WikiDer > Нью-йоркский агар

New York City agar

В N.Y.C (Нью-Йорк) средний или GC (Neisseria gonorrhoeae) средний агар используется для изоляции Гонококки.[1]

Рост Neisseria gonorrhoeae колонии на среднем агаре Нью-Йорка

Сочинение

Основа агара состоит из:[1]

ИнгредиентыГрамм на литр
Протеозный пептон15
Кукурузный крахмал1
Глюкоза5
Натрия хлорид5
Гидрофосфат калия4
Дигидрофосфат калия1
Агар20

Финал pH (при 25 ° С) 7,4 ± 0,2

Предпосылки и принципы

База агара NYC была первоначально разработана Фауэром, Вайсбурдом и Уилсоном.[1][2][3] на Департамент здравоохранения г. Нью-Йорка для селективного выделения патогенных Neisseria виды из клинических образцов. Он состоит в основном из агаровой основы пептон-кукурузный крахмал, забуференной фосфаты и дополнен лошадью плазма, лошадь гемоглобин, декстроза, автолизат дрожжей и антибиотики.[1][2] Эта среда превосходит другие среды, обычно используемые для выделения Neisseria разновидность.[1][4][5] Прозрачный характер среды помогает изучать колониальные типы.[6]

Протеозный пептон, лошадиная плазма, гемоглобин обеспечить питательными веществами для роста N. gonorrhoeae и N. meningitidis. Фосфат буферы средний. Добавленная селективная добавка содержит антибиотики. ванкомицин, колистин, нистатин и триметоприм, чтобы подавить сопутствующую флору. Ванкомицин тормозит грамположительный бактерии. Колистин подавляет грамм отрицательный бактерии, в том числе Виды Pseudomonas, пока Протей подавляется триметоприм.[7] Сочетание триметоприм и колистин действует синергетически против грамотрицательные палочки.[8] Крахмал нейтрализует токсичные метаболиты, производимые Neisseria. Добавка дрожжевого автолизата выполняет СО2 требования, необходимые для улучшения Neisseria рост. Дрожжи содержат щавелевоуксусная кислота который метаболизируется гонококки производить достаточное количество CO2 для роста капнофильных гонококков.[9] Кроме того, присутствие дрожжевого автолизата снижает фаза задержки роста Neisseria, таким образом увеличивая размер и количество колоний. Образец можно наносить штрихами на среду для получения максимальной изоляции.

Процедура

Рост Neisseria meningitidis колонии на среднем агаре Нью-Йорка

Полоса в образец как можно скорее после его получения в лаборатория. Если материал культурный прямо из тампондействуйте следующим образом:[10]

  1. Вращайте тампон прямо на среде по большой букве «Z», чтобы обеспечить адекватное воздействие на тампон средний для передачи организмы.
  2. Нарисуйте крест-накрест узор «Z» с стерильный петля, желательно в клиника. Если это не было сделано ранее, перекрестную штриховку следует провести в лаборатории.
  3. Как можно скорее поместите культуру в аэробный окружающая среда обогащена углекислый газ.
  4. Инкубировать при 35 ± 2 ° C и осмотреть после с ночевкой инкубация и снова примерно через 48 часов.
  5. Субкультура для идентификации N. gonorrhoeae следует произвести в течение 18–24 часов. При отправке после инкубации колонии следует пересеять перед проведением биохимических идентификационных тестов, чтобы гарантировать достижение адекватной жизнеспособности.

Ожидаемые результаты

Типичная морфология колоний следующая:[7]

N. gonorrhoeae могут выглядеть как маленькие (0,5–1,0 мм) серовато-белые или бесцветные слизистые колонии.N. meningitidis выглядит как большие бесцветные или голубовато-серые слизистые колонии.

Колонии могут быть выбраны для Окрашивание по Граму, субкультивирование или другие диагностические процедуры.

Рекомендации

  1. ^ а б c d е Fauer, Weisburd, Wilson and May, 1973, Health Lab. Sci., 10: 44.
  2. ^ а б Fauer, Weisburd and Wilson, 1973, Health Lab. Наук, 10: 55.
  3. ^ Фауэр Ю. К., Вейсбурд М. Х. и Уилсон М. Э., 1973, Health Lab Sci., 10 (2) 61.
  4. ^ Granato, Schneible-Smith and Weiner, 1981, J. Clin. Microbiol.13: 963.
  5. ^ Гриффин П. Дж. И Рейдер С. В., 1957, J. Biol. Мед., 29, 613
  6. ^ Макфаддин Дж. Ф., 1985, Среда для выделения-культивирования-идентификации-поддержания медицинских бактерий, Vol. 1, Уильямс и Уилкинс, Балтимор
  7. ^ а б Кнапп и Куманс. 1999. In Murray, Baron, Pfaller, Tenover and Yolken (ed.), Руководство по клинической микробиологии, 7-е изд. Американское общество микробиологии, Вашингтон, округ Колумбия
  8. ^ . Симмонс Н. А., 1970, J. Clin. Патол., 23, 757.
  9. ^ Лоутон и Кох, 1982, J. Clin. Microbiol., 20: 905.
  10. ^ Центры по контролю и профилактике заболеваний США. 1975. Критерии и методы диагностики гонореи, USPHS, Атланта, Джорджия.