WikiDer > Трансдуцин

Transducin
Сенсорный родопсин II (цвета радуги) встроены в липидный бислой (красные головы и синие хвосты) с Трансдуцином под ним. граммтα окрашен в красный цвет, Gтβ синий и Gтγ желтый. Есть граница ВВП молекула в Gтα-субъединица и связанный ретиналь (черный) в родопсине. В N-конец конец родопсина красный, а конец C-конец синий. Закрепление трансдуцина на мембране показано черным цветом.

Трансдуцин (ГРАММт) это белок естественно выразил в позвоночное животное сетчатка стержни и конусы, и это очень важно в фототрансдукция позвоночных. Это тип гетеротримерный G-белок с разными α-субъединицами в фоторецепторах палочек и колбочек.[1]

Свет приводит к конформационным изменениям в родопсин, что, в свою очередь, приводит к активации трансдуцина. Трансдуцин активирует фосфодиэстераза, что приводит к разрушению cGMP. Интенсивность вспышки прямо пропорциональна количеству активированного трансдуцина.

Функция в фототрансдукции

Трансдуцин активируется метародопсин II, конформационное изменение в родопсин вызвано поглощение из фотон частью родопсина сетчатка.[2][3] Свет вызывает изомеризацию ретиналя от 11-цис до полностью транс. Изомеризация вызывает изменение опсина в метародопсин II. Когда метародопсин активирует трансдуцин, гуанозиндифосфат (GDP), связанный с α-субъединицей (Tα) обменивается на гуанозинтрифосфат (ГТФ) из цитоплазмы. Субъединица α отделяется от субъединиц βγ (Tβγ.) Активированная α-субъединица трансдуцина активирует фосфодиэстеразу цГМФ.[4] cGMP фосфодиэстераза расщепляет цГМФ, внутриклеточный второй посланник который открывает cGMP-управляемые катионные каналы. Фосфодиэстераза гидролизует цГМФ до 5’-GMP. Снижение концентрации цГМФ приводит к уменьшению открытия катионных каналов и, как следствие, гиперполяризации мембранный потенциал.

Трансдуцин деактивируется, когда связанный с α-субъединицей GTP гидролизуется до GDP. Этот процесс ускоряет комплекс, содержащий РГО (Регулятор передачи сигналов G-белка) -белок и гамма-субъединица эффекторной циклической GMP-фосфодиэстеразы.

Механизм активации

Тα субъединица трансдуцина содержит три функциональных домена: один для родопсина / Tβγ взаимодействия, один для связывания GTP, а последний для активации фосфодиэстеразы cGMP.

Хотя фокус фототрансдукции находится на Tα, Тβγ имеет решающее значение для связывания родопсина с трансдуцином.[5][6] Родопсин / Тβγ связывающий домен содержит амино- и карбоксильный терминал Тα. Аминоконец - это сайт взаимодействия для родопсина, а карбоксильный конец - для Tβγ привязка. Аминоконец может быть закреплен или находиться в непосредственной близости от карбоксильного конца для активации молекулы трансдуцина родопсином.[7]

Взаимодействие с фотолизированным родопсином открывает сайт связывания GTP, что обеспечивает быстрый обмен GDP на GTP. Сайт связывания находится в закрытой конформации в отсутствие фотолизированного родопсина. Обычно в закрытом строении α-спираль расположенный рядом с сайтом связывания, находится в положении, которое препятствует обмену GTP / GDP. Конформационное изменение Tα Фотолизированный родопсин вызывает наклон спирали, открывая сайт связывания GTP.

После обмена GTP на ВВП GTP-Tα комплекс претерпевает два основных изменения: диссоциацию от фотолизированного родопсина и Tβγ субъединица и экспонирование сайта связывания фосфодиэстеразы (PDE) для взаимодействия с латентной PDE. Конформационные изменения, инициированные в трансдуцине связыванием GTP, передаются на сайт связывания PDE и заставляют его подвергаться воздействию для связывания с PDE. Конформационные изменения, индуцированные GTP, также могут нарушить работу родопсина / Tβγ сайт связывания и приводят к диссоциации от GTP-Tα сложный.[7]

Тβγ сложный

Основное предположение для G-белков состоит в том, что субъединицы α, β и γ присутствуют в одинаковых концентрациях. Однако есть свидетельства того, что Tβ и тγ чем Тα в наружных сегментах стержня (ROS).[8] Избыток Tβ и тγ был сделан вывод, что они свободно плавают в ROS, хотя это не может быть связано с Tα в любой момент времени. Одно из возможных объяснений превышения Tβγ повышается доступность для Tα переплести. Поскольку Tβγ имеет решающее значение для связывания трансдуцина, повторное приобретение гетеротримерной конформации может привести к более быстрому связыванию с другой молекулой GTP и, следовательно, более быстрой фототрансдукции.[8]

Мысльβγ было упомянуто, чтобы иметь решающее значение для Tα связываясь с родопсином, есть также свидетельства того, что Tβγ может играть решающую, возможно, прямую роль в обмене нуклеотидов, чем считалось ранее. Было обнаружено, что родопсин специфически вызывает конформационный переключатель в карбоксильном конце Tγ субъединица. Это изменение в конечном итоге регулирует аллостерический нуклеотидный обмен на Tα. Этот домен может служить основной областью для взаимодействий с родопсином и для регуляции обмена нуклеотидов на Tα. Считалось, что активация трансдуцина G-белка родопсином происходит по рычажному механизму.[9][10] Связывание родопсина вызывает образование спирали на карбоксильном конце Тγ и приносит Tγ карбоксил и Тα. Карбоксильные окончания сближаются, чтобы облегчить обмен нуклеотидов.

Мутации в этом домене отменяют взаимодействие родопсин-трансдуцин. Этот конформационный переключатель в Tγ может сохраняться в семействе γ-субъединиц G-белка.[6]

Взаимодействие с фосфодиэстеразой цГМФ и дезактивация

Активация трансдуцина в конечном итоге приводит к стимуляции биологической эффекторной молекулы цГМФ-фосфодиэстеразы, олигомера с α, β и двумя ингибирующими γ-субъединицами.[11] Субъединицы α и β представляют собой субъединицы с большей молекулярной массой и составляют каталитическую составляющую PDE.

В системе фототрансдукции GTP-связанный-Tα связывается с субъединицей γ PDE. Есть два предложенных механизма активации PDE. Первый предполагает, что GTP-связанный-Tα высвобождает субъединицу PDE γ из каталитических субъединиц, чтобы активировать гидролиз.[12] Второй более вероятный механизм предполагает, что связывание вызывает позиционный сдвиг субъединицы γ, обеспечивая лучшую доступность каталитической субъединицы для гидролиза цГМФ. ГТФазная активность Tα гидролизует GTP до GDP и изменяет конформацию Tα субъединицы, увеличивая ее сродство к связыванию с субъединицами α и β на PDE. Связывание Tα к этим более крупным субъединицам приводит к другому конформационному изменению PDE и ингибирует способность каталитической субъединицы к гидролизу. Этот сайт связывания на более крупной молекулярной субъединице может непосредственно примыкать к Tα сайт связывания на субъединице γ.[12]

Хотя традиционный механизм включает активацию PDE GTP-связанным Tα, Привязанный к ВВП Tα также была продемонстрирована способность активировать PDE. Эксперименты по активации PDE в темноте (без присутствия GTP) показывают небольшую, но воспроизводимую активацию PDE.[13] Это можно объяснить активацией PDE свободным GDP-связанным Tα. Сродство субъединицы PDE γ к GDP-связанному Tα, однако, кажется, примерно в 100 раз меньше, чем для GTP-связанного Tα.[14] Механизм, с помощью которого Tα активирует PDE, остается неизвестным, однако предполагается, что он аналогичен активации PDE GTP-связанным Tα.[13]

Чтобы предотвратить активацию PDE в темноте, концентрация GDP-связанного Tα следует свести к минимуму. Эта работа, кажется, падает на Tβγ сохранить привязанный к ВВП Tα связаны в виде холотрансдуцина.[13]

Для дезактивации гидролиз связанного GTP с помощью Tα необходимо для Tα дезактивация и возвращение трансдуцина к исходному состоянию. Однако простого гидролиза GTP не обязательно достаточно для дезактивации PDE. Тβγ здесь снова играет важную роль в деактивации PDE.[13] Добавление Tβγ останавливает ингибирование каталитического фрагмента PDE, потому что он связывается с Tα-GTP комплекс. Реассоциированная форма трансдуцина больше не может связываться с PDE. Это освобождает PDE для воссоединения с фотолизированным родопсином и возврата PDE в исходное состояние для ожидания активации другим GTP-связанным Tα.[12]

Гены

Рекомендации

  1. ^ Lerea CL, Somers DE, Hurley JB, Klock IB, Bunt-Milam AH (октябрь 1986 г.). «Идентификация специфических субъединиц трансдуцина альфа в фоторецепторах палочек и колбочек сетчатки». Наука. 234 (4772): 77–80. Дои:10.1126 / science.3529395. PMID 3529395.
  2. ^ Hargrave PA, Hamm HE, Hofmann KP (январь 1993 г.). «Взаимодействие родопсина с G-белком трансдуцином». BioEssays. 15 (1): 43–50. Дои:10.1002 / bies.950150107. PMID 8466475.
  3. ^ Даунс М.А., Аримото Р., Маршалл Г.Р., Киселев О.Г. (декабрь 2006 г.). «Альфа- и бета-гамма-субъединицы G-белка взаимодействуют с конформационно различными сигнальными состояниями родопсина». Видение Res. 46 (27): 4442–8. Дои:10.1016 / j.visres.2006.07.021. PMID 16989885.
  4. ^ Фунг, БКК; Hurley, JB; Страйер, Л. (1981). «Поток информации в управляемом светом циклическом нуклеотидном каскаде зрения». Труды Национальной академии наук Соединенных Штатов Америки. 78 (1): 152–156. Дои:10.1073 / пнас.78.1.152. ЧВК 319009. PMID 6264430.
  5. ^ Фунг, Б. К. (1983). «Характеристика трансдуцина из внешних сегментов бычьей сетчатки глаза. I. Разделение и воссоздание субъединиц». Журнал биологической химии. 258 (17): 10495–10502. PMID 6136509.
  6. ^ а б Киселев, О.Г .; Даунс, М.А. (2003). «Родопсин контролирует конформационный переключатель на субъединице трансдуцина гамма». Структура. 11 (4): 367–373. Дои:10.1016 / s0969-2126 (03) 00045-5. PMID 12679015.
  7. ^ а б Hingorani, V. N .; Хо, Ю. К. (1987). «Структурная модель альфа-субъединицы трансдуцина. Значение его роли в качестве молекулярного переключателя в механизме передачи зрительного сигнала». Письма FEBS. 220 (1): 15–22. Дои:10.1016/0014-5793(87)80867-0. PMID 3038611.
  8. ^ а б Clack, J. W .; Springmeyer, M. L .; Clark, C.R .; Витцманн, Ф.А. (2006). «Стехиометрия субъединицы трансдуцина и распределение клеток в наружных сегментах палочек». Cell Biology International. 30 (10): 829–835. Дои:10.1016 / j.cellbi.2006.06.007. PMID 16895762.
  9. ^ Bourne, H.R .; Иири, Т .; Фарфель, З. (1998). «Заболевания, связанные с G-белками, представляют собой модель для включения». Природа. 394 (6688): 35–38. Дои:10.1038/27831. PMID 9665125.
  10. ^ Rondard, P .; Иири, Т .; Srinivasan, S .; Meng, E .; Fujita, T .; Борн, Х. Р. (2001). «Мутантная α-субъединица G-белка, активируемая Gβγ: модель активации рецептора?». Труды Национальной академии наук. 98 (11): 6150–6155. Дои:10.1073 / pnas.101136198. ЧВК 33437. PMID 11344266.
  11. ^ Deterre, P .; Bigay, J .; Forquet, F .; Роберт, М .; Чабре, М. (1988). «CGMP фосфодиэстераза палочек сетчатки регулируется двумя ингибирующими субъединицами». Труды Национальной академии наук Соединенных Штатов Америки. 85 (8): 2424–2428. Дои:10.1073 / пнас.85.8.2424. ЧВК 280009. PMID 2833739.
  12. ^ а б c Kroll, S .; Phillips, W. J .; Черионе, Р. А. (1989). «Регулирование циклической фосфодиэстеразы GMP с помощью GDP-связанной формы альфа-субъединицы трансдуцина». Журнал биологической химии. 264 (8): 4490–4497. PMID 2538446.
  13. ^ а б c d Кутузов, М .; Пфистер, К. (1994). «Активация ретинальной цГМФ-специфической фосфодиэстеразы нагруженной GDP альфа-субъединицей трансдуцина». Европейский журнал биохимии / FEBS. 220 (3): 963–971. Дои:10.1111 / j.1432-1033.1994.tb18700.x. PMID 8143750.
  14. ^ Bennett, N .; Клерк, А. (1989). «Активация цГМФ фосфодиэстеразы в стержнях сетчатки: механизм взаимодействия с GTP-связывающим белком (трансдуцином)». Биохимия. 28 (18): 7418–7424. Дои:10.1021 / bi00444a040. PMID 2554970.

внешняя ссылка