WikiDer > КПП шпинделя

Spindle checkpoint
Этапы клеточного цикла. Контрольная точка шпинделя происходит во время фазы М.
Схема, показывающая развитие клеточного цикла между прометафазой и анафазой.

В КПП шпинделя, также известный как переход от метафазы к анафазе, то КПП шпиндельного узла (SAC), или митотическая контрольная точка, это контрольная точка клеточного цикла в течение митоз или же мейоз что предотвращает отделение дублированных хромосомы (анафаза), пока каждая хромосома не будет правильно прикреплена к шпиндель. Чтобы добиться надлежащей сегрегации, два кинетохоры на сестре хроматиды должен быть прикреплен к противоположным полюсам шпинделя (биполярная ориентация).[1] Только такая схема привязанности гарантирует, что каждая дочь клетка получает одну копию хромосомы. Определяющей биохимической особенностью этой контрольной точки является стимуляция комплекс, способствующий анафазе к M-фаза комплексы циклин-ЦДК, что, в свою очередь, вызывает протеолитический разрушение циклины и белки, удерживающие сестринские хроматиды вместе.[2]

Обзор и важность

Начало метафазы характеризуется соединением микротрубочек с кинетохорами хромосом, а также выравниванием хромосом в середине клетки. Каждая хроматида имеет свою собственную кинетохору, и все микротрубочки, которые связаны с кинетохорами сестринских хроматид, исходят от противоположных полюсов клетки. Эти микротрубочки оказывают тянущее усилие на хромосомы к противоположным концам клеток, в то время как сцепление между сестринскими хроматидами противодействует этой силе.

При переходе от метафазы к анафазе это сцепление между сестринскими хроматидами растворяется, и разделенные хроматиды притягиваются к противоположным сторонам клетки микротрубочками веретена. Хроматиды далее разделяются физическим движением самих полюсов веретена. Преждевременная диссоциация хроматид может привести к расщеплению хромосом и анеуплоидии в дочерних клетках. Таким образом, задача контрольной точки метафазы состоит в том, чтобы предотвратить этот переход в анафазу, пока хромосомы не будут правильно прикреплены, прежде чем сестринские хроматиды разделятся.

Чтобы сохранить идентичность и правильное функционирование ячейки, необходимо поддерживать соответствующее количество хромосомы после каждого деление клеток. Ошибка при создании дочерних клеток с меньшим или большим числом хромосом, чем ожидалось (ситуация, называемая анеуплоидия), может в лучшем случае привести к гибели клеток или, в качестве альтернативы, может вызвать катастрофические последствия. фенотипический полученные результаты.[3][4] Примеры включают:

  • В раковых клетках анеуплоидия - частое событие, указывающее на то, что эти клетки представляют собой дефект в механизмах, участвующих в расщепление хромосом, а также в механизме, обеспечивающем правильное выполнение сегрегации.
  • В людях, Синдром Дауна появляется у детей, несущих в своих камерах одну дополнительную копию хромосома 21, в результате дефекта в сегрегация хромосом в течение мейоз в одном из прародителей. Этот дефект вызовет гамета (сперматозоид или ооцит) с дополнительной хромосомой 21. После оплодотворение, эта гамета сгенерирует эмбрион с тремя копиями 21 хромосомы.

Обнаружение КПП шпиндельного узла (SAC)

Изображение под микроскопом, показывающее две клетки с их хромосомы окрашен DAPI, один в анафазе (слева), а другой в метафазе (справа), при этом большая часть его хромосом находится в метафазной пластинке, а некоторые хромосомы все еще не выровнены.

Циркле (в 1970 г.) был одним из первых исследователей, заметивших, что, когда только одна хромосома задерживается, чтобы достичь метафазной пластинки, наступление анафазы откладывается на несколько минут после ее прибытия.[5] Это наблюдение, вместе с аналогичными наблюдениями, предполагает, что существует механизм контроля при переходе от метафазы к анафазе. Использование таких наркотиков, как нокодазол и колхицинмитотическое веретено разбирается, и клеточный цикл блокируется при переходе от метафазы к анафазе. Использование этих препаратов (см. Обзор Ридера и Палаццо 1992 г.[6]) предполагаемый механизм управления получил название Контрольная точка сборки шпинделя (САК). С тех пор этот регуляторный механизм интенсивно изучается.[7]

Используя различные типы генетических исследований, было установлено, что различные виды дефектов способны активировать SAC: деполимеризация веретена,[8][9] наличие дицентрических хромосом (с двумя центромерами),[10] аберрантно расщепляющиеся центромеры,[11] дефекты корпусов полюсов шпинделя в С. cerevisiae,[12] дефекты кинетохорных белков,[13] мутации центромерной ДНК[14] или дефекты в молекулярные моторы активен во время митоза.[8] Резюме этих наблюдений можно найти в статье Хардвика и соавторов в 1999 году.[15]

Используя собственные наблюдения, Циркле[5] был первым, кто предположил, что «какое-то (…) вещество, необходимое для перехода клетки в анафазу, появляется через несколько минут после C (момента прибытия последней хромосомы к метафазной пластинке) или после резкого изменения в цитоплазматический состояние, сразу на C или сразу после C ", предполагая, что эта функция расположена на кинетохорах, не связанных с митотическим веретеном. Макинтош расширил это предложение, предположив, что один фермент, чувствительный к напряжению, расположенный в центромерах, производит ингибитор начала анафазы, когда две сестринские кинетохоры не находятся под биполярным напряжением.[16] Действительно, доступные данные предполагают, что сигнал «ждать, чтобы войти в анафазу» вырабатывается в основном на незакрепленных кинетохорах или вблизи них.[17] Однако первичным событием, связанным с прикреплением кинетохоры к веретену, которое способно инактивировать тормозной сигнал и высвобождать остановку метафазы, может быть либо приобретение микротрубочек кинетохорой (как было предложено Ридером и соавторами в 1995 г.).[17]), или натяжение, стабилизирующее прикрепление микротрубочек к кинетохорам (как предполагают эксперименты, проведенные в лаборатории Никласа).[18]). Последующие исследования клеток, содержащих два независимых митотических веретена в единственной цитоплазма показали, что ингибитор перехода из метафазы в анафазу генерируется неприсоединенными кинетохорами и не диффундирует свободно в цитоплазме.[19] Тем не менее, в том же исследовании было показано, что как только переход от метафазы к анафазе инициируется в одной части клетки, эта информация распространяется по всей длине клетки. цитоплазма, и может преодолеть сигнал «ждать, чтобы войти в анафазу», связанный со вторым веретеном, содержащим неприсоединенные кинетохоры.

Справочная информация о дупликации, сплоченности и сегрегации сестринских хроматид

Деление клетки: дублирование материала и распределение дочерним клеткам

Три типа деления клеток: бинарное деление (происходит в прокариоты), митоз и мейоз (происходит в эукариоты).

Когда клетки готовы делиться, потому что размер клеток достаточно велик или потому что они получают соответствующий стимул,[20] они активируют механизм вступления в клеточный цикл, и они дублируют большинство органелл во время фазы S (синтеза), включая их центросома. Следовательно, когда процесс деления клеток завершится, каждая дочерняя клетка получит полный набор органелл. В то же время во время фазы S все клетки должны дублировать свои ДНК очень точно, процесс, названный Репликация ДНК. После завершения репликации ДНК у эукариот молекула ДНК уплотняется и конденсируется с образованием митотической хромосомы, каждая из которых состоит из двух сестер хроматиды, которые остаются вместе благодаря созданию сплоченность между ними; каждая хроматида представляет собой полную молекулу ДНК, присоединенную через микротрубочки к одной из двух центросом делящейся клетки, расположенной на противоположных полюсах клетки. Структура, образованная центросомами и микротрубочками, называется митотическое веретено, благодаря своей характерной форме, удерживает хромосомы между двумя центросомами. Обе сестринские хроматиды остаются вместе до тех пор, пока анафаза; в этот момент они отделяются друг от друга и движутся к центросоме, к которой они прикреплены. Таким образом, когда две дочерние клетки отделяются в конце процесса деления, каждая из них получит полный набор хроматид. Механизм, ответственный за правильное распределение сестринских хроматид во время деления клетки, назван сегрегация хромосом.

Чтобы гарантировать, что сегрегация хромосом происходит правильно, клетки разработали точный и сложный механизм. В первую очередь, клетки должны согласовывать центросома дупликация с репликацией ДНК, и нарушение этой координации будет генерировать монополярные или мультиполярные митотические веретена, которые обычно вызывают аномальную сегрегацию хромосом,[21] потому что в этом случае распределение хромосом не будет сбалансированным.


Митоз: закрепление хромосом на веретене и сегрегация хромосом

Смотрите также: кинетохора
Изображение клетки человека во время митоз; микротрубочки показаны зеленым цветом (образуют митотическое веретено), хромосомы на экваторе веретена синего цвета, а кинетохоры - красным.

Во время фазы S центросома начинает дублировать. В самом начале митоза оба центриоли достигают максимальной длины, привлекают дополнительный материал, и их способность образовывать ядра микротрубочек увеличивается. По мере развития митоза обе центросомы разделяются, образуя митотическое веретено.[22] Таким образом, митотическое веретено имеет два полюса, исходящие из микротрубочек. Микротрубочки (МТ) представляют собой длинные белковые филаменты с асимметричными концами: один конец, обозначенный «минус» (-), относительно стабильный и близкий к центросоме, и конец, названный «положительным» (+) концом, с чередующимися фазами роста и ретракция, исследуя центр клетки, ища хромосомы. Каждый хроматида имеет особый регион, названный центромера, на вершине которого собрана протеиновая структура, называемая кинетохора, который способен стабилизировать плюс-конец микротрубочки. Следовательно, если случайно микротрубочка, исследующая центр клетки, встречает кинетохору, может случиться так, что кинетохора захватит ее, так что хромосома прикрепится к веретену через кинетохору одной из сестринских хроматид. Хромосома играет активную роль в прикреплении кинетохор к веретену. С хроматином связан фактор обмена рангуаниновых нуклеотидов (GEF), который стимулирует цитозольный Ran около хромосомы для связывания GTP вместо GDP. Активированная GTP-связанная форма Ran высвобождает белки, стабилизирующие микротрубочки, такие как TPX2, из белковых комплексов в цитозоле, что вызывает зародышеобразование и полимеризацию микротрубочек вокруг хромосом.[23] Эти микротрубочки, происходящие из кинетохор, вместе с моторными белками кинезина во внешней кинетохоре, облегчают взаимодействия с боковой поверхностью микротрубочек, образованных из полюсов веретена. Однако эти боковые крепления нестабильны и должны быть преобразованы в концевые крепления. Преобразование латерального прикрепления в концевое позволяет преобразовать рост и сокращение плюс-концов микротрубочек в силы, которые толкают и тянут хромосомы для достижения правильной би-ориентации. Так как случается, что сестринские хроматиды прикрепляются друг к другу, и обе кинетохоры располагаются спина к спине на обеих хроматидах, когда одна кинетохора присоединяется к одной центросоме, сестринская кинетохора оказывается экспонированной центросоме, расположенной на противоположном полюсе; по этой причине в большинстве случаев вторая кинетохора связывается с центросомой на противоположном полюсе через свои микротрубочки,[24] так что хромосомы становятся «двунаправленными», фундаментальная конфигурация (также называемая амфителический), чтобы гарантировать, что сегрегация хромосом будет происходить правильно, когда клетка будет делиться.[25][26] Иногда один из двух сестринских кинетохор может одновременно присоединяться к МТ, генерируемым обоими полюсами, конфигурация, названная меротелический, который не обнаруживается контрольной точкой веретена, но может генерировать отстающие хромосомы во время анафазы и, следовательно, анеуплоидии. Меротелическая ориентация (характеризующаяся отсутствием напряжения между сестринскими кинетохорами) часто встречается в начале митоза, но белок Aurora B (киназа, законсервированная от дрожжей до позвоночных) обнаруживает и устраняет этот тип закрепления.[27] (Примечание: Aurora B часто сверхэкспрессируется в различных типах опухолей и в настоящее время является мишенью для разработки противоопухолевых препаратов.[28])

Сцепление сестринских хроматид во время митоза

Cohesin: белки SMC

Как уже было отмечено ранее, сестринские хроматиды остаются связанными с S фазы (когда ДНК реплицируется с образованием двух идентичных копий, двух хроматид) до анафазы. В этот момент две сестринские хроматиды разделяются и перемещаются к противоположным полюсам делящейся клетки. Генетические и биохимические исследования дрожжей и яичных экстрактов в Xenopus laevis идентифицировали полипротеиновый комплекс как важный игрок в слипании сестринских хроматид (см. обзор Хирано в 2000 г.)[29]). Этот комплекс известен как когезин сложный и в Saccharomyces cerevisiae состоит по крайней мере из четырех субъединиц: Smc1p, Smc3p, Scc1p (или Mcd1p) и Scc3p. И Smc1p, и Smc3p принадлежат к семейству белков для Структурное поддержание хромосом (SMC), которые составляют группу хромосомных АТФазы высококонсервативны и образуют гетеродимер (Smc1p / Smc3p). Scc1p является гомологом в S.cerevisiae Rad21, впервые идентифицированный как белок, участвующий в Ремонт ДНК в С. Помбе. Эти четыре белка необходимы дрожжам, и мутация в любом из них приведет к преждевременному разделению сестринских хроматид. У дрожжей когезин связывается с преимущественными участками вдоль хромосомных плеч и очень распространен вблизи центромер, как было показано в исследовании с использованием иммунопреципитации хроматина.[30]

Роль гетерохроматина

Классические цитологические наблюдения показали, что сестринские хроматиды сильнее прикреплены к гетерохроматический регионы,[31] и это указывает на то, что особая структура или состав гетерохроматина может способствовать рекрутированию cohesin.[32] Фактически, было показано, что Swi6 (гомолог HP-1 в С. Помбе) связывается с метилированными Lys 9 из гистон H3 и способствует связыванию когезина с центромерными повторами в С. Помбе.[33][34] Более поздние исследования показывают, что РНКи механизм регулирует образование гетерохроматина, который, в свою очередь, рекрутирует когезин в эту область, как в С. Помбе[35] и в клетках позвоночных.[36] Однако должны быть другие механизмы, помимо гетерохроматина, для обеспечения повышенной когезии центромер, потому что С. cerevisiae отсутствует гетерохроматин рядом с центромерами, но присутствие функциональной центромеры индуцирует усиление ассоциации cohesin в смежной области, охватывающей 20-50 kb.[37]

В этом направлении Orc2 (один белок включен в комплекс распознавания происхождения, ORC, участвующий в инициации Репликация ДНК в течение S фаза) также располагается на кинетохорах во время митоза в клетках человека;[38] в соответствии с этой локализацией, некоторые наблюдения показывают, что Orc2 у дрожжей участвует в слипании сестринских хроматид, и его удаление индуцирует активацию SAC.[39] Также было замечено, что другие компоненты комплекса ORC (такие как orc5 в С. Помбе) вовлечены в сплоченность.[40] Однако молекулярный путь с участием белков ORC кажется дополнительным к пути когезинов и в основном неизвестен.

Функция сплоченности и ее растворение
Схема, показывающая сцепление сестринских хроматид, прикрепленных к веретену микротрубочки через их кинетохоры

Центромерная когезия противостоит силам, прилагаемым микротрубочками веретена к полюсам, которые генерируют напряжение между сестринскими кинетохорами. В свою очередь, это натяжение стабилизирует прикрепленную микротрубочку-кинетохору через механизм, в котором задействован белок. Аврора Б (обзор по этому вопросу: Hauf and Watanabe 2004 г.[41]).

Действительно, снижение клеточных уровней когезина приводит к преждевременному разделению сестринских хроматид, а также к дефектам в хромосомной конгрессии в метафазной пластинке и делокализации белков в метафазной пластинке. хромосомный пассажирский комплекс, который содержит белок Aurora B.[42][43]Предлагаемая структура когезинового комплекса предполагает, что этот комплекс непосредственно соединяет обе сестринские хроматиды.[44] В этой предлагаемой структуре компоненты SMC когезина играют структурную роль, так что гетеродимер SMC может функционировать как ДНК-связывающий белок, конформация которого регулируется АТФ.[45] Однако Scc1p и Scc3p будут играть регулирующую роль.[29]

В С. cerevisiae, Pds1p (также известный как Securin) регулирует сцепление сестринских хроматид, поскольку связывает и ингибирует протеазу Esp1p (сепарин или же отделить). Когда запускается начало анафазы, комплекс, способствующий анафазе (APC / C или Cyclosome) разрушает секурин. APC / C представляет собой кольцевую убиквитинлигазу E3, которая рекрутирует E2-убиквитин-конъюгированный фермент, нагруженный убиквитином. Секурин распознается, только если Cdc20, субъединица-активатор, связана с ядром APC / C. Когда секурин, Cdc20 и E2 все связаны с APC / C, E2 убиквитинирует секурин и избирательно разрушает его. Распад секурина высвобождает протеазу Esp1p / separase, которая разрушает кольца когезина, которые связывают две сестринские хроматиды, тем самым способствуя разделению сестринских хроматид.[46] Также было показано, что Polo / Cdc5 киназа фосфорилаты серин остатки рядом с сайтом разрезания для Scc1, и это фосфорилирование будет способствовать активности разрезания.[47]

Хотя этот механизм сохраняется в процессе эволюции,[48][49] У позвоночных большинство молекул когезина высвобождается в профазе, независимо от присутствия APC / C, в процессе, зависящем от Polo-подобного 1 (PLK1) и Аврора Б.[50] Тем не менее было показано, что небольшое количество Scc1 остается ассоциированным с центромерами в клетках человека до метафазы, и такое же количество сокращается в анафазе, когда оно исчезает из центромер.[51] С другой стороны, некоторые эксперименты показывают, что сцепление сестринских хроматид в плечах постепенно теряется после того, как сестринские центромеры разделены, и сестринские хроматиды перемещаются к противоположным полюсам клетки.[52][53]

Согласно некоторым наблюдениям, часть когезинов в хромосомных плечах и центромерных когезинов защищена белком Шугошин (Sgo1), избегая их высвобождения во время профазы.[54][55] Чтобы быть способным функционировать как защитник для центромерного слипания, Sgo1 должен быть инактивирован в начале анафазы, так же как и Pds1p. Фактически, и Pds1p, и Sgo1 являются субстратами APC / C у позвоночных.[56]

Обзор контрольных точек шпиндельной сборки

Контрольная точка шпиндельного узла (SAC) - это активный сигнал, вызванный неправильно прикрепленным кинетохоры, который сохраняется во всех эукариоты. SAC останавливает клеточный цикл, отрицательно регулируя CDC20, тем самым предотвращая активацию активности полиубиквитилирования комплекс, способствующий анафазе (БТР). Белки, ответственные за сигнал SAC, составляют комплекс митотических контрольных точек (MCC), который включает белки SAC, MAD2/MAD3 (недостаточность митотической остановки), BUB3 (росткование не ингибируется бензимидазолом), и CDC20.[57] Другие белки, участвующие в SAC, включают: MAD1, BUB1, MPS1, и Аврора Б. Для высших эукариот дополнительные регуляторы SAC включают компоненты Комплекс ROD-ZW10, стр.31комета, MAPK, CDK1-циклин-B, NEK2, и PLK1.[58]

Схема, представляющая различные компоненты контрольной точки веретена у позвоночных.

Активация контрольной точки

SAC отслеживает взаимодействие между неправильно подключенными кинетохорами и шпинделем. микротрубочкии сохраняется до тех пор, пока кинетохоры не будут правильно прикреплены к веретену. В течение прометафаза, Белки CDC20 и SAC концентрируются на кинетохорах перед прикреплением к узлу веретена. Эти белки поддерживают SAC активированным до тех пор, пока они не будут удалены и не будет выполнено правильное прикрепление кинетохор к микротрубочкам. Даже одна неприсоединенная кинетохора может поддерживать контрольную точку шпинделя.[57] После присоединения плюс-концов микротрубочек и образования микротрубочек кинетохор, MAD1 и MAD2 истощаются из сборки кинетохор. Другой регулятор активации контрольных точек - натяжение кинетохор. Когда сестринские кинетохоры правильно прикреплены к противоположным полюсам веретена, силы в митотическом веретене создают напряжение в кинетохорах. Bi-ориентированные сестринские кинетохоры стабилизируют сборку кинетохора-микротрубочка, тогда как слабое натяжение оказывает дестабилизирующее действие. В ответ на неправильные прикрепления кинетохор, такие как синтетический прикрепление, когда обе кинетохоры прикрепляются к одному полюсу шпинделя, создаваемое слабое натяжение дестабилизирует неправильное прикрепление и позволяет кинетохоре правильно повторно прикрепляться к телу веретена. Во время этого процесса кинетохоры, которые прикреплены к митотическому веретену, но не находятся под напряжением, запускают контрольную точку веретена. Киназа Aurora-B / Ipl1 группы хромосомный пассажирский комплекс действует как датчик натяжения в неправильных прикреплениях кинетохор. Он обнаруживает и дестабилизирует неправильные прикрепления за счет контроля KINI кинезина MCAK, разделяющего микротрубочки, DASH комплекс, а Ndc80 / Hec1 сложный[59] на границе микротрубочка-кинетохора.[58] Киназа Aurora-B / Ipl1 также имеет решающее значение для коррекции меротелический насадки, где одна кинетохора одновременно прикрепляется к обоим полюсам веретена. Меротелические прикрепления создают достаточное натяжение и не обнаруживаются SAC, и без коррекции могут привести к неправильной сегрегации хромосом из-за низкой скорости миграции хроматид. Хотя прикрепление микротрубочек независимо необходимо для активации SAC, неясно, является ли натяжение независимым регулятором SAC, хотя ясно, что с натяжением возникают разные регуляторные поведения.

После активации контрольная точка шпинделя блокируется. анафаза вход, запрещая комплекс, способствующий анафазе через регуляцию активности комплекса митотических контрольных точек. Механизм ингибирования APC комплексом митотических контрольных точек плохо изучен, хотя предполагается, что MCC связывается с APC как псевдоподложка с использованием КЕН-бокс мотив в BUBR1. В то время как этот комплекс митотических контрольных точек активируется, центромера белок CENP-E активирует BUBR1, который также блокирует анафазу.[58]

Формирование комплекса митотических контрольных точек

Комплекс митотических контрольных точек состоит из BUB3 вместе с MAD2 и MAD3, привязанными к Cdc20. MAD2 и MAD3 имеют разные сайты связывания на CDC20 и действуют синергетически, ингибируя APC / C. Комплекс MAD3 состоит из BUB3, который связывается с Mad3 и BUB1B сквозь короткий линейный мотив известный как мотив GLEBS. Точный порядок вложений, который должен произойти для формирования MCC, остается неизвестным. Возможно, что Mad2-Cdc20 образуют комплекс, в то время как BUBR1-BUB3-Cdc20 образуют другой комплекс, и эти два субкомплекса, следовательно, объединяются с образованием комплекса митотических контрольных точек.[57] В клетках человека связывание BUBR1 с CDC20 требует предварительного связывания MAD2 с CDC20, поэтому возможно, что субкомплекс MAD2-CDC20 действует как инициатор образования MCC. Истощение BUBR1 приводит только к умеренному снижению уровней Mad2-Cdc20, тогда как Mad2 необходим для связывания BubR1-Bub3 с Cdc20. Тем не менее, BUBR1 по-прежнему требуется для активации КПП.[58]

Механизм образования MCC неясен и существуют конкурирующие теории как кинетохор-зависимого, так и кинетохор-независимого образования. В поддержку теории, независимой от кинетохоров, МКЦ обнаруживается в С. cerevisiae клетки, в которых основные белки сборки кинетокор были мутированы, и клетки, в которых SAC был деактивирован, что предполагает, что MCC может собираться во время митоза без локализации кинетохор. В одной модели несвязанные кинетохоры прометафазы могут «сенсибилизировать» APC к ингибированию MCC путем рекрутирования APC на кинетохоры через функционирующий SAC. Более того, истощение различных белков SAC показало, что истощение MAD2 и BUBR1 влияет на время митоза независимо от кинетохор, в то время как истощение других белков SAC приводит к дисфункциональному SAC без изменения продолжительности митоза. Таким образом, возможно, что SAC функционирует через двухступенчатый таймер, где MAD2 и BUBR1 контролируют продолжительность митоза на первой стадии, которая может быть увеличена на второй стадии, если есть несвязанные кинетохоры, а также другие белки SAC.[58] Однако есть ряд доказательств, которые не в пользу кинетохор-независимой сборки. MCC еще не найден во время межфазный, а МКЦ не образуется из составляющих X. laevis мейоз II экстракты без добавления спермы ядер и нокодазол чтобы предотвратить сборку шпинделя.

Ведущей моделью образования MCC является "MAD2-template model", которая зависит от динамики кинетохор MAD2 для создания MCC. MAD1 локализуется на незакрепленных кинетохорах, при этом прочно связываясь с MAD2. Локализация MAD2 и BubR1 на кинетохоре также может зависеть от Киназа Aurora B.[60] Клетки, лишенные Aurora B, не могут задерживаться в метафазе, даже если хромосомы не прикреплены к микротрубочкам.[61] Неприкрепленные кинетохоры сначала связываются с MAD1-C-MAD2-p31комета комплекс и выпускает p31комета через неизвестные механизмы. Полученный комплекс MAD-C-MAD2 рекрутирует открытый конформер Mad2 (O-Mad2) на кинетохоры. Этот O-Mad2 меняет свою конформацию на закрытый Mad2 (C-Mad2) и связывает Mad1. Этот комплекс Mad1 / C-Mad2 отвечает за привлечение большего количества O-Mad2 к кинетохорам, что меняет свою конформацию на C-Mad2 и связывает Cdc20 в реакции автоамплификации. Поскольку MAD1 и CDC20 оба содержат сходный MAD2-связывающий мотив, пустая конформация O-MAD2 изменяется на C-MAD2 при связывании с CDC20. Этот петля положительной обратной связи отрицательно регулируется p31комета, который конкурентно связывается с C-MAD2, связанным либо с MAD1, либо с CDC20, и снижает дальнейшее связывание O-MAD2 с C-MAD2. Могут существовать и другие механизмы контроля, учитывая, что p31комета отсутствует у низших эукариот. Таким образом, номенклатура «шаблонной модели» является производной от процесса, в котором MAD1-C-MAD2 действует как шаблон для образования копий C-MAD2-CDC20. Эта секвестрация Cdc20 необходима для поддержания контрольной точки шпинделя.[57]

Деактивация КПП

Существует несколько механизмов для деактивации SAC после правильной двунаправленной ориентации. сестринские хроматиды. При прикреплении микротрубочки к кинетохоре механизм стриппинга через динеин-динеиновый моторный комплекс транспортирует белки контрольной точки веретена от кинетохор.[58] Обрезанные белки, которые включают MAD1, MAD2, MPS1 и CENP-F, затем перераспределяются в полюса шпинделя. Процесс зачистки сильно зависит от неповрежденной структуры микротрубочек, а также от подвижности динеина по микротрубочкам.А также функционирует как регулятор цепи положительной обратной связи C-MAD2, p31комета также может действовать как деактиватор SAC. Неприкрепленные кинетохоры временно инактивируют p31комета, но прикрепление реактивирует белок и ингибирует активацию MAD2, возможно, путем ингибирующего фосфорилирования. Другой возможный механизм инактивации SAC является результатом энергозависимой диссоциации комплекса MAD2-CDC20 посредством недеструктивного убиквитилирования CDC20. И наоборот, деубиквитилирующий фермент Protein требуется для поддержания SAC. Таким образом, неприсоединенные кинетохоры поддерживают контрольную точку, непрерывно воссоздавая субкомплекс MAD2-CDC20 из его компонентов. SAC также может быть деактивирован активацией APC, вызванной протеолиз. Поскольку SAC не реактивируется за счет потери сцепления сестринских хроматид во время анафазы, протеолиз циклина B и инактивация киназы CDK1-cyclin-B также ингибирует активность SAC. Деградация MPS1 во время анафазы предотвращает реактивацию SAC после удаления когезии сестринских хроматид. После деактивации контрольной точки и во время нормальной анафазы клеточного цикла комплекс, способствующий анафазе, активируется за счет снижения активности MCC. Когда это происходит, ферментный комплекс полиубиквитинаты ингибитор анафазы Securin. Убиквитинирование и разрушение секурина в конце метафазы высвобождает активную протеазу, называемую сепаразой. Разделение расщепляет молекулы когезии, которые удерживают сестринские хроматиды вместе, чтобы активировать анафазу.[23]

Новая модель деактивации SAC в С. cerevisiae: механический переключатель

Новый механизм был предложен для объяснения того, как прикрепление концевых микротрубочек к кинетохорам может нарушать специфические этапы передачи сигналов SAC. В неприсоединенной кинетохоре первым шагом в образовании MCC является фосфорилирование Spc105 с помощью киназы Mps1. Затем фосфорилированный Spc105 способен рекрутировать сигнальные белки Bub1 и 3, расположенные ниже по течению; Безумные 1,2 и 3; и Cdc20. Ассоциация с Mad1 на неприсоединенных кинетохорах заставляет Mad2 претерпевать конформационное изменение, которое превращает его из открытой формы (O-Mad2) в закрытую форму (C-Mad2). C-Mad2, связанный с Mad1, затем димеризуется со вторым O-Mad2. и катализирует его замыкание около Cdc20. Этот комплекс C-Mad2 и Cdc20, MCC, оставляет Mad1 и C-Mad2 на кинетохоре с образованием другого MCC. Каждая MCC изолирует две молекулы Cdc20, чтобы предотвратить их взаимодействие с APC / C, тем самым поддерживая SAC.[23] Фосфорилирование Mps1 Spc105 необходимо и достаточно для инициирования пути передачи сигналов SAC, но этот этап может происходить только в отсутствие прикрепления микротрубочек к кинетохоре. Показано, что эндогенный Mps1 ассоциируется с доменом гомологии кальпонина (CH) Ndc80, который расположен во внешней области кинетохоры, удаленной от хромосомы. Хотя Mps1 состыкован во внешней кинетохоре, он все еще способен локализоваться внутри внутренней кинетохоры и фосфорилировать Spc105 из-за гибких шарнирных областей на Ndc80. Однако модель механического переключателя предполагает, что прикрепление конца микротрубочки к кинетохоре дезактивирует SAC посредством двух механизмов. Присутствие прикрепленной микротрубочки увеличивает расстояние между CH доменом Ndc80 и Spc105. Кроме того, Dam1 / DASH, большой комплекс, состоящий из 160 белков, который образует кольцо вокруг прикрепленной микротрубочки, действует как барьер между двумя белками. Разделение предотвращает взаимодействия между Mps1 и Spc105 и, таким образом, ингибирует путь передачи сигналов SAC.[62]

Важно отметить, что эта модель не применима к регуляции SAC у организмов более высокого порядка, включая животных. Основным аспектом механического механизма переключения является то, что в С. cerevisiae структура кинетохоры позволяет прикрепить только одну микротрубочку. Кинетохоры у животных, с другой стороны, представляют собой гораздо более сложные сетчатые структуры, содержащие сайты связывания для множества микротрубочек.[63] Присоединение микротрубочек ко всем сайтам связывания кинетохор не является необходимым для дезактивации SAC и перехода к анафазе. Следовательно, состояния прикрепления к микротрубочкам и состояния без прикрепления к микротрубочкам сосуществуют в кинетохоре животных, в то время как SAC ингибируется. Эта модель не включает барьер, который помешал бы Mps1, ассоциированному с прикрепленной кинетохорой, фосфорилировать Spc105 в соседней неприсоединенной кинетохоре. Кроме того, дрожжевой комплекс Dam1 / DASH не присутствует в клетках животных.

Дефекты контрольной точки шпинделя и рак

Когда контрольные точки шпинделя не работают, это может привести к неправильной сегрегации хромосом, анеуплоидия и даже туморогенез.[58] Трансформация происходит и ускоряется, когда нарушается поддержание целостности генома, особенно на общем уровне целых хромосом или их больших частей. Фактически, анеуплоидия является наиболее частой характеристикой солидных опухолей человека, и, таким образом, контрольная точка сборки веретена может рассматриваться как возможная мишень для противоопухолевой терапии.[64] Это очень недооцененный факт, поскольку мутации в определенных генах, известных как онкогены или же подавитель опухолей в первую очередь считаются причиной генетической нестабильности и туморогенеза. Обычно различные контрольные точки в клеточном цикле заботятся о целостности генома с помощью высококонсервативных избыточных механизмов, которые важны для поддержания клеточного гомеостаза и предотвращения туморогенеза. Некоторые белки контрольной точки сборки веретена действуют как положительные, так и отрицательные регуляторы, чтобы гарантировать правильную сегрегацию хромосом в каждом клеточном цикле, предотвращая хромосомную нестабильность (CIN), также известную как нестабильность генома.

Цитометрический анализ злокачественной карциномы с анеуплоидией

Геномная целостность сейчас оценивается на нескольких уровнях, где некоторые опухоли демонстрируют нестабильность, проявляющуюся в виде замен, вставок и делеций оснований, в то время как большинство демонстрирует прирост или потерю целых хромосом.[65]

Из-за того, что изменения в митотических регуляторных белках могут привести к анеуплоидии, и это частое явление в рак,[66] Первоначально считалось, что эти гены могут мутировать в раковых тканях.[67]

Мутировавшие гены при раке

В некоторых случаях рака хорошо охарактеризованы гены, лежащие в основе дефектов, приводящих к трансформации. При гематологических раках, таких как множественная миелома, очень часто встречаются цитогенетические аномалии из-за внутренней природы разрывов ДНК, необходимых для перестройки гена иммуноглобулина. Однако дефекты в белках, таких как MAD2, которые функционируют преимущественно в SAC, также характерны для множественной миеломы.[68] Большинство солидных опухолей также преимущественно анеуплоидные. Для колоректального рака BUB1 и BUBR1 и амплификация STK15 являются ключевыми регуляторами, которые участвуют в нестабильности генома, приводящей к раку.[69] При раке груди генетическая форма, характеризующаяся геном BRCA-1, демонстрирует более высокий уровень геномной нестабильности, чем спорадические формы. Эксперименты показали, что BRCA-1 нулевые мыши имеют пониженную экспрессию белка контрольной точки ключевого веретена MAD2.[70] Для других видов рака требуется дополнительная работа по выявлению причин анеуплоидии.

Другие гены, традиционно не связанные с SAC при раке

Очевидно, что вариации физиологических уровней этих белков (таких как Mad2 или BubR1) связаны с анеуплоидией и туморогенезом, и это было продемонстрировано с использованием животные модели.[71][72] Однако недавние исследования показывают, что, по-видимому, происходит более сложный сценарий: анеуплоидия будет приводить к высокому уровню онкогенеза только тогда, когда изменения в уровнях определенных компонентов митотических контрольных точек (снижение или сверхэкспрессия) в тканях также вызывают другие дефекты, способные вызывать предрасполагают их к опухолям.[73]То есть дефекты, такие как увеличение повреждений ДНК, хромосомные перестройки и / или снижение частоты гибели клеток. Для некоторых компонентов митотических контрольных точек известно, что они участвуют в функциях вне митоза: ядерный импорт (Mad1), репрессия транскрипции (Bub3) и гибель клеток, ответ на повреждение ДНК, старение и мегакариопоэз для BubR1. Все это подтверждает вывод о том, что усиление туморогенеза связано с дефектами, отличными от одной только анеуплоидии.[73]

Связанные с раком мутации, затрагивающие известные гены контрольных точек, такие как BUB1 или BUBR1, на самом деле редки. Однако некоторые белки, участвующие в развитии рака, имеют пересечения с сетями сборки веретена. Ключевые опухолевые супрессоры, такие как p53 также играют роль в контрольной точке шпинделя. Отсутствие р53, наиболее часто мутируемого гена при раке человека, оказывает большое влияние на регуляторы контрольной точки клеточного цикла и, как было показано, действует на контрольную точку G1 в прошлом, но теперь, похоже, также важно для регулирования контрольной точки веретена.[74] Другой ключевой аспект рака - это подавление гибели клеток или апоптоз. Survivin, член семейства ингибиторов апоптоза (IAP), локализуется в пулах в микротрубочках митотического веретена рядом с центросомами и на кинетохорах метафазных хромосом. Сурвивин не только ингибирует апоптоз, способствуя онкогенезу, но и был вовлечен (с помощью экспериментальных мышей с нокаутом) в качестве важного регулятора хромосомной сегрегации и митоза поздней стадии, аналогичного его роли в более примитивных организмах.[75]

Другие аспекты контрольной точки сборки веретена, такие как прикрепление кинетохор, функция микротрубочек и сцепление сестринских хроматид, вероятно, также являются дефектными, чтобы вызывать анеуплоидию. Было обнаружено, что раковые клетки делятся в нескольких направлениях, избегая контрольной точки сборки веретена, что приводит к мультиполярным митозам.[76] Мультиполярный переход метафаза-анафаза происходит через неполный цикл сепарации, что приводит к частым событиям нерасхождения, которые усиливают анеуплоидию в раковых клетках.

Лечение рака SAC

Химическая структура паклитаксела или таксола, митотического ингибитора, используемого в химиотерапии рака

Достижения в этой области привели к разработке некоторых методов лечения дефектов сборки веретена. Старые методы лечения, такие как алкалоиды барвинка и таксаны, нацелены на микротрубочки, которые сопровождают формирование митотического веретена за счет нарушения динамики микротрубочек, которые задействуют SAC, останавливая клетку и в конечном итоге приводя к ее гибели.[77] таксол и Доцетаксел оба до сих пор используются для лечения рака груди, рака яичников и других типов эпителиального рака. Однако эти методы лечения часто характеризуются высокой частотой побочных эффектов и лекарственной устойчивостью.

Другие цели в сети регулирующих органов, которые влияют на SAC, также преследуются; сильный интерес сместился в сторону киназа сияния белки.[78] Ген киназы Аврора А при амплификации действует как онкоген, перекрывающий SAC, что приводит к аномальному инициированию анафазы и последующей анеуплоидии, а также к устойчивости к TAXOL.[79] Интересно, что низкомолекулярный ингибитор Aurora A продемонстрировал противоопухолевые эффекты на модели in vivo, что позволяет предположить, что это может быть хорошей мишенью для дальнейшей клинической разработки.[80] Аврора Б ингибиторы, которые также находятся в стадии клинической разработки, приводят к аномальной кинетохоре к прикреплению микротрубочек и отменяют митотическую контрольную точку.[78] Сурвивин также является привлекательной молекулярной мишенью для клинических терапевтических разработок, поскольку он действует как главный узел во множестве путей, одним из которых является формирование веретена и контроль контрольных точек.[81] Даже другие подходы включают рассмотрение ингибирования митотических моторных белков, таких как KSP. Эти ингибиторы, которые недавно вступили в клинические испытания, вызывают остановку митоза и, задействовав контрольную точку сборки веретена, вызывают апоптоз.[82][3]

Рекомендации

  1. ^ Santaguida S, Musacchio A (сентябрь 2009 г.). «Жизнь и чудеса кинетохор». Журнал EMBO. 28 (17): 2511–31. Дои:10.1038 / emboj.2009.173. ЧВК 2722247. PMID 19629042.
  2. ^ Морган, Дэвид Оуэн, 1958- (2007). Клеточный цикл: принципы контроля. Лондон: New Science Press. ISBN 978-0-19-920610-0. OCLC 70173205.CS1 maint: несколько имен: список авторов (связь)
  3. ^ а б Sinha, D .; Duijf, P.H.G .; Ханна, К. (2019), «Митотическое скольжение: старая сказка в новом повороте», Клеточный цикл, 18 (1): 7–15, Дои:10.1080/15384101.2018.1559557, ЧВК 6343733, PMID 30601084
  4. ^ Сантагуида С., Амон А. (август 2015 г.). «Краткосрочные и долгосрочные последствия неправильной сегрегации хромосом и анеуплоидии». Обзоры природы Молекулярная клеточная биология. 16 (8): 473–85. Дои:10.1038 / nrm4025. HDL:1721.1/117201. PMID 26204159.
  5. ^ а б Zirkle RE (март 1970). «Облучение ультрафиолетовыми лучами цитоплазмы клеток тритона: разрушение веретена, ложная анафаза и задержка истинной анафазы». Радиационные исследования. 41 (3): 516–37. Bibcode:1970RadR ... 41..516Z. Дои:10.2307/3572841. JSTOR 3572841. PMID 5438206.
  6. ^ Rieder CL, Palazzo RE (июль 1992 г.). «Колцемид и митотический цикл». Журнал клеточной науки. 102 (Pt 3) (3): 387–92. PMID 1506421.
  7. ^ Burke DJ, Stukenberg PT (апрель 2008 г.). «Связывание кинетохора-микротрубочки с контрольной точкой веретена». Клетка развития. 14 (4): 474–9. Дои:10.1016 / j.devcel.2008.03.015. ЧВК 2696048. PMID 18410725.
  8. ^ а б Ли Р., Мюррей А.В. (август 1991 г.). «Обратное управление митозом у почкующихся дрожжей». Клетка. 66 (3): 519–31. Дои:10.1016/0092-8674(81)90015-5. PMID 1651172.
  9. ^ Хойт М.А., Тотис Л., Робертс Б.Т. (август 1991 г.). «Гены S. cerevisiae, необходимые для остановки клеточного цикла в ответ на потерю функции микротрубочек». Клетка. 66 (3): 507–17. Дои:10.1016/0092-8674(81)90014-3. PMID 1651171.
  10. ^ Нефф М.В., Берк DJ (сентябрь 1992 г.). «Задержка клеточного цикла Saccharomyces cerevisiae, вызванная дицентрической хромосомой и зависящая от митотических контрольных точек». Молекулярная и клеточная биология. 12 (9): 3857–64. Дои:10.1128 / MCB.12.9.3857. ЧВК 360258. PMID 1324407.
  11. ^ Уэллс, WA, Мюррей AW (апрель 1996 г.). «Аберрантно разделяющиеся центромеры активируют контрольную точку сборки веретена у почкующихся дрожжей». Журнал клеточной биологии. 133 (1): 75–84. Дои:10.1083 / jcb.133.1.75. ЧВК 2120768. PMID 8601615.
  12. ^ Hardwick KG, Weiss E, Luca FC, Winey M, Murray AW (август 1996). «Активация контрольной точки сборки веретена почкующихся дрожжей без нарушения митотического веретена». Наука. 273 (5277): 953–6. Bibcode:1996Научный ... 273..953H. Дои:10.1126 / science.273.5277.953. PMID 8688079.
  13. ^ Ван И, Берк диджей (декабрь 1995 г.). «Гены контрольных точек, необходимые для задержки деления клеток в ответ на нокодазол, отвечают на нарушение функции кинетохор в дрожжах Saccharomyces cerevisiae». Молекулярная и клеточная биология. 15 (12): 6838–44. Дои:10.1128 / MCB.15.12.6838. ЧВК 230938. PMID 8524250.
  14. ^ Спенсер Ф., Хитер П. (октябрь 1992 г.). «Мутации центромерной ДНК вызывают задержку митоза у Saccharomyces cerevisiae». Труды Национальной академии наук Соединенных Штатов Америки. 89 (19): 8908–12. Bibcode:1992PNAS ... 89.8908S. Дои:10.1073 / пнас.89.19.8908. JSTOR 2360300. ЧВК 50033. PMID 1409584.
  15. ^ Хардвик К.Г., Ли Р., Мистрот С., Чен Р.Х., Данн П., Руднер А., Мюррей А.В. (июнь 1999 г.). «Повреждения многих различных компонентов веретена активируют контрольную точку веретена в почкующихся дрожжах Saccharomyces cerevisiae». Генетика. 152 (2): 509–18. ЧВК 1460633. PMID 10353895.
  16. ^ Макинтош-младший (1991). «Структурно-механический контроль митотической прогрессии». Симпозиумы Колд-Спринг-Харбор по количественной биологии. 56: 613–9. Дои:10.1101 / sqb.1991.056.01.070. PMID 1819511.
  17. ^ а б Ридер К.Л., Коул Р.В., Ходжаков А., Слудер Г. (август 1995 г.). «Контрольная точка, задерживающая анафазу в ответ на моноориентацию хромосомы, опосредована ингибирующим сигналом, производимым неприсоединенными кинетохорами». Журнал клеточной биологии. 130 (4): 941–8. Дои:10.1083 / jcb.130.4.941. ЧВК 2199954. PMID 7642709.
  18. ^ Ли Х, Никлас РБ (март 1997 г.). «Чувствительное к натяжению фосфорилирование кинетохор и контрольная точка распределения хромосом в сперматоцитах богомолов». Журнал клеточной науки. 110 (Pt 5) (5): 537–45. PMID 9092936.
  19. ^ Rieder CL, Khodjakov A, Paliulis LV, Fortier TM, Cole RW, Sluder G (май 1997 г.). «Митоз в соматических клетках позвоночных с двумя веретенами: значение для контрольной точки перехода метафаза / анафаза и расщепления». Труды Национальной академии наук Соединенных Штатов Америки. 94 (10): 5107–12. Bibcode:1997PNAS ... 94.5107R. Дои:10.1073 / пнас.94.10.5107. ЧВК 24639. PMID 9144198.
  20. ^ Конлон I, Рафф М. (январь 1999 г.). «Контроль размера в развитии животных». Клетка. 96 (2): 235–44. Дои:10.1016 / S0092-8674 (00) 80563-2. PMID 9988218.
  21. ^ Меральди П., Лукас Дж., Фрай А.М., Бартек Дж., Нигг Е.А. (июнь 1999 г.). «Дублирование центросом в соматических клетках млекопитающих требует E2F и Cdk2-циклина A». Природа клеточной биологии. 1 (2): 88–93. Дои:10.1038/10054. PMID 10559879.
  22. ^ Мэр Т., Меральди П., Стиргоф Ю. Д., Нигг Е. А., Фрай А. М. (июнь 1999 г.). «Протеинкиназы в контроле центросомного цикла». Письма FEBS. 452 (1–2): 92–5. Дои:10.1016 / S0014-5793 (99) 00534-7. PMID 10376685.
  23. ^ а б c Морган, Дэвид О. (06.09.2006). Клеточный цикл: принципы контроля (учебники по биологии) (1-е изд.). New Science Press, Ltd. ISBN 978-0-87893-508-6.
  24. ^ Никлас РБ (январь 1997 г.). «Как клетки получают правильные хромосомы». Наука. 275 (5300): 632–7. Дои:10.1126 / science.275.5300.632. PMID 9005842.
  25. ^ Loncarek J, Kisurina-Evgenieva O, Vinogradova T, Hergert P, La Terra S, Kapoor TM, Khodjakov A (ноябрь 2007 г.). «Геометрия центромеры, необходимая для поддержания безошибочного митоза, контролируется силами веретена». Природа. 450 (7170): 745–9. Bibcode:2007Натура.450..745л. Дои:10.1038 / природа06344. ЧВК 2586812. PMID 18046416.
  26. ^ Дьюар Х., Танака К., Нэсмит К., Танака Т.У. (март 2004 г.). «Напряжения между двумя кинетохорами достаточно для их би-ориентации на митотическом веретене». Природа. 428 (6978): 93–7. Bibcode:2004 Натур 428 ... 93D. Дои:10.1038 / природа02328. PMID 14961024.
  27. ^ Чимини Д., Ван X, Хирел CB, Лосось ED (сентябрь 2006 г.). «Киназа Aurora способствует обороту микротрубочек кинетохор для уменьшения ошибок сегрегации хромосом». Текущая биология. 16 (17): 1711–8. Дои:10.1016 / j.cub.2006.07.022. PMID 16950108.
  28. ^ Gautschi O, Heighway J, Mack PC, Purnell PR, Lara PN, Gandara DR (март 2008 г.). «Аврора киназы как мишени противораковых препаратов». Клинические исследования рака. 14 (6): 1639–48. Дои:10.1158 / 1078-0432.CCR-07-2179. PMID 18347165.
  29. ^ а б Хирано Т. (2000). «Сцепление, конденсация и разделение хромосом». Ежегодный обзор биохимии. 69: 115–44. Дои:10.1146 / annurev.biochem.69.1.115. PMID 10966455.
  30. ^ Танака К., Хао З., Кай М., Окаяма Х. (октябрь 2001 г.). «Установление и поддержание когезии сестринских хроматид у делящихся дрожжей с помощью уникального механизма». Журнал EMBO. 20 (20): 5779–90. Дои:10.1093 / emboj / 20.20.5779. ЧВК 125673. PMID 11598020.
  31. ^ Гонсалес К., Касаль Хименес Дж., Риполл П., Сункель К.Э. (январь 1991 г.). «Веретено необходимо для процесса разделения сестринских хроматид в нейробластах Drosophila». Экспериментальные исследования клеток. 192 (1): 10–5. Дои:10.1016 / 0014-4827 (91) 90150-С. PMID 1898588.
  32. ^ Лосада А., Хирано Т. (октябрь 2001 г.). «Формирование метафазной хромосомы: координация сплоченности и конденсации». BioEssays. 23 (10): 924–35. Дои:10.1002 / bies.1133. PMID 11598959.
  33. ^ Бернар П., Мор Дж. Ф., Партридж Дж. Ф., Дженир С., Джаверзат Дж. П., Оллшир, RC (декабрь 2001 г.). «Потребность гетерохроматина для сцепления центромер». Наука. 294 (5551): 2539–42. Bibcode:2001Научный ... 294.2539B. Дои:10.1126 / science.1064027. PMID 11598266.
  34. ^ Нонака Н., Китадзима Т., Йокобаяси С., Сяо Г., Ямамото М., Гревал С.И., Ватанабэ Ю. (январь 2002 г.). «Рекрутирование когезина в гетерохроматиновые области Swi6 / HP1 у делящихся дрожжей». Природа клеточной биологии. 4 (1): 89–93. Дои:10.1038 / ncb739. PMID 11780129.
  35. ^ Холл И.М., Нома К., Гревал С.И. (январь 2003 г.). «Механизм РНК-интерференции регулирует динамику хромосом во время митоза и мейоза у делящихся дрожжей». Труды Национальной академии наук Соединенных Штатов Америки. 100 (1): 193–8. Bibcode:2003ПНАС..100..193Н. Дои:10.1073 / pnas.232688099. ЧВК 140924. PMID 12509501.
  36. ^ Фукагава Т., Ногами М., Йошикава М., Икено М., Окадзаки Т., Таками Ю., Накаяма Т., Осимура М. (август 2004 г.). «Дайсер необходим для формирования структуры гетерохроматина в клетках позвоночных». Природа клеточной биологии. 6 (8): 784–91. Дои:10.1038 / ncb1155. PMID 15247924.
  37. ^ Weber SA, Gerton JL, Polancic JE, DeRisi JL, Koshland D, Megee PC (сентябрь 2004 г.). «Кинетохора является усилителем связывания перицентрического когезина». PLOS Биология. 2 (9): E260. Дои:10.1371 / journal.pbio.0020260. ЧВК 490027. PMID 15309047. открытый доступ
  38. ^ Прасант С.Г., Прасант К.В., Сиддики К., Спектор Д.Л., Стиллман Б. (июль 2004 г.). «Человек Orc2 локализуется в центросомах, центромерах и гетерохроматине во время наследования хромосом». Журнал EMBO. 23 (13): 2651–63. Дои:10.1038 / sj.emboj.7600255. ЧВК 449767. PMID 15215892.
  39. ^ Шимада К., Гассер С.М. (январь 2007 г.). «Комплекс распознавания происхождения функционирует в сцеплении сестринских хроматид у Saccharomyces cerevisiae». Клетка. 128 (1): 85–99. Дои:10.1016 / j.cell.2006.11.045. PMID 17218257.
  40. ^ Като Х., Мацунага Ф., Миядзаки С., Инь Л., Д'Урсо Дж., Танака К., Мураками Ю. (апрель 2008 г.). «Schizosaccharomyces pombe Orc5 играет множество ролей в поддержании стабильности генома на протяжении всего клеточного цикла». Клеточный цикл. 7 (8): 1085–96. Дои:10.4161 / cc.7.8.5710. PMID 18414064.
  41. ^ Hauf S, Watanabe Y (октябрь 2004 г.). «Ориентация кинетохор в митозе и мейозе». Клетка. 119 (3): 317–27. Дои:10.1016 / j.cell.2004.10.014. PMID 15507205.
  42. ^ Сонода Е., Мацусака Т., Моррисон С., Вагнарелли П., Хоши О., Ушики Т., Нодзима К., Фукагава Т., Вайзенеггер И.С., Петерс Дж. М., Эрншоу В. К., Такеда С. (декабрь 2001 г.). «Scc1 / Rad21 / Mcd1 необходим для слипания сестринских хроматид и функции кинетохор в клетках позвоночных». Клетка развития. 1 (6): 759–70. Дои:10.1016 / S1534-5807 (01) 00088-0. PMID 11740938.
  43. ^ Vass S, Cotterill S, Valdeolmillos AM, Barbero JL, Lin E, Warren WD, Heck MM (февраль 2003 г.). «Истощение Drad21 / Scc1 в клетках дрозофилы приводит к нестабильности когезинового комплекса и нарушению митотической прогрессии» (PDF). Текущая биология. 13 (3): 208–18. Дои:10.1016 / S0960-9822 (03) 00047-2. PMID 12573216.
  44. ^ Haering CH, Löwe J, Hochwagen A, Nasmyth K (апрель 2002 г.). «Молекулярная архитектура белков SMC и дрожжевого когезинового комплекса». Молекулярная клетка. 9 (4): 773–88. Дои:10.1016 / S1097-2765 (02) 00515-4. PMID 11983169.
  45. ^ Хирано Т. (январь 1999 г.). "SMC-опосредованная хромосомная механика: консервативная схема от бактерий до позвоночных?". Гены и развитие. 13 (1): 11–9. Дои:10.1101 / gad.13.1.11. PMID 9887095.
  46. ^ Ciosk R, Zachariae W., Michaelis C, Shevchenko A, Mann M, Nasmyth K (июнь 1998 г.). «Комплекс ESP1 / PDS1 регулирует потерю когезии сестринских хроматид при переходе от метафазы к анафазе у дрожжей». Клетка. 93 (6): 1067–76. Дои:10.1016 / S0092-8674 (00) 81211-8. PMID 9635435.
  47. ^ Александру Г., Ульманн Ф., Мехтлер К., Поупарт М.А., Нэсмит К. (май 2001 г.). «Фосфорилирование субъединицы когезина Scc1 с помощью киназы Polo / Cdc5 регулирует разделение сестринских хроматид в дрожжах». Клетка. 105 (4): 459–72. Дои:10.1016 / S0092-8674 (01) 00362-2. PMID 11371343.
  48. ^ Leismann O, Herzig A, Heidmann S, Lehner CF (сентябрь 2000 г.). «Деградация PIM дрозофилы регулирует разделение сестринских хроматид во время митоза». Гены и развитие. 14 (17): 2192–205. Дои:10.1101 / gad.176700. ЧВК 316890. PMID 10970883.
  49. ^ Зур А., Брандейс М. (февраль 2001 г.). «Распад секурина опосредуется fzy и fzr и необходим для полного разделения хроматид, но не для цитокинеза». Журнал EMBO. 20 (4): 792–801. Дои:10.1093 / emboj / 20.4.792. ЧВК 145417. PMID 11179223.
  50. ^ Sumara I, Vorlaufer E, Gieffers C, Peters BH, Peters JM (ноябрь 2000 г.). «Характеристика когезиновых комплексов позвоночных и их регуляция в профазе». Журнал клеточной биологии. 151 (4): 749–62. Дои:10.1083 / jcb.151.4.749. ЧВК 2169443. PMID 11076961.
  51. ^ Лосада А., Йокочи Т., Кобаяши Р., Хирано Т. (август 2000 г.). «Идентификация и характеристика субъединиц SA / Scc3p в комплексах когезина Xenopus и человека». Журнал клеточной биологии. 150 (3): 405–16. Дои:10.1083 / jcb.150.3.405. ЧВК 2175199. PMID 10931856.
  52. ^ Хименес-Абиан Дж. Ф., Сумара И., Хирота Т., Хауф С., Герлих Д., де ла Торре С., Элленберг Дж., Петерс Дж. М. (июль 2004 г.). «Регуляция сцепления сестринских хроматид между хромосомными плечами». Текущая биология. 14 (13): 1187–93. Дои:10.1016 / j.cub.2004.06.052. PMID 15242616.
  53. ^ Палиулис Л.В., Никлас РБ (декабрь 2004 г.). «Микроманипуляция хромосом показывает, что высвобождение когезии во время деления клеток происходит постепенно и не требует напряжения». Текущая биология. 14 (23): 2124–9. Дои:10.1016 / j.cub.2004.11.052. PMID 15589155.
  54. ^ Накадзима М., Кумада К., Хатакеяма К., Нода Т., Петерс Дж. М., Хирота Т. (декабрь 2007 г.). «Полное удаление когезина из хромосомных плеч зависит от сепарации». Журнал клеточной науки. 120 (Pt 23): 4188–96. Дои:10.1242 / jcs.011528. PMID 18003702.
  55. ^ Макгиннесс Б. Е., Хирота Т., Кудо Н. Р., Петерс Дж. М., Нэсмит К. (март 2005 г.). «Шугошин предотвращает диссоциацию когезина от центромер во время митоза в клетках позвоночных». PLOS Биология. 3 (3): e86. Дои:10.1371 / journal.pbio.0030086. ЧВК 1054882. PMID 15737064. открытый доступ
  56. ^ Салик А., Уотерс Дж. С., Митчисон Т. Дж. (Сентябрь 2004 г.). «Шугошин позвоночных связывает сцепление сестринских центромер и стабильность микротрубочек кинетохор в митозе». Клетка. 118 (5): 567–78. Дои:10.1016 / j.cell.2004.08.016. PMID 15339662.
  57. ^ а б c d Де Антони А., Пирсон К.Г., Чимини Д., Канман Дж. С., Сала V, Нези Л., Мапелли М., Сирони Л., Фаретта М., Лосось ED, Мусаккио А. (февраль 2005 г.). «Комплекс Mad1 / Mad2 как шаблон для активации Mad2 в КПП шпиндельной сборки». Текущая биология. 15 (3): 214–25. Дои:10.1016 / j.cub.2005.01.038. PMID 15694304.
  58. ^ а б c d е ж грамм Musacchio A, Salmon ED (май 2007 г.). «Шпиндельно-сборочный пункт в пространстве и времени». Обзоры природы. Молекулярная клеточная биология. 8 (5): 379–93. Дои:10.1038 / nrm2163. PMID 17426725.
  59. ^ Мартин-Луесма С., Штук В.М., Нигг Е.А. (сентябрь 2002 г.). «Роль Hec1 в передаче сигналов контрольной точки веретена и рекрутинг кинетохор Mad1 / Mad2». Наука. 297 (5590): 2267–70. Bibcode:2002Наука ... 297.2267M. Дои:10.1126 / science.1075596. PMID 12351790.
  60. ^ Lens SM, Wolthuis RM, Klompmaker R, Kauw J, Agami R, Brummelkamp T, Kops G, Medema RH (июнь 2003 г.). «Survivin требуется для длительного останова контрольной точки шпинделя в ответ на отсутствие напряжения». Журнал EMBO. 22 (12): 2934–47. Дои:10.1093 / emboj / cdg307. ЧВК 162159. PMID 12805209.
  61. ^ Hauf S, Cole RW, LaTerra S, Zimmer C, Schnapp G, Walter R, Heckel A, van Meel J, Rieder CL, Peters JM (апрель 2003 г.). «Небольшая молекула гесперадина показывает роль Aurora B в исправлении прикрепления кинетохора к микротрубочкам и в поддержании контрольной точки сборки веретена». Журнал клеточной биологии. 161 (2): 281–94. Дои:10.1083 / jcb.200208092. ЧВК 2172906. PMID 12707311.
  62. ^ Аравамудхан П., Гольдфарб А.А., Джоглекар А.П. (июль 2015 г.). «Кинетохора кодирует механический переключатель для нарушения сигнализации контрольной точки узла шпинделя». Природа клеточной биологии. 17 (7): 868–79. Дои:10.1038 / ncb3179. ЧВК 4630029. PMID 26053220.
  63. ^ Альбертс Б., Джонсон А., Льюис Дж, Морган Д., Рафф М., Робертс К., Уолтер П. (2015). Молекулярная биология клетки (6-е изд.). Нью-Йорк, штат Нью-Йорк: Garland Science, Taylor & Francis Group. п. 988. ISBN 978-0-8153-4432-2.
  64. ^ Копс Г.Дж., Уивер Б.А., Кливленд Д.В. (октябрь 2005 г.). «На пути к раку: анеуплоидия и митотическая контрольная точка». Обзоры природы. Рак. 5 (10): 773–85. Дои:10.1038 / nrc1714. PMID 16195750.
  65. ^ Ленгауэр С., Кинзлер К.В., Фогельштейн Б. (декабрь 1998 г.). «Генетическая нестабильность при раке человека». Природа. 396 (6712): 643–9. Bibcode:1998Натура 396..643л. Дои:10.1038/25292. PMID 9872311.
  66. ^ Weaver BA, Cleveland DW (декабрь 2006 г.). «Анеуплоидия вызывает рак?». Текущее мнение в области клеточной биологии. 18 (6): 658–67. Дои:10.1016 / j.ceb.2006.10.002. PMID 17046232.
  67. ^ Кэхилл Д.П., Ленгауэр К., Ю. Дж., Риггинс Г. Дж., Уилсон Дж. К., Марковиц С. Д., Кинзлер К. В., Фогельштейн Б. (март 1998 г.). «Мутации генов митотических контрольных точек при раке человека». Природа. 392 (6673): 300–3. Bibcode:1998Натура.392..300С. Дои:10.1038/32688. PMID 9521327.
  68. ^ Диас-Родригес Э., Альварес-Фернандес С., Чен Х, Пайва Б., Лопес-Перес Р., Гарсиа-Эрнандес Дж. Л., Сан-Мигель Дж. Ф., Пандиелла А. (2011). «Неисправность узла шпинделя при множественной миеломе». PLOS One. 6 (11): e27583. Bibcode:2011PLoSO ... 627583D. Дои:10.1371 / journal.pone.0027583. ЧВК 3223182. PMID 22132115. открытый доступ
  69. ^ Грейди, Уильям М. (2004). «Геномная нестабильность и рак толстой кишки». Обзоры рака и метастазов. 23 (1–2): 11–27. Дои:10.1023 / А: 1025861527711. PMID 15000146.
  70. ^ Ван РХ, Ю Х, Дэн СХ (декабрь 2004 г.). «Требование наличия гена 1, связанного с раком груди (BRCA1), в контрольной точке веретена». Труды Национальной академии наук Соединенных Штатов Америки. 101 (49): 17108–13. Bibcode:2004PNAS..10117108W. Дои:10.1073 / pnas.0407585101. ЧВК 535394. PMID 15563594.
  71. ^ Сотилло Р., Эрнандо Е., Диас-Родригес Е., Теруя-Фельдштейн Дж., Кордон-Кардо С., Лоу С.В., Бенезра Р. (январь 2007 г.). «Сверхэкспрессия Mad2 способствует анеуплоидии и онкогенезу у мышей». Раковая клетка. 11 (1): 9–23. Дои:10.1016 / j.ccr.2006.10.019. ЧВК 1850996. PMID 17189715.
  72. ^ Ямамото Й, Мацуяма Х, Чочи Й, Окуда М., Каваути С., Иноуэ Р., Фуруя Т., Ога А., Наито К., Сасаки К. (апрель 2007 г.). «Сверхэкспрессия BUBR1 связана с хромосомной нестабильностью при раке мочевого пузыря». Генетика и цитогенетика рака. 174 (1): 42–7. Дои:10.1016 / j.cancergencyto.2006.11.012. PMID 17350465.
  73. ^ а б Weaver BA, Cleveland DW (июнь 2009 г.). «Роль анеуплоидии в развитии и подавлении опухолей». Журнал клеточной биологии. 185 (6): 935–7. Дои:10.1083 / jcb.200905098. ЧВК 2711620. PMID 19528293.
  74. ^ Кросс, Шон М .; Санчес, Карисса А; Морган, Кэтрин А .; Schimke, Melana K .; Рид, Брайан Дж. (1995). «Р53-зависимая контрольная точка веретена мыши». Наука. 3 (5202): 1353–1356. Bibcode:1995 Наука ... 267.1353C. Дои:10.1126 / science.7871434. PMID 7871434.
  75. ^ Альтиери, округ Колумбия (декабрь 2001 г.). «Молекулярные основы и потенциальная роль сурвивина в диагностике и терапии рака». Тенденции в молекулярной медицине. 7 (12): 542–7. Дои:10.1016 / S1471-4914 (01) 02243-2. PMID 11733216.
  76. ^ Gisselsson D, Håkanson U, Stoller P, Marti D, Jin Y, Rosengren AH, Stewénius Y, Kahl F, Panagopoulos I (апрель 2008 г.). «Когда геном играет в кости: обход контрольной точки сборки веретена и почти случайная сегрегация хромосом в митозах мультиполярных раковых клеток». PLOS One. 3 (4): e1871. Bibcode:2008PLoSO ... 3.1871G. Дои:10.1371 / journal.pone.0001871. ЧВК 2289843. PMID 18392149. открытый доступ
  77. ^ Чжоу Дж., Джаннакаку П. (январь 2005 г.). «Нацеливание микротрубочек для химиотерапии рака». Современная лекарственная химия. Противораковые средства. 5 (1): 65–71. Дои:10.2174/1568011053352569. PMID 15720262.
  78. ^ а б Карвахаль Р.Д., Це А., Шварц Г.К. (декабрь 2006 г.). «Аврора киназы: новые мишени для лечения рака». Клинические исследования рака. 12 (23): 6869–75. Дои:10.1158 / 1078-0432.CCR-06-1405. PMID 17145803.
  79. ^ Ананд С., Пенрин-Лоу С., Венкитараман А.Р. (январь 2003 г.). «Амплификация AURORA-A отменяет контрольную точку сборки митотического веретена, вызывая устойчивость к таксолу». Раковая клетка. 3 (1): 51–62. Дои:10.1016 / S1535-6108 (02) 00235-0. PMID 12559175.
  80. ^ Харрингтон Э.А., Беббингтон Д., Мур Дж., Расмуссен Р.К., Аджос-Адеогун А.О., Накаяма Т., Грэм Дж. А., Демур С., Херсенд Т., Диу-Херсенд А., Су М., Голек Дж. М., Миллер К. М. (март 2004 г.). «VX-680, мощный и селективный низкомолекулярный ингибитор киназ Aurora, подавляет рост опухоли in vivo». Природа Медицина. 10 (3): 262–7. Дои:10,1038 / нм1003. PMID 14981513.
  81. ^ Альтиери, округ Колумбия (январь 2008 г.). «Survivin, раковые сети и открытие лекарств, направленных на пути распространения». Обзоры природы. Рак. 8 (1): 61–70. Дои:10.1038 / nrc2293. PMID 18075512.
  82. ^ Тао В., Южный VJ, Чжан И., Давиде Дж. П., Фаррелл Л., Коль Н. Э., Сепп-Лоренцино Л., Лобелл Р. Б. (июль 2005 г.). «Индукция апоптоза ингибитором митотического кинезина KSP требует как активации контрольной точки сборки веретена, так и митотического проскальзывания». Раковая клетка. 8 (1): 49–59. Дои:10.1016 / j.ccr.2005.06.003. PMID 16023598.

дальнейшее чтение

внешняя ссылка

  • Лаборатория Теда Сэлмона: фильмы о делении клеток. [1]
  • Лаборатория Андреа Мусаккио: схемы контрольных точек шпинделя. [2]
  • http://www.uniprot.org/uniprot/O60566