе со считывающим устройством на основе микрочипа. Использование метода MEGAshift предоставило понимание регуляции альтернативного сплайсинга, позволяя идентифицировать последовательности в транскриптах пре-мРНК, окружающих альтернативно сплайсированные экзоны, которые опосредуют связывание с различными факторами сплайсинга, такими как ASF / SF2 и PTB.[68] Этот подход также был использован для помощи в определении взаимосвязи между вторичной структурой РНК и связыванием факторов сплайсинга.[23]

Технологии глубокого секвенирования использовались для проведения полногеномного анализа мРНК - необработанных и обработанных - что позволяет получить представление об альтернативном сплайсинге. Например, результаты использования глубокого секвенирования показывают, что у людей примерно 95% транскриптов мультиэксонных генов подвергаются альтернативному сплайсингу, причем ряд транскриптов пре-мРНК сплайсируются тканеспецифическим образом.[2] Функциональная геномика и вычислительные подходы, основанные на многократном обучении, также были разработаны для интеграции данных РНК-секвенирования для прогнозирования функций для альтернативно соединенных изоформ.[43] Глубокое секвенирование также помогло in vivo обнаружение переходного процесса лариаты которые высвобождаются во время сплайсинга, определения последовательностей сайтов ветвления и крупномасштабного картирования точек ветвления в транскриптах пре-мРНК человека.[69]

Использование репортерных анализов позволяет обнаружить белки сплайсинга, участвующие в конкретном альтернативном событии сплайсинга, путем конструирования репортерных генов, которые будут экспрессировать один из двух различных флуоресцентных белков в зависимости от происходящей реакции сплайсинга. Этот метод был использован для выделения мутантов, влияющих на сплайсинг, и, таким образом, для идентификации новых регуляторных белков сплайсинга, инактивированных в этих мутантах.[4]

Базы данных

Есть набор альтернативных баз данных для склейки. Эти базы данных полезны для поиска генов, имеющих пре-мРНК, которые подвергаются альтернативному сплайсингу и альтернативным событиям сплайсинга.

Смотрите также

Рекомендации

  1. ^ а б c d е ж грамм час я j Черный DL (2003). «Механизмы альтернативного сплайсинга пре-мессенджерных РНК» (PDF). Ежегодный обзор биохимии. 72 (1): 291–336. Дои:10.1146 / annurev.biochem.72.121801.161720. PMID 12626338.
  2. ^ а б c Пан К., Шай О, Ли Л.Дж., Фрей Б.Дж., Бленкоу Б.Дж. (декабрь 2008 г.). «Глубокое исследование альтернативной сложности сплайсинга в человеческом транскриптоме с помощью высокопроизводительного секвенирования». Природа Генетика. 40 (12): 1413–5. Дои:10,1038 / нг.259. PMID 18978789. S2CID 9228930.
  3. ^ а б c d е ж грамм час я j Мэтлин А.Дж., Кларк Ф., Смит К.В. (май 2005 г.). «Понимание альтернативной сварки: в сторону сотового кода». Обзоры природы. Молекулярная клеточная биология. 6 (5): 386–98. Дои:10.1038 / nrm1645. PMID 15956978. S2CID 14883495.
  4. ^ а б c Дэвид CJ, Мэнли JL (февраль 2008 г.). «Поиск альтернативных регуляторов склейки: новые подходы предлагают путь к коду склейки». Гены и развитие. 22 (3): 279–85. Дои:10.1101 / gad.1643108. ЧВК 2731647. PMID 18245441.
  5. ^ а б Скотейм Р.И., Нис М. (2007). «Альтернативный сплайсинг при раке: шумный, функциональный или систематический?». Международный журнал биохимии и клеточной биологии. 39 (7–8): 1432–49. Дои:10.1016 / j.biocel.2007.02.016. PMID 17416541.
  6. ^ а б Хэ С, Чжоу Ф, Цзо З, Ченг Х, Чжоу Р. (2009). Бауэр JA (ред.). «Глобальный взгляд на специфические для рака варианты транскриптов с помощью субтрактивного анализа транскриптома». PLOS ONE. 4 (3): e4732. Bibcode:2009PLoSO ... 4.4732H. Дои:10.1371 / journal.pone.0004732. ЧВК 2648985. PMID 19266097.
  7. ^ а б c d Факенталь Дж. Д., Годли Л. А. (2008). «Аберрантный сплайсинг РНК и его функциональные последствия в раковых клетках» (Бесплатный полный текст). Модели и механизмы заболеваний. 1 (1): 37–42. Дои:10.1242 / дмм.000331. ЧВК 2561970. PMID 19048051.
  8. ^ а б c d Свин А., Килпинен С., Руусулехто А., Лоте Р.А., Скотейм Р.И. (май 2016 г.). «Аберрантный сплайсинг РНК при раке; изменения экспрессии и драйверные мутации генов факторов сплайсинга». Онкоген. 35 (19): 2413–27. Дои:10.1038 / onc.2015.318. PMID 26300000. S2CID 22943729.
  9. ^ Чоу LT, Гелинас RE, Брокер TR, Робертс Р.Дж. (Сентябрь 1977 г.). «Удивительное расположение последовательностей на 5'-концах матричной РНК аденовируса 2». Клетка. 12 (1): 1–8. Дои:10.1016/0092-8674(77)90180-5. PMID 902310. S2CID 2099968.
  10. ^ Бергет С.М., Мур С., Шарп П.А. (август 1977 г.). «Сплайсированные сегменты на 5'-конце поздней мРНК аденовируса 2». Труды Национальной академии наук Соединенных Штатов Америки. 74 (8): 3171–5. Bibcode:1977ПНАС ... 74.3171Б. Дои:10.1073 / pnas.74.8.3171. ЧВК 431482. PMID 269380.
  11. ^ а б c Лефф С.Е., Розенфельд М.Г., Эванс Р.М. (1986). «Сложные транскрипционные единицы: разнообразие экспрессии генов за счет альтернативной обработки РНК». Ежегодный обзор биохимии. 55 (1): 1091–117. Дои:10.1146 / annurev.bi.55.070186.005303. PMID 3017190.
  12. ^ Чоу LT, Брокер TR (октябрь 1978 г.). «Сплайсированные структуры сообщения волокна аденовируса 2 и других поздних мРНК». Клетка. 15 (2): 497–510. Дои:10.1016/0092-8674(78)90019-3. PMID 719751. S2CID 44642349.
  13. ^ Невинс Дж. Р., Дарнелл Дж. Э. (декабрь 1978 г.). «Этапы процессинга мРНК Ad2: поли (А) + ядерные последовательности консервативны, и добавление поли (А) предшествует сплайсингу». Клетка. 15 (4): 1477–93. Дои:10.1016/0092-8674(78)90071-5. PMID 729004. S2CID 39704416.
  14. ^ Розенфельд М.Г., Амара С.Г., Роос Б.А., Онг Э.С., Эванс Р.М. (март 1981 г.). «Измененная экспрессия гена кальцитонина, связанная с полиморфизмом РНК». Природа. 290 (5801): 63–5. Bibcode:1981Натура.290 ... 63R. Дои:10.1038 / 290063a0. PMID 7207587. S2CID 4318349.
  15. ^ Розенфельд М.Г., Лин Ч.Р., Амара С.Г., Столярски Л., Роос Б.А., Онг Е.С., Эванс Р.М. (март 1982 г.). «Полиморфизм мРНК кальцитонина: переключение пептидов, связанное с альтернативными событиями сплайсинга РНК». Труды Национальной академии наук Соединенных Штатов Америки. 79 (6): 1717–21. Bibcode:1982PNAS ... 79.1717R. Дои:10.1073 / пнас.79.6.1717. ЧВК 346051. PMID 6952224.
  16. ^ Маки Р., Рёдер В., Следопыт А., Сидман С., Вабл М., Рашке В., Тонегава С. (май 1981 г.). «Роль перестройки ДНК и альтернативного процессинга РНК в экспрессии дельта-генов иммуноглобулинов». Клетка. 24 (2): 353–65. Дои:10.1016/0092-8674(81)90325-1. PMID 6786756. S2CID 13208589.
  17. ^ Schmucker D, Clemens JC, Shu H, Worby CA, Xiao J, Muda M, Dixon JE, Zipursky SL (июнь 2000 г.). «Drosophila Dscam - это рецептор управления аксоном, демонстрирующий необычайное молекулярное разнообразие». Клетка. 101 (6): 671–84. Дои:10.1016 / S0092-8674 (00) 80878-8. PMID 10892653. S2CID 13829976.
  18. ^ а б c d е Саммет М., Фуассак С., Гиго Р. (август 2008 г.). Brent MR (ред.). «Общее определение и номенклатура альтернативных мероприятий по сварке». PLOS вычислительная биология. 4 (8): e1000147. Bibcode:2008PLSCB ... 4E0147S. Дои:10.1371 / journal.pcbi.1000147. ЧВК 2467475. PMID 18688268.
  19. ^ Гао К., Масуда А., Мацуура Т., Оно К. (апрель 2008 г.). «Консенсусная последовательность точки ветвления человека yUnAy». Исследования нуклеиновых кислот. 36 (7): 2257–67. Дои:10.1093 / nar / gkn073. ЧВК 2367711. PMID 18285363.
  20. ^ Кларк Д. (2005). Молекулярная биология. Амстердам: Elsevier Academic Press. ISBN 978-0-12-175551-5.
  21. ^ а б c Лим К.Х., Феррарис Л., Филлу М.Э., Рафаэль Б.Дж., РГ Фэйрбратера (июль 2011 г.). «Использование позиционного распределения для идентификации элементов сплайсинга и прогнозирования дефектов процессинга пре-мРНК в генах человека». Труды Национальной академии наук Соединенных Штатов Америки. 108 (27): 11093–8. Bibcode:2011PNAS..10811093H. Дои:10.1073 / pnas.1101135108. ЧВК 3131313. PMID 21685335.
  22. ^ Варф МБ, Берглунд Дж. А. (март 2010 г.). «Роль структуры РНК в регуляции сплайсинга пре-мРНК». Тенденции в биохимических науках. 35 (3): 169–78. Дои:10.1016 / j.tibs.2009.10.004. ЧВК 2834840. PMID 19959365.
  23. ^ а б Рид Д.К., Чанг Б.Л., Гандерсон С.И., Альперт Л., Томпсон В.А., Fairbrother WG (декабрь 2009 г.). «SELEX следующего поколения определяет последовательность и структурные детерминанты связывания фактора сплайсинга в последовательности пре-мРНК человека». РНК. 15 (12): 2385–97. Дои:10.1261 / rna.1821809. ЧВК 2779669. PMID 19861426.
  24. ^ а б c d Ван З., Burge CB (май 2008 г.). «Регулирование сварки: от перечня регулирующих элементов до интегрированного кода сварки» (Бесплатный полный текст). РНК. 14 (5): 802–13. Дои:10.1261 / rna.876308. ЧВК 2327353. PMID 18369186.
  25. ^ а б Бараш Й., Каларко Дж. А., Гао В., Пан К., Ван Х, Шай О, Бленкоу Б. Дж., Фрей Б. Дж. (Май 2010 г.). «Расшифровка кода склейки». Природа. 465 (7294): 53–9. Bibcode:2010Натура.465 ... 53Б. Дои:10.1038 / природа09000. PMID 20445623. S2CID 2398858.
  26. ^ Ке С., Чжан XH, Часин Л.А. (апрель 2008 г.). «Положительный отбор, действующий на мотивы сплайсинга, отражает компенсаторную эволюцию». Геномные исследования. 18 (4): 533–43. Дои:10.1101 / гр.070268.107. ЧВК 2279241. PMID 18204002.
  27. ^ Fairbrother WG, Holste D, Burge CB, Sharp PA (сентябрь 2004 г.). «Проверка экзонных энхансеров сплайсинга на основе однонуклеотидного полиморфизма». PLOS Биология. 2 (9): E268. Дои:10.1371 / journal.pbio.0020268. ЧВК 514884. PMID 15340491.
  28. ^ Ли-Бьярлай Х (2016). «Функция метилирования ДНК у социальных насекомых». Границы экологии и эволюции. 4: 57. Дои:10.3389 / fevo.2016.00057.
  29. ^ Ван И, Ли-Бьярлай Х (январь 2015 г.). «Физиологические и молекулярные механизмы питания медоносных пчел». В Юренке Р (ред.). Успехи физиологии насекомых. 49. Академическая пресса. С. 25–58. Дои:10.1016 / bs.aiip.2015.06.002. ISBN 9780128025864.
  30. ^ Лико Ф, Форе С., Кухарски Р., Вольф С., Фалькенхайн С., Малешка Р. (ноябрь 2010 г.). Келлер L (ред.). «Эпигеномы медоносных пчел: дифференциальное метилирование ДНК мозга у маток и рабочих». PLOS Биология. 8 (11): e1000506. Дои:10.1371 / journal.pbio.1000506. ЧВК 2970541. PMID 21072239.
  31. ^ Флорес К., Вольшин Ф., Корнево Дж. Дж., Аллен А. Н., Хентельман М. Дж., Амдам Г. В. (сентябрь 2012 г.). «Общегеномная ассоциация между метилированием ДНК и альтернативным сплайсингом у беспозвоночных». BMC Genomics. 13 (1): 480. Дои:10.1186/1471-2164-13-480. ЧВК 3526459. PMID 22978521.
  32. ^ Weinstock GM, Robinson GE, Gibbs RA, Weinstock GM, Robinson GE, Worley KC и др. (Консорциум по секвенированию генома медоносной пчелы) (октябрь 2006 г.). «Понимание социальных насекомых из генома пчелы Apis mellifera». Природа. 443 (7114): 931–49. Bibcode:2006Натура.443..931Т. Дои:10.1038 / природа05260. ЧВК 2048586. PMID 17073008.
  33. ^ Ли-Бьярлей Х., Ли Й., Страуд Х., Фенг С., Ньюман Т.С., Канеда М. и др. (Июль 2013). «Нокдаун РНК-интерференции ДНК-метилтрансферазы 3 влияет на альтернативный сплайсинг генов у медоносной пчелы». Труды Национальной академии наук Соединенных Штатов Америки. 110 (31): 12750–5. Bibcode:2013ПНАС..11012750Л. Дои:10.1073 / pnas.1310735110. ЧВК 3732956. PMID 23852726.
  34. ^ а б Линч К.В., Маниатис Т. (август 1996 г.). «Сборка специфических белковых комплексов SR на различных регуляторных элементах энхансера двойного сплайсинга Drosophila». Гены и развитие. 10 (16): 2089–101. Дои:10.1101 / gad.10.16.2089. PMID 8769651.
  35. ^ Graveley BR, Hertel KJ, Maniatis T (июнь 2001 г.). «Роль U2AF35 и U2AF65 в энхансер-зависимом сплайсинге». РНК. 7 (6): 806–18. Дои:10.1017 / S1355838201010317. ЧВК 1370132. PMID 11421359.
  36. ^ Филипович Э., Адегбойега П., Санчес Р.Л., Гаталица З. (февраль 2002 г.). «Экспрессия CD95 (Fas) в коже человека и кожных карциномах, подвергшихся воздействию солнца». Рак. 94 (3): 814–9. Дои:10.1002 / cncr.10277. PMID 11857317. S2CID 23772719.
  37. ^ а б Искьердо Дж. М., Майос Н., Боннал С., Мартинес К., Каштелу Р., Гиго Р., Бильбао Д., Валькарсель Дж. (Август 2005 г.). «Регулирование альтернативного сплайсинга Fas за счет антагонистических эффектов TIA-1 и PTB на определение экзона». Молекулярная клетка. 19 (4): 475–84. Дои:10.1016 / j.molcel.2005.06.015. PMID 16109372.
  38. ^ а б Захлер AM, Damgaard CK, Kjems J, Caputi M (март 2004 г.). «SC35 и гетерогенные ядерные рибонуклеопротеиновые белки A / B связываются с соседним экзонным усилителем сплайсинга / экзонным элементом сайленсера сплайсинга, чтобы регулировать сплайсинг tat экзона 2 ВИЧ-1». Журнал биологической химии. 279 (11): 10077–84. Дои:10.1074 / jbc.M312743200. PMID 14703516.
  39. ^ Jacquenet S, Méreau A, Bilodeau PS, Damier L, Stoltzfus CM, Branlant C (ноябрь 2001 г.). «Сайленсер сплайсинга второго экзона в вирусе иммунодефицита человека типа 1 tat экзон 2 репрессирует сплайсинг мРНК Tat и связывает белок hnRNP H». Журнал биологической химии. 276 (44): 40464–75. Дои:10.1074 / jbc.M104070200. PMID 11526107.
  40. ^ "Бюллетень HHMI, сентябрь 2005 г .: Альтернативное сращивание". www.hhmi.org. Архивировано из оригинал на 2009-06-22. Получено 2009-05-26.
  41. ^ Ромеро П.Р., Заиди С., Фанг Ю.Ю., Уверский В.Н., Радивояк П., Олдфилд С.Дж., Кортезе М.С., Сикмайер М., ЛеГалл Т., Обрадович З., Дункер А.К. (май 2006 г.). «Альтернативный сплайсинг в сочетании с внутренним нарушением белков позволяет увеличить функциональное разнообразие многоклеточных организмов». Труды Национальной академии наук Соединенных Штатов Америки. 103 (22): 8390–5. Bibcode:2006ПНАС..103.8390Р. Дои:10.1073 / pnas.0507916103. ЧВК 1482503. PMID 16717195.
  42. ^ Ли HD, Менон Р., Оменн Г.С., Гуань Й. (август 2014 г.). «Наступающая эра интеграции геномных данных для анализа функции изоформ сплайсинга». Тенденции в генетике. 30 (8): 340–7. Дои:10.1016 / j.tig.2014.05.005. ЧВК 4112133. PMID 24951248.
  43. ^ а б Экси Р., Ли ХД, Менон Р., Вэнь Й., Оменн Г.С., Кретцлер М., Гуань Й. (ноябрь 2013 г.). «Систематическая дифференциация функций для альтернативно сплайсированных изоформ посредством интеграции данных RNA-seq». PLOS вычислительная биология. 9 (11): e1003314. Bibcode:2013PLSCB ... 9E3314E. Дои:10.1371 / journal.pcbi.1003314. ЧВК 3820534. PMID 24244129.
  44. ^ Иримиа М., Руки Дж. Л., Пенни Д., Рой С. В. (октябрь 2007 г.). «Функциональный и эволюционный анализ генов альтернативного сплайсинга согласуется с ранним эукариотическим происхождением альтернативного сплайсинга». BMC Эволюционная биология. 7: 188. Дои:10.1186/1471-2148-7-188. ЧВК 2082043. PMID 17916237.
  45. ^ Юинг Б., Грин П. (июнь 2000 г.). «Анализ экспрессируемых тегов последовательностей указывает на 35 000 генов человека». Природа Генетика. 25 (2): 232–4. Дои:10.1038/76115. PMID 10835644. S2CID 19165121.
  46. ^ Руст Кроллиус Х, Джайон О., Бернот А., Дасильва С., Боуно Л., Фишер С., Физамес С., Винкер П., Броттье П., Кетьье Ф., Саурин В., Вайссенбах Дж. (Июнь 2000 г.). «Оценка количества генов человека, полученная с помощью анализа всего генома с использованием последовательности ДНК Tetraodon nigroviridis». Природа Генетика. 25 (2): 235–8. Дои:10.1038/76118. PMID 10835645. S2CID 44052050.
  47. ^ Бретт Д., Поспишил Х., Валькарсель Дж., Райх Дж., Борк П. (январь 2002 г.). «Альтернативный сплайсинг и сложность генома». Природа Генетика. 30 (1): 29–30. Дои:10,1038 / ng803. PMID 11743582. S2CID 2724843.
  48. ^ Ким Э, Маген А, Аст Г (2006). «Различные уровни альтернативного сплайсинга среди эукариот». Исследования нуклеиновых кислот. 35 (1): 125–31. Дои:10.1093 / нар / gkl924. ЧВК 1802581. PMID 17158149.
  49. ^ Лопес-Бигас Н., Аудит Б, Узунис С., Парра Дж., Гиго Р. (март 2005 г.). «Сплайсинговые мутации - самая частая причина наследственных заболеваний?». Письма FEBS. 579 (9): 1900–3. Дои:10.1016 / j.febslet.2005.02.047. PMID 15792793. S2CID 30174458.
  50. ^ Уорд А.Дж., Купер Т.А. (январь 2010 г.). «Патобиология сращивания». Журнал патологии. 220 (2): 152–63. Дои:10.1002 / путь.2649. ЧВК 2855871. PMID 19918805.
  51. ^ Оменн Г.С., Гуань Й., Менон Р. (июль 2014 г.). «Новый класс белков-кандидатов в биомаркеры рака: дифференциально экспрессируемые варианты сплайсинга ERBB2 (HER2 / neu) и ERBB1 (EGFR) в клеточных линиях рака молочной железы». Журнал протеомики. 107: 103–12. Дои:10.1016 / j.jprot.2014.04.012. ЧВК 4123867. PMID 24802673.
  52. ^ Свин А., Йоханнесен Б., Тейшейра М.Р., Лоте Р.А., Скотейм Р.И. (август 2014 г.). «Нестабильность транскриптома как молекулярная характеристика рака панкреатита». BMC Genomics. 15: 672. Дои:10.1186/1471-2164-15-672. ЧВК 3219073. PMID 25109687.
  53. ^ Свин А., Агесен Т.Х., Несбаккен А., Рогнум Т.О., Лоте Р.А., Скотейм Р.И. (май 2011 г.). «Нестабильность транскриптома при колоректальном раке, выявленная с помощью анализа микрочипов экзонов: ассоциации с уровнями экспрессии факторов сплайсинга и выживаемостью пациентов». Геномная медицина. 3 (5): 32. Дои:10,1186 / г 248. ЧВК 4137096. PMID 21619627.
  54. ^ Banaszak LG, Giudice V, Zhao X, Wu Z, Gao S, Hosokawa K, Keyvanfar K, Townsley DM, Gutierrez-Rodrigues F, Fernandez Ibanez MD, Kajigaya S, Young NS (март 2018 г.). «Аномальный сплайсинг РНК и геномная нестабильность после индукции мутаций DNMT3A посредством редактирования гена CRISPR / Cas9». Клетки, молекулы и болезни крови. 69: 10–22. Дои:10.1016 / j.bcmd.2017.12.002. ЧВК 6728079. PMID 29324392.
  55. ^ Ким Е., Горен А., Аст Дж. (Январь 2008 г.). «Понимание связи между раком и альтернативным сращиванием». Тенденции в генетике. 24 (1): 7–10. Дои:10.1016 / j.tig.2007.10.001. PMID 18054115.
  56. ^ а б Ghigna C, Giordano S, Shen H, Benvenuto F, Castiglioni F, Comoglio PM, Green MR, Riva S, Biamonti G (декабрь 2005 г.). «Подвижность клеток контролируется SF2 / ASF посредством альтернативного сплайсинга протоонкогена Рона». Молекулярная клетка. 20 (6): 881–90. Дои:10.1016 / j.molcel.2005.10.026. PMID 16364913.
  57. ^ Хуэй Л., Чжан Х, Ву Х, Лин З, Ван Ц., Ли И, Ху Г (апрель 2004 г.). «Идентификация альтернативно сплайсированных вариантов мРНК, связанных с раком, путем выравнивания EST по всему геному». Онкоген. 23 (17): 3013–23. Дои:10.1038 / sj.onc.1207362. PMID 15048092.
  58. ^ Danckwardt S, Neu-Yilik G, Thermann R, Frede U, Hentze MW, Kulozik AE (март 2002 г.). «Аномально сплайсированные мРНК бета-глобина: единичная точечная мутация генерирует транскрипты, чувствительные и нечувствительные к нонсенс-опосредованному распаду мРНК». Кровь. 99 (5): 1811–6. Дои:10.1182 / blood.V99.5.1811. PMID 11861299. S2CID 17128174.
  59. ^ Нестлер EJ (декабрь 2013 г.). «Клеточная основа памяти при зависимости». Диалоги в клинической неврологии. 15 (4): 431–43. ЧВК 3898681. PMID 24459410. НЕСМОТРЯ НА ВАЖНОСТЬ МНОГОЧИСЛЕННЫХ ПСИХОСОЦИАЛЬНЫХ ФАКТОРОВ, В СВОЕЙ ОСНОВНОЙ ЦЕЛЕ НАРКОЗАВИСИМОСТЬ ВКЛЮЧАЕТ БИОЛОГИЧЕСКИЙ ПРОЦЕСС: способность многократного воздействия наркотика, вызывающего злоупотребление, вызывать изменения в уязвимом мозге, которые вызывают компульсивный поиск и прием наркотиков, а также потерю контроля над употреблением наркотиков, которые определяют состояние зависимости. ... Большое количество литературы продемонстрировало, что такая индукция ΔFosB в нейронах NAc D1-типа увеличивает чувствительность животного к лекарству, а также увеличивает естественное вознаграждение и способствует самостоятельному введению лекарства, предположительно за счет процесса положительного подкрепления.
  60. ^ Ruffle JK (ноябрь 2014 г.). «Молекулярная нейробиология зависимости: о чем вообще (Δ) FosB?». Американский журнал злоупотребления наркотиками и алкоголем. 40 (6): 428–37. Дои:10.3109/00952990.2014.933840. PMID 25083822. S2CID 19157711. ΔFosB является важным фактором транскрипции, участвующим в молекулярных и поведенческих механизмах привыкания после многократного воздействия наркотиков. Образование ΔFosB во многих областях мозга и молекулярный путь, ведущий к образованию комплексов АР-1, хорошо изучены. Установление функционального назначения ΔFosB позволило дополнительно определить некоторые ключевые аспекты его молекулярных каскадов, включая такие эффекторы, как GluR2 (87,88), Cdk5 (93) и NFkB (100). Более того, многие из этих выявленных молекулярных изменений теперь напрямую связаны со структурными, физиологическими и поведенческими изменениями, наблюдаемыми после хронического воздействия лекарств (60,95,97,102). Новые горизонты исследований молекулярной роли ΔFosB были открыты эпигенетическими исследованиями, и недавние достижения продемонстрировали роль ΔFosB, действующего на ДНК и гистоны, действительно как «молекулярный переключатель» (34). Благодаря нашему более глубокому пониманию ΔFosB при зависимости, появилась возможность оценивать вызывающий привыкание потенциал текущих лекарств (119), а также использовать его в качестве биомаркера для оценки эффективности терапевтических вмешательств (121, 122, 124). Некоторые из этих предложенных вмешательств имеют ограничения (125) или находятся в зачаточном состоянии (75). Однако есть надежда, что некоторые из этих предварительных результатов могут привести к инновационным методам лечения, которые так необходимы при зависимости.
  61. ^ Билински П., Войтыла А., Капка-Скшипчак Л., Хведорович Р., Циранка М., Студзинский Т. (2012). «Эпигенетическая регуляция при наркозависимости». Анналы сельскохозяйственной и экологической медицины. 19 (3): 491–6. PMID 23020045. По этим причинам ΔFosB считается первичным и причинным фактором транскрипции в создании новых нейронных связей в центре вознаграждения, префронтальной коре и других регионах лимбической системы. Это отражается в повышенном, стабильном и продолжительном уровне чувствительности к кокаину и другим наркотикам, а также в тенденции к рецидивам даже после длительных периодов воздержания. Эти недавно построенные сети очень эффективно функционируют новыми путями, как только наркотики злоупотребляют.
  62. ^ Олсен CM (декабрь 2011 г.). «Естественные награды, нейропластичность и немедикаментозные зависимости». Нейрофармакология. 61 (7): 1109–22. Дои:10.1016 / j.neuropharm.2011.03.010. ЧВК 3139704. PMID 21459101.
  63. ^ Луко РФ, Алло М, Щор И.Е., Корнблихтт АР, Мистели Т. (январь 2011 г.). «Эпигенетика в альтернативном сплайсинге пре-мРНК». Клетка. 144 (1): 16–26. Дои:10.1016 / j.cell.2010.11.056. ЧВК 3038581. PMID 21215366.
  64. ^ Fairbrother WG, Yeh RF, Sharp PA, Burge CB (август 2002 г.). «Прогнозирующая идентификация энхансеров экзонного сплайсинга в генах человека». Наука. 297 (5583): 1007–13. Bibcode:2002Научный ... 297.1007F. Дои:10.1126 / science.1073774. PMID 12114529. S2CID 8689111.
  65. ^ Пан К., Шай О., Мискитта К., Чжан В., Зальцман А.Л., Мохаммад Н., Бабак Т., Сиу Х., Хьюз Т.Р., Моррис К.Д., Фрей Б.Дж., Бленкоу Б.Дж. (декабрь 2004 г.). «Выявление глобальных регуляторных особенностей альтернативного сплайсинга млекопитающих с использованием платформы количественного микрочипа». Молекулярная клетка. 16 (6): 929–41. Дои:10.1016 / j.molcel.2004.12.004. PMID 15610736.
  66. ^ Уоткинс KH, Стюарт A, Fairbrother W (декабрь 2009 г.). «Быстрый высокопроизводительный метод картирования рибонуклеопротеинов (РНП) на пре-мРНК человека». Журнал визуализированных экспериментов. 34 (34): 1622. Дои:10.3791/1622. ЧВК 3152247. PMID 19956082.
  67. ^ Tuerk C, Gold L (август 1990 г.). «Систематическая эволюция лигандов путем экспоненциального обогащения: лиганды РНК к ДНК-полимеразе бактериофага Т4». Наука. 249 (4968): 505–10. Bibcode:1990Sci ... 249..505T. Дои:10.1126 / science.2200121. PMID 2200121.
  68. ^ Чанг Б., Левин Дж., Томпсон В.А., Fairbrother WG (март 2010 г.). «Высокопроизводительный анализ связывания определяет специфичность связывания ASF / SF2 с альтернативно сплайсированными человеческими пре-мРНК». Комбинаторная химия и высокопроизводительный скрининг. 13 (3): 242–52. Дои:10.2174/138620710790980522. ЧВК 3427726. PMID 20015017.
  69. ^ Таггарт А.Дж., Дезимоун А.М., Ши Дж.С., Филлу М.Э., Fairbrother WG (июнь 2012). «Крупномасштабное картирование точек ветвления в транскриптах пре-мРНК человека in vivo». Структурная и молекулярная биология природы. 19 (7): 719–21. Дои:10.1038 / nsmb.2327. ЧВК 3465671. PMID 22705790.

внешняя ссылка